温度和pH对黑鲷主要消化酶活性的影响

本试验研究了温度和pH值对黑鲷胃、肠及肝胰脏中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等3种主要消化酶活性的影响.结果表明:黑鲷蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的最适温度分别为50℃,40℃和30℃;在胃,蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的最适pH值分别为2.0,5.0和4.0,均在酸性范围;而在肠和肝胰脏,蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的最适pH值分别是7.0,7.0,7.5和7.5,7.0,7.0,且均为中性或弱碱性.并且在适宜的温度和pH值条件下,黑鲷不同组织蛋白酶活性大小顺序为:胃>肠>肝胰脏;淀粉酶活性大小顺序为:肝胰脏>肠>胃;脂肪酶活性大小顺序为:肠>肝胰脏>胃.     

中华乌塘鳢成鱼消化酶活性的研究

对中华乌塘鳢(Bostrichthys sinensis)食道、胃、肝脏和肠道内的15种消化酶进行分布和活性测定.结果表明:胃蛋白酶和淀粉酶的最适pH分别为2.0和6.5~7.5,肠蛋白酶和淀粉酶的最适pH分别为10.5和6.5,肠胰蛋白酶、糜蛋白酶的最适pH分别为8.5和8.0.胃的酸性蛋白酶活性显著高于食道、肠道和肝脏(p<0.05),胃的氨基肽酶和碱性磷酸酶活性分别与肠Ⅰ和肠Ⅱ的无显著差异(p>0.05).肠Ⅰ的胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧肽酶A、脂肪酶、麦芽糖酶、蔗糖酶、海藻糖酶和纤维二糖酶等8种消化酶活性均显著高于肠Ⅱ和肠Ⅲ(p<0.05),肠Ⅱ的氨基肽酶、γ-谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶等3种消化酶活性均显著高于肠Ⅰ和肠Ⅲ(p<0.05),三段肠的淀粉酶活性无显著差异(p>0.05).     

兰州鲇消化器官理化特征及pH值对其消化酶活力的影响

对兰州鲇(Silurus lanzhouensisChen)消化器官的理化特征及在不同pH条件下的消化酶活力进行了研究.结果表明,兰州鲇比肠长、比胃重、比肠重、比肝胰脏重、比内脏重分别为0.91±0.25、0.0158±0.0045、0.0112±0.0054、0.0199±0.0069和0.0916±0.0293;胃、前肠、中肠、后肠壁及胆汁的pH值分别为5.5~6.5、5.5~7.0、6.0~7.0、6.0~7.0和5.5~7.0;胃、肝胰脏和肠淀粉酶最适pH值分别为5.4、6.6和7.0,脂肪酶最适pH值分别为5.4(或5.8)、6.6和6.6.兰州鲇胃和肠的pH值环境均有利于淀粉酶和脂肪酶活力的发挥.在最适pH条件下,肝胰脏淀粉酶活力略高于肠,胃淀粉酶活力最低,而肝胰脏和肠的脂肪酶活力相同,胃脂肪酶活力最高.从消化器官特点和消化道内食物组成可以看出,兰州鲇消化生理特性与其肉食性特点相适应.     

pH和温度对黄姑鱼主要消化酶活力的影响

采用酶学分析的方法,研究了在不同pH和温度下离体黄姑鱼蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性变化。结果表明:pH和温度对黄姑鱼主要消化道各部位消化酶活力多数有显著影响(P0.05),在黄姑鱼前肠、中肠、后肠、胃、肝胰脏5个部位,蛋白酶的最适pH分别为6.4、7.8、7.8、2.2、6.4,淀粉酶最适pH分别为5.0、7.8、7.8、6.4、5.0,脂肪酶的最适pH分别为5.0、6.4、7.8、3.6、5.0;在最适pH条件下,前肠、中肠、后肠、胃、肝胰脏中蛋白酶的最适温度均为40℃左右,淀粉酶的最适温度除肝胰脏中为40℃外,其他部位均为30℃,脂肪酶的最适温度均为40℃。蛋白酶活力在pH 6.4、37℃时达到最大值1 606.576±83.457 U,淀粉酶活性在pH 6.4、37℃时达到最大值188.086±17.538 U,脂肪酶在pH 5.0、40℃时达到最大值34.247±1.926 U。     

低温胁迫对罗非鱼消化酶活性的影响

本文研究12、15、20和25℃水温条件对埃及尼罗、美国尼罗和美国奥利亚罗非鱼消化酶活性的影响。结果表明,水温从25℃降到20、15和12℃,埃及尼罗罗非鱼前肠和后肠淀粉酶、肝脏淀粉酶和脂肪酶活性均显著降低(P0.05),前肠蛋白酶活性在12℃显著降低(P0.05);美国尼罗罗非鱼前肠蛋白酶和后肠淀粉酶活性显著降低(P0.05),前肠淀粉酶、肝脏淀粉酶和脂肪酶活性在12℃显著降低(P0.05);美国奥利亚罗非鱼前肠淀粉酶、肝脏淀粉酶和脂肪酶活性显著降低(P0.05),前肠蛋白酶和后肠淀粉酶活性在12、15℃显著降低(P0.05)。水温12~25℃时,罗非鱼肠道蛋白酶和淀粉酶活性均随水温的下降而降低(在12℃时最低),埃及尼罗肝脏脂肪酶活性20℃时最低,美国尼罗12℃时最低,美国奥利亚15℃时最低。     

不同温度和pH值对瘤背石磺(Onchidium verruculatum Cuvier)消化酶活性的影响

研究了温度和pH值对瘤背石磺(Onchidium verruculatum Cuvier)肠淀粉酶、肝胰腺淀粉酶和胃淀粉酶以及相应的纤维素酶活性的影响.不同温度和pH值对瘤背石磺消化酶活性的影响显著(P<0.05).当温度在5-75℃时,肠淀粉酶和纤维素酶分别在35℃和30℃时活性较高;肝胰腺淀粉酶和纤维素酶分别在35-45℃和50℃时活性较高;胃淀粉酶活性在25-45℃维持较高水平,随后随温度的升高而下降,纤维素酶活性在50℃时较高.在pH为3.0-8.0范围内,肠淀粉酶和纤维素酶的最适pH值均为6.0;肝胰腺淀粉酶和纤维素酶的最适pH值分别为6.9和5.4;胃淀粉酶和纤维素酶的最适pH值分别为6.5和6.0.在适宜温度和pH条件下,肠淀粉酶、肝胰腺淀粉酶和胃淀粉酶活性均远大于肠纤维素酶、肝胰腺纤维素酶和胃纤维素酶.     

活性微生物、pH值、温度对淡水白鲳主要消化酶活性影响的研究

经测定,淡水白鲳淀粉酶、蛋白酶的适宜温度分别为250 ℃和450 ℃;最适pH值分别为6.4和2.6.在最适温度、pH值条件下,不同组织淀粉酶活力大小顺序为肝胰脏>肠>胃,蛋白酶活力大小顺序为胃＞肠＞肝胰脏.分别用酵母菌、光合细菌作饲料添加剂拌喂淡水白鲳,结果表明酵母菌、光合细菌对生长均有明显的促进作用,能显著提高胃、肠淀粉酶和蛋白酶的活性,及提高肝胰脏淀粉酶的活性,但在一定程度上降低了肝胰脏蛋白酶的活性.     

大口黑鲈主要消化器官淀粉酶活力的研究

试验从酶学分析角度研究了大口黑鲈各消化道内淀粉酶的活力分布,以及不同温度、pH和底物浓度条件下其肝脏、幽门盲囊、胃、肠中淀粉酶的活力变化。结果表明,淀粉酶活力在消化道内活性强度存在明显差异,由高到低依次为肝脏、幽门盲囊、肠、胃。淀粉酶的活力随温度和pH变化呈现一定规律性变化,存在最适温度和pH,依次为:肝脏(40℃,7．2)、幽门盲囊(30℃,8．0)、肠(40℃,8．4)、胃(35℃,6．4)。幽门盲囊和肠淀粉酶在碱性环境下活力最大,肝胰脏和胃淀粉酶在中性或酸性条件下活力充分发挥。淀粉酶的活力大小与底物浓度有关,底物淀粉最适浓度依次为肝脏1％、幽门盲囊4％、肠2％、胃2％。本研究旨在为大口黑鲈人工饲料的研究与开发提供基础数据。     

黑斑蛙消化道淀粉酶的活力

采用3,5-二硝基水杨酸比色法对黑斑蛙( Rana nigromaculata )消化道淀粉酶的活力分布以及pH、温度和NaCl对淀粉酶活力的影响进行了研究.结果表明,黑斑蛙消化道淀粉酶的活力从高到低依次为中肠、后肠、前肠、胃和食道.胃和肠道淀粉酶的最适pH值分别为7.4和8.0,最适温度均为35℃.NaCl对淀粉酶有一定的激活作用,其最适浓度为0.15mol/L.     

温度和pH对驼背鲈消化酶活力的影响

采用酶学分析方法研究了温度和pH对驼背鲈3种主要消化酶(蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶)活力的影响。结果表明:在设定的温度和pH范围内,驼背鲈消化酶活力均随着温度和pH的升高呈先升后降的趋势。其中,胃蛋白酶的最适温度为40~45℃,肠、幽门盲囊、肝蛋白酶的最适温度均为40℃;胃脂肪酶的最适温度为35℃,幽门盲囊的最适温度为40~45℃,其他部位均为40℃;胃淀粉酶的最适温度为40℃,其他部位均为35℃。胃蛋白酶的最适pH为3.2,肠、幽门盲囊、肝的最适pH均为8.2;胃、肝脂肪酶的最适pH分别为7.2、8.2,其他部位均为6.2;胃淀粉酶的最适pH为7.2~8.2,其他器官的最适pH均为7.2。各部位在最适温度和pH下,脂肪酶酶活力顺序为肠胃肝幽门盲囊,淀粉酶酶活力顺序为肠幽门盲囊胃肝;蛋白酶在最适温度和pH下的酶活力顺序分别为肠胃肝幽门盲囊、肠胃幽门盲囊肝。     

Studies on digestive enzymes in alimentary tract of southern sheatfish (Silurus meridionalis Chen) larvae I—Trypsin and pepsin

The pepsin and trypsin activities and some of the properties of the two enzymes of southern sheatfish larvae were studied. The results were as follows: the highest level of trypsin activity is in the foregut in all measured tissues; from foregut to hindgut, trypsin activities decrease; the pH optimum of trypsin activity is pH9.0; the strongest pepsin activity is in the stomach; the proper density of haemoglobin for detecting pepsin activity is 1.0%. These data are useful in solving applied nutritional problems, such as the adequacy of artificial food to the digestive abilities of the fish. Supported by the Foundation for PhD. of Agricultural Ministry of China Huang Feng: born in mar. 1966, PhD     

异育彭泽鲫及其双亲消化酶活性的比较研究

对异育彭泽鲫及其双亲肝胰脏和前、中、后肠消化酶活性进行比较研究．结果表明:异育彭泽鲫肝胰脏及前、中、后肠的蛋白酶活性分别为367.69、101.16、297.06、25.97g/g#8226;min，均介于其双亲之间；异育彭泽鲫肝胰脏及前、中、后肠的淀粉酶活性分别为300.60、425.45、272.58、312.28g/g#8226;min，均大于双亲；异育彭泽鲫肝胰脏及前、中、后肠的脂肪酶活性分别为1.76、2.42、1.23、1.04g/g#8226;min，前肠和中肠脂肪酶活性大于双亲，后肠和肝胰脏脂肪酶活性介于双亲之间，且三种消化酶活性都比母本高.差异性分析结果表明，其与母本之间的差异显著低于其与父本的差异.研究结果符合雌核发育子代表型与母本一致的特性，并显示异源精子对雌核发育子代肝胰脏及肠管道消化酶活性有一定影响，为异育彭泽鲫的生长效应提供了一定的证据.     

长足大竹象消化道的解剖形态及电镜扫描结构研究

应用体视显微和电镜扫描技术系统地研究了长足大竹象幼虫、成虫消化道的形态结构特征.通过解剖发现,长足大竹象的消化道分前、中、后肠3部分,前肠占比最小,幼虫嗉囊不明显,无成型的前胃与贲门瓣;成虫均具有嗉囊、前胃、贲门瓣,前胃内部由8个"V"型前胃板环状排列成八角星状,前胃板上着生刚毛状角质齿,贲门瓣呈透明圆漏斗状.按外表形态,成虫中肠可分为2段,前段膨大,后段细直,表面均具绒毛;幼虫中肠可分为3段,前段粗大且表面有块状突起,中段细长且表面光滑,后段略粗,表面具绒毛.马氏管着生于中后肠交界处,3根为一束,共6根,幼虫马氏管较成虫粗,后肠占消化道总长的40%～50%左右.     

中华乌塘鳢消化道内分泌细胞的鉴别与定位

应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫细胞化学方法,对中华乌塘鳢消化道中的Som、5-HT、PP、VIP、SP和CT等内分泌细胞进行鉴别和定位.结果表明:Som细胞在贲门胃、中肠分布较多,食道与幽门胃较少.5-HT细胞在食道较为丰富,胃中次之,前肠较少.PP细胞仅分布于肠道,后肠居多,前肠、中肠较少.VIP细胞分布于食道及贲门胃,食道处较少.SP细胞在后肠较为丰富,前肠分布较少.CT细胞集中在胃部,前肠偶见,其余部位未发现.不同种类内分泌细胞的数量分布和形态特征存在一定的差异,本文对其可能的内分泌方式和功能进行了讨论.     

仁扇舟蛾幼虫肠道可培养细菌群落结构分析

【目的】了解仁扇舟蛾(Clostera restitura)肠道共生细菌的主要类群及其群落结构特征,明确仁扇舟蛾幼虫前、中和后肠可培养细菌的种类及群落结构组成,为进一步研究特异功能细菌的生理生化特征和功能提供基础。【方法】选取仁扇舟蛾5龄幼虫进行肠道解剖,分离前、中和后肠不同肠段,研磨稀释10^-1~10^-6,分别涂布于NA和LB固体培养基上,每个处理重复3次,28 ℃培养72 h。后对前、中和后肠可培养细菌进行分离纯化培养,提取细菌基因组DNA,利用 16S rDNA 基因序列分析和PCR扩增技术,获得细菌基因组序列,后与NCBI GenBank数据库进行Blast同源性比对,参考序列相似度98%以上近缘序列的物种信息,结合菌落形态特征和生理生化特性鉴定细菌种类,利用MEGA 7.0软件,采用邻接法(Neighbor-Joining)构建系统进化树。【结果】从仁扇舟蛾5龄幼虫的前、中和后肠中共分离获得22株可培养细菌,分属于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria),共13个属,22个种。其中:假单胞菌属(Pseudomonas)4株,罗尔斯通菌属(Ralstonia)3株,芽孢杆菌属(Bacillus)3株,嗜麦芽寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)2株,气球菌属(Aerococcus)2株,其余微小杆菌属(Exiguobacterium)、微球菌属(Micrococcus)、短小杆菌属(Curtobacterium)、伯克氏菌属(Burkholderia)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、节杆菌属(Arthrobacter)、短状杆菌属(Brachybacterium)和两面神菌属(Janibacter)各1株。细菌的种类存在差异,前、中和后肠不同肠段的细菌种类分别为5、10和7种。3个肠段共有的细菌种类是皮氏罗尔斯菌(Ralstonia pickettii)和斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)。【结论】仁扇舟蛾5龄幼虫肠道的可培养细菌种类较为丰富,其中以变形菌门和厚壁菌门为优势菌群。不同肠段中可培养细菌的多样性和群落结构存在差异,其中以中肠可培养细菌种类较为丰富。此次从仁扇舟蛾肠道中分离到与单宁降解相关的细菌,分析表明仁扇舟蛾肠道菌群与宿主的取食习性有关,肠道细菌可能在克服植物次生代谢物质的化学防御上发挥作用。     

pH对真鲷蛋白酶和淀粉酶活力的影响

应用酶学分析研究不同pH度条件下真鲷成鱼胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊4个部位蛋白酶和淀粉酶活力的变化.结果表明,真鲷成鱼胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊蛋白酶的最适pH分别为6.4,7.2,7.6和8.4,淀粉酶的最适pH分别为6.4,8.0,8.0和7.6.     

室内饲养松墨天牛幼虫不同肠段细菌的群落结构及功能分析

【目的】了解室内饲养松墨天牛(Monochamus alternatus)幼虫前、中、后肠段细菌的群落结构,比较不同肠段之间菌群多样性和优势菌群的差异,为揭示肠道细菌在松墨天牛获取营养、克服寄主植物化学防御的机理提供参考。【方法】分别提取室内饲养的松墨天牛4龄幼虫前、中、后肠各3组样本(每组5个前肠、5个中肠、5个后肠)的肠道DNA。利用Illumina HiSeq技术对松墨天牛幼虫肠道细菌的16S rDNA V3-V4区序列进行文库构建和高通量测序。原始序列使用Trimmomatic软件和FLASH软件分别进行质控和拼接。利用USEARCH软件对序列进行操作分类单元(OTUs)聚类,统计OTUs数量并绘制Venn图。在门和属分类水平上统计各样本的群落组成及物种丰度情况。通过Alpha多样性和Beta多样性分析反映不同样本的菌群多样性和相似性。采用PICRUSt软件预测松墨天牛幼虫肠道细菌映射到KEGG数据库上的功能,探究不同肠段细菌群落发挥的潜在功能。【结果】共获得643 404条高质量序列,在97% 相似度下将其聚类为1 614个操作分类单元(OTUs),共注释到35门、63纲、137目、250科、554属和844种。前肠OTUs最少,后肠OTUs最多,每个肠段的OTUs组成上既有相似性,也存在差异性。变形菌门(Proteobacteria)为3个肠段中最优势门;葡糖杆菌属(Gluconobacter)为前肠中最优势属,沙雷氏菌属(Serratia)为中肠的最优势属,葡糖杆菌属和沙雷氏菌属同为后肠的最优势属。Alpha多样性显示中、后肠群落多样性更丰富;Beta多样性分析表明,3个肠段的细菌群落组成存在差异,但中肠与后肠的群落组成较相近。功能预测表明,整个肠道菌群中代谢功能丰度最高,其中以糖类代谢和氨基酸代谢为主,这些功能集中在中、后肠。【结论】本实验中菌群功能是基于PICRUSt软件预测的结果,松墨天牛幼虫室内种群的前、中、后肠的细菌群落结构及不同肠段细菌的潜在功能存在差异,是由于不同肠段内的理化性质差异及其在消化中发挥的不同功能所致。肠道细菌与松墨天牛幼虫形成一个共生功能体,菌群在协助幼虫代谢物质、获取营养以及克服寄主植物化学防御方面发挥着重要作用。     

嗜盐淀粉酶产生菌的筛选鉴定及其酶学性质研究

【目的】筛选分离新的嗜盐淀粉酶产生菌,并对其进行酶学性质研究。【方法】从广西大学奶牛厂的奶牛粪便土壤中分离得到一株能产耐盐淀粉酶的菌株,利用16SrRNA序列对比进行鉴定,经破胞提取胞内总蛋白测定嗜盐淀粉酶酶学性质。【结果】经16SrRNA初步鉴定该菌株为阴沟肠杆菌属(Enterobacter cloacae)。该菌株是非嗜盐菌株,却能产生一种胞内嗜盐淀粉酶。酶学性质研究表明该酶在NaCl终浓度为4mol/L时,酶活力最强,当盐浓度为5.5mol/L时,仍能保持最高酶活的60%;以MOPS-NaCl配制的1%可溶性淀粉溶液为底物时,其最适反应温度为50℃,最适pH值为6.5,pH值在4.5~8.5时均能保持60%以上的相对活力;在35~45℃的温度范围内显示较好的稳定性,相对酶活保持在80%以上,但当温度达到50℃时,酶活力急剧下降;Ca2+浓度对酶活力几乎没有影响;EDTA浓度在10~140mmol/L时酶活力变化不大,大于140mmol/L之后,酶活力逐渐下降。【结论】该菌株是在非嗜盐菌株中发现的具有嗜盐淀粉酶基因的菌株,其嗜盐淀粉酶在高盐环境下具有很高的酶活力。     

Studies on Locusts‘ Pathogenesis and Energy Metabolic Inhibition Induced by the Insecticidal Protein Purified from Pseudomonas Pseudoalcaligenes

The insecticidal protein produced by Pseudomonas pseudoalcaligenes is purified from the suspension of the bacterial culture. As an intact molecule, the protein acts on the foregut, midgut, hindgut, vasa Malpighii and fat body, and kills locusts. The disinsection rates of feeding and injection are 63.3% and 65.7%, respectively. After 24h to 48h, it is observed that all these tissues and cells show pathological changes in varying degrees, and so did the host cellular organs of these cells, such as cytoblast, mitochondria, endoplasmic reticulum and ribosome. Particularly, the changes of the mitochondria are much more serious than those of others. Detection of oxygen electrode shows the efficiency of oxidative phosphorylation and the ATP synthesis decreases, while the activity of mitochondrial ATPase is almost not affected. That means the energy utilization of locusts is in gear, but the shortage of the supplying of energy results in their death. This research forms the substantial basis for controlling locusts.     

用酸度AG代替pH的研究

溶液的酸碱性强弱可用[H ]或pH表示,而pH的引入缺乏深刻的理论意义,一直没有一个正式的定义,同时在应用pH过程中发现存在着明显的不足.本文提出用酸度AG(AcidityGrade)代替pH,并进行了一些探讨.