河北省常栽平菇种质资源评价

为了解河北省栽培平菇种质资源情况,同时发掘优异种质资源,更好的为平菇育种工作提供基础材料,本研究收集了河北省常栽的平菇品种共83株,通过拮抗试验对其"同物异名"菌株进行初步鉴定;基于ITS序列分析进行分类鉴定.并进一步对体细胞营养非亲和菌株的天然基质生长速率、抗霉力等部分生物学特性进行了测定分析.结果表明:河北省平菇栽培品种"同物异名"现象较为严重,经拮抗试验将83个平菇菌株划分为31个不同营养亲和群;经ITS序列比对分析,31个体细胞营养非亲和菌株中包括15株糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)、9株佛州侧耳(P.floridanus)、2株白黄侧耳(P.cornucopiae)、1株肺形侧耳(P.pulmonarius)及4株未界定种;经生物学特性分析筛选出了2株棉籽壳基质生长最适宜菌株和2株棉柴屑基质生长最适宜菌株,以及7个抗霉能力较强菌株,为后续的定向育种工作提供了优良材料.     

两株产人参皂苷糖苷酶酵母菌株的18S rDNA和ITS序列分析

对两株产人参皂苷糖苷酶的酵母菌株进行核糖体18S rDNA和ITS序列克隆测定,获得了长度分别为1 477和1 478 bp的18S rDNA序列和长度分别为791和727 bp的ITS序列,对获得的基因序列进行比对及同源性分析,结果显示,两株酵母菌的18S rDNA序列的相似性达100%,而ITS序列的相似性则为66%,均与NCBI数据库中登录的啤酒酵母的相应序列同源性最高.从GenBank中选取部分不同种属的酵母菌ITS序列,以ITS为对象构建系统发育树,从分子生物学角度确定了两株酵母菌为酵母菌属的不同种类.     

用RAPD技术对两株担子菌进行聚类分析

从酸奶样品中分离到2株丝状真菌N 3、N 9,根据其菌落形态和显微特征初步鉴定为担子菌.用氯化苄法提取了这2株担子菌和6株已知担子菌的DNA.为了鉴定N 3、N 9菌株的分类地位,利用RAPD技术对这8株担子菌进行了聚类分析,初步归类N 3、N 9菌株为侧耳属(P leurotus)的菌株.     

西藏色季拉山毛壳属及形态相似属真菌的多样性及系统发育分析

从西藏色季拉山不同海拔采集的323份标本中分离毛壳属(Chaetomium)及形态相似属真菌,共分离到29个菌株,通过形态学特征将其中的27个菌株分别鉴定为3属5种:球毛壳(C.globosum)、马德拉斯毛壳(C.madrasense)、近缘毛壳(C.subaffine)、绳生二叉毛壳(Dichotomopilus funicola)和粗壮围领毛壳(Colariella robusta).通过ITS rDNA和28SrDNA D1/D2区序列构建系统发育树,分离的29个菌株被划分为6个种.碱基变异分析结果表明,ITS rDNA序列较28SrDNA D1/D2区序列变异更大,结合这两段基因序列可进行毛壳属及形态相似属真菌属内种间的系统发育研究.这些结果可丰富西藏毛壳属及形态相似属真菌资源库,为开发毛壳属及形态相似属真菌代谢产物奠定基础.     

一株产耐高温淀粉酶菌株DW027的鉴定

结合表型性状分析和16S rRNA序列及系统发育分析进行菌株的鉴定.结果显示,DW027菌体呈杆状,革兰氏染色阳性,产芽孢.在LB平板培养基上,菌落呈白色、圆形.16S rRNA基因序列分析表明,与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)标准序列的同源性达99％,初步鉴定为枯草芽孢杆菌.     

甘肃腐霉新记录种Pythium carolinianum的分离鉴定及rDNA-ITS序列分析

将诱饵法与组织分离法相结合,对甘肃中部干旱地区菜豆根围土壤中的腐霉菌进行分离,共得到6株腐霉菌株.通过挑单菌丝的方法获得纯培养菌系,在对纯化菌株形态特征、培养特性、生长速度和温度的适应范围研究的基础上,对编号为18-51 D的腐霉菌株培养后提取DNA,采用真核生物核糖体基因(rDNA)转录间隔区(ITS)通用引物ITS1(5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′)和ITS4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)进行PCR扩增;扩增产物直接测序并输出全序列,获得947 bp的序列;将该序列在GenBank中进行比对,用DNAStar分析软件将同源性较高的登记菌株的序列与18-51D腐霉菌株用邻接法构建系统发育树,结果发现18-51 D与菌株DQ211524(Pythium carolinianum)和AY987038(P.carolinianum)聚为一类.依据形态学特征和分子鉴定,将这6株腐霉菌株鉴定为卡地腐霉P.carolinia num.这是第一次在菜豆根围土壤和在甘肃分离到卡地腐霉P.carolinianum,为甘肃腐霉新记录种.用平皿法测定该菌种对三科九种栽培植物的致病性,发现所有供试植物的胚根仅部分有轻微褐变,未见对生长有明显影响,说明P.carolinianum对这些植物基本无致病性.     

利用ITS序列对两个盐藻株的分子鉴定

对实验室长期保存的两个盐藻株(Dunaliella salina)核糖体rDNA的ITS(internal transcribed space)序列(ITS1 5.8S rDNA ITS2)用PCR技术扩增并克隆,经序列测定后,与从GenBank中获得的相关序列一起构建系统发育树.结果显示:其中一个(Dunaliella salinaSHU 01)与Dunaliella viridisCONC 002的距离最近,另一个(Dunaliella salinaSHU02)与Dunaliella salinaUTEX 1644的距离最近.因此分别命名为Dunaliella viridisSHU与Dunaliella salinaSHU.     

一株盖姆斯木霉TW20050的鉴定及功能评价

明确木霉菌株TW20050的分类地位,并评价其生物学功能。通过形态学特征结合ITS、tef1及rpb2序列分析进行种类鉴定,利用菌丝生长速率法测定菌株的抑菌能力,利用透明圈大小定性检测菌株的水解酶活性。结果表明:菌株TW20050的形态学特征与Trichoderma gamsii一致,其ITS、tef1和rpb2序列与Trichoderma gamsii的同源性均达到99%以上,在以rpb2构建的系统发育进化树中,TW20050与Trichoderma gamsii strain S488[KJ665270.1]位于同一分支。菌株TW20050在PDA平板上对10种植物病原真菌均有抑制作用,对终极腐霉的抑制率最高,达92.0%。菌株TW20050具有蛋白酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶及纤维素酶活性,其中蛋白酶活性和纤维素酶活性较高,透明圈宽度分别为9.8 mm和6.5 mm。综合形态学特征和序列分析,将菌株TW20050鉴定为盖姆斯木霉。菌株TW20050不但对植物病原真菌具有广谱抗性,而且具有多种水解酶活性,是一株较有潜力的生物防治菌株。     

平菇子实体发育过程的初步研究

本文初步研究了栽培平菇之一的紫孢侧耳[Pleurotus Sapidus(Schulz)Sacc.]子实体的发育,阐明了与外部形态特征相关的一些内部分化过程。提出把平菇子实体的发育过程分为三个时期:子实体原基发生期,子实体分化形成期和子实体生长期。并就子实体的个体发育特征,讨论了侧耳属(Pleurotus)的系统发育地位,以及与人工栽培有关的同题。     

柑橘青霉菌的分离鉴定与特性分析

从发病柑橘表面分离得到了42株青霉致病菌,并分别扩增得到其rDNA转录间隔区序列(ITS).通过对rDNA ITS的生物信息学和系统发育分析,并结合菌落形态特征,这些菌株分别被鉴定为指状青霉(P. digitatum)、意大利青霉(P. italicum)、皮落青霉(P. crustosum)、小刺青霉(P. spinulosum)和草酸青霉(P. oxalicum).分析发现：这些致病菌呈现出明显的区域特异性.该方法可以快速、可靠的鉴定柑橘采后真菌病害,为有效防治提供一定理论依据和指导.     

杏鲍菇菌株的rDNA ITS序列鉴定和同工酶分析

【目的】鉴于诱变处理后杏鲍菇菌株在栽培性状上的明显差异,对两株杏鲍菇菌株(杏A和杏B)进行分子水平上的鉴定,分析两者的差异性。【方法】对杏鲍菇菌丝体样本的rDNA基因内转录间ITS片段进行PCR扩增并测序验证;同时应用同工酶电泳对菌丝体的酯酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶进行分析。【结果】通过GenBank数据库搜索和序列比对分析,两株菌株ITS序列相似度达到99%;菌丝体的酯酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶同工酶电泳检测无差异。【结论】杏A和杏B菌株为同一菌株,在分子水平上差异不明显。     

中国大陆H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传分析及抗原相关性研究

为研究我国大陆H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的分子进化及抗原相关性, 本研究对来自15个省、市、自治区的34株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进行了测序及系统发育分析, 并采用交叉血凝抑制试验及交叉攻毒保护试验对不同遗传分支下毒株间抗原相关性进行了分析. 结果表明, 所有34个毒株HA基因均符合低致病性禽流感病毒的特征, 但毒株间变异程度增加. 系统发育分析表明, 我国大陆H9N2亚型禽流感病毒主要分为三个系列, 各系列内毒株没有明显的地区及时间特征. 抗原相关性研究表明, 不同遗传系列下的毒株其抗原相关性明显低于同一系列内部毒株间的抗原相关性, 说明我国H9N2亚型禽流感病毒抗原性差异较大. 此外, 本研究同时筛选得到了用于制备多价苗的代表毒株.     

Isolation and characterization of H7N9 viruses from live poultry markets--Implication of the source of current H7N9 infection in humans

On March 31, 2013, the National Health and Family Planning Commission announced that human infections with a previously undescribed influenza A (H7N9) virus had occurred in Shanghai and Anhui Province, China. To investigate the possible origins of the H7N9 viruses causing these human infections, we collected 970 samples, including drinking water, soil, and cloacal and tracheal swabs of poultry from live poultry markets and poultry farms in Shanghai and Anhui Province. Twenty samples were positive for the H7N9 influenza virus. Notably, all 20 viruses were isolated from samples collected from live poultry markets in Shanghai. Phylogenetic analyses showed that the six internal genes of these novel human H7N9 viruses were derived from avian H9N2 viruses, but the ancestor of their HA and NA genes is uncertain. When we examined the phylogenetic relationship between the H7N9 isolates from live poultry markets and the viruses that caused the human infections, we found that they shared high homology across all eight gene segments. We thus identified the direct avian origin of the H7N9 influenza viruses that caused the human infections. Importantly, we observed that the H7N9 viruses isolated from humans had acquired critical mutations that made them more "human-like". It is therefore imperative to take strong measures to control the spread of H7N9 viruses in birds and humans to prevent further threats to human health.     

应变对石墨型B3N4几何与电子结构的影响

通过密度泛函理论研究了非磁状态下应变对石墨型B3N4（g-B3N4）几何与电子结构的影响：结果发现g-B3N4结构具有较高的稳定性,是性能良好的导体,导电电荷主要是N中P电子贡献;随着材料由压缩到拉伸,材料的导电能力变弱,暗示了又一无金属元素导体材料g-B3N4的可靠存在.     

菌草工厂化栽培杏鲍菇研究

利用菌草替代木屑和棉籽壳作栽培配料,进行工厂化栽培杏鲍菇(Pleurotus eryngii)研究.试验以金针菇(Flammulina velutipes)工厂化栽培配方作对照,设置含菌草不同比例的配方3组,每组配方配制栽培50袋.结果表明,不同比例菌草配方菌丝满袋时间比对照缩短1～4d,生长周期比对照缩短3～9d,菌草可以促进杏鲍菇生长.不同比例菌草配方栽培杏鲍菇的生物率为73%～83%,单朵菇重72～91g,而对照的仅为71%和65g,菌草工厂化栽培杏鲍菇的商品率较高.     

设施栽培杏鲍菇不同菌株抗杂能力及产量比较

在福建省农业科学院南通食用菌设施栽培基地进行设施栽培杏鲍菇（Pleurotuseryngii）试验,比较Pel、Pe2、Pe3、Pe4、Pe5、Pe6一共6种杏鲍菇菌株对绿色木霉（Trichodermaviride）和假单孢杆菌（Pseudomonadicbacilus）的拮抗能力、菌株栽培袋污染率及菌株产量。结果显示,不同菌株对绿色木霉的拮抗作用从大到小依次为Pe5〉Pe3〉Pe2〉Pel〉Pe6〉Pe4,对假单孢杆菌的拮抗作用从大到小依次为Pe5〉Pel〉Pe3〉Pe2〉Pe6〉Pe4;不同菌株栽培袋污染率从小到大依次为Pe5〈Pe3〈Pe2〈Pel〈Pe6〈Pe4;不同菌株单袋产量以Pe5菌株最高（180g）,与其它5菌株相比均达到显著或极显著差异。Pe5是适宜设施栽培的优良菌株。     

N—取代—1,8—萘二甲酰亚胺类荧光物的合成

选用ＫＦ／Ａｌ２Ｏ３作催化剂，从１，８－萘二甲酸酐出发分别合成了３取代及４取代两个系列１８个Ｎ－取代－１，８－萘二甲酰亚胺类荧光物，讨论了它们的结构与荧光光谱特征的关系     

坛紫菜耐低氮磷品系选育的研究

在含氮量仅为海区的1/100、含磷量仅为海区的1/15的低氮、磷环境下,对人工选育和建立纯系的坛紫菜褐绿色、红棕色品系3代叶状体(F1、F2、F3)的耐受力情况及生长情况进行研究,发现2个品系的藻体均具有极强的耐低氮、磷能力:1)褐绿色藻体在低氮、磷环境下培养21 d才停止生长,叶片无成熟现象,仅轻微的腐烂和萎缩.3～4 cm长的藻体培养7～9 d时的长度日生长量是对照组的4.73倍,鲜重日增重率是对照组的5.29倍;培养18～21 d时的长度日生长量为(0.86±0.27)cm,鲜重日增重率为(5.32±0.21)%.褐绿色品系F3代的平均长度比对照组长28.7 cm.2)红棕色藻体在相同条件下培养15 d后停止生长,叶片无成熟、腐烂和萎缩,3代叶状体在低氮、磷甚至无氮、磷环境下的耐受力和生长状况均比较稳定且有所提高,遗传性状比较稳定.3～4 cm长的红棕色藻体在低氮、磷环境下培养7～9 d时的长度日生长量是对照组的4 95倍,鲜重日增重率是对照组的3.58倍;培养13～15 d时藻体的长度日生长量为(1.92±0.53)cm,鲜重日增重率为(13.61±0.46)%.F3代的平均长度比对照组长23.16 cm.3)通过选育可以看出褐绿色品系比较耐低氮、磷,该品系可以较好地解决养殖过程中低氮、磷环境对于紫菜养殖所造成的危害,缓解由于养殖密度过大而造成的病害发生和减产、减收现象.     

Amino acid sequence changes in the haemagglutinin of A/Hong Kong (H3N2) influenza virus during the period 1968--77

Haemagglutinin molecules from nine strains of A/Hong Kong/68 (H3N2) influenza virus, isolated between 1968 and 1977, were examined for changes in amino acid sequences. At least 18 changes, 9 of which were located precisely, occurred in the soluble tryptic peptides of the large haemagglutinin polypeptide (HA1) during this period. These peptides contained 262 residues (82% of HA1). In HA2, only two changes in 129 residues (58% of HA2) were detected. Sequential changes at a particular locus were not found; and as far as we can tell, once an amino acid changed, it did not change again in any subsequent variant examined.