猪小肠抗菌肽的提取及部分生物学活性研究

将新鲜猪小肠超声破碎,经高温处理、乙酸浸提后,再经Sephadex G100和Sephadex G25凝胶柱过滤层析,收集各组分并用琼脂糖弥散法检测各组分的抗菌活性。收集具有抗菌活性的组分,经Tricine SDS-PAGE,考马斯亮蓝染色后分析为一条蛋白带,分子量约为5972Da左右,得到电泳纯的猪小肠抗菌肽。该抗菌肽对大肠杆菌C84008株、金黄色葡萄球菌ATCC25923株、绿脓杆菌ATCC27853株均表现出较强的抗菌活性;并能灭活鸡传染性支气管炎病毒。     

几种离体动物细胞抗菌肽的诱导及抗菌活性的初步研究

分别选取几种离体培养的昆虫细胞、哺乳动物细胞和肿瘤细胞,用热灭活的大肠杆菌DH5a诱导细胞产生抗菌肽,诱导的上清液经三氯乙酸沉淀提取诱导蛋白,采取抑菌圈法测定其抗菌活性．对从不同种细胞中诱导产生的抗菌肽的抗菌活性进行比较,发现581、SF-9、Vero、293、PK-15和IBRS-2细胞均能产生抗菌活性物质,其中Vero细胞产生的抗菌肽活性最强．经Tricine—SDS—PAGE、银染后发现,各种细胞产生的抗菌肽分子量为7000左右．     

猪血中抗菌肽类物质的分离纯化和抗菌活性研究

利用酶解、脱色等技术,从新鲜猪血中分离提取抗菌肽,再经SephadexG-100凝胶层析纯化,收集各组分并检测其抗菌活性。采用琼脂糖弥散法检测猪血抗菌肽对大肠杆菌O88、金黄色葡萄球菌ACTT25923株、绿脓杆菌ACTT27853株、鸡巴氏杆菌、鸡致病性沙门氏菌自然分离株等5种细菌的作用;同时,采用扫描电镜观察了猪血抗菌肽与上述金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌共同培养20min后细菌形态结构的改变。结果表明,猪血抗菌肽对以上各种细菌均有不同程度的抑杀作用;扫描电镜观察发现,经抗菌肽作用20min后,这两种细菌的形态结构均发生了明显的改变,表现为细菌干瘪、皱缩、表面粗糙不平、分裂繁殖停止。这表明猪血抗菌肽不仅对供试细菌的形态结构有明显的损伤作用,同时还影响细菌的生长繁殖。     

紫贻贝加工下脚料抗菌肽的分离及其稳定性研究

以紫贻贝加工下脚料为原料,采用超声辅助乙酸粗提抗菌肽粗提物,筛选其抑菌活性敏感指示菌。在此基础上,以固相萃取、Sephadex G-25层析和半制备RP-HPLC对抗菌肽进行分离纯化及其稳定性分析。结果显示,金黄色葡萄球菌为最敏感菌株,获得的Sp40-2-4和Sp40-2-5组分抑菌活性显著高于抗菌肽粗提物(P0.05),凝胶过滤色谱分析表明Sp40-2-4组分单一,相对分子质量约为1 970.78 Da;Sp40-2-4组分具有一定的热稳定性(100℃、20 min,抑菌活性残留率72.42%)、反复冻融性(冻融次数≤10,抑菌活性残留率91.42%以上)和抗胃蛋白酶水解能力(抑菌活性残留率75.59%)。     

鳞翅目昆虫细胞抗菌肽的诱导、筛选及抗菌活性的研究

选取3种离体培养的鳞翅目昆虫细胞系，采用热灭活的大肠杆菌诱导的方法，诱导其产生抗菌肽，并进行抗菌活性检测、诱导动力学研究及Tricine SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析．结果筛选到1株诱导抗菌活性较高的昆虫细胞系——粉纹夜蛾BTI-Tn-5B1细胞系，并发现该粉纹夜蛾5B1细胞在诱导后16h产生了1个分子量大约为8000的抗菌肽，抗菌活性检测表明其对金黄色葡萄球菌（Sta phylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli K12D31）、德氏卑沙门氏菌（Salmonella derby）均有不同程度的抑制作用，其中特别是对革兰氏阴性菌——大肠杆菌K12D31和德氏卑沙门氏菌有较强的抑菌活性．     

外源氨基酸对侧孢短芽孢杆菌S62-9产Brevilaterin的影响

为探究添加外源氨基酸对侧孢短芽孢杆菌S62-9(Brevibacillus laterosporus S62-9, BL)分泌抗菌肽Brevilaterin的影响,以BL发酵液的抗菌活性和Brevilaterin的组分变化为指标,分别采用琼脂扩散法和高效液相色谱法进行了分析。结果表明:添加L-缬氨酸、L-甲硫氨酸和2-氧代-3-甲基丁酸均能提高发酵液抗菌活性,抑菌直径最高可增加18.08%。添加外源氨基酸还能改变Brevilaterin的组分构成。添加L-甲硫氨酸后发酵液中只有抗菌肽组分Brevilaterin B和C,且二者间的相对比例发生反转;而添加L-缬氨酸或2-氧代-3-甲基丁酸还能促进BL分泌多种新组分。添加外源氨基酸能有效提高发酵液抗菌活性并改变抗菌肽的组分构成,研究结果旨在为人工调控微生物合成新型、高效的抗菌肽奠定一定的理论基础。     

柞蚕抗菌蛋白纯化及性质

从雄性柞蚕（Ａｎｔｈｅｒａｅａ ｐｅｒｎｙｉ）蛹中分离和纯化抗菌蛋白。该抗菌蛋白由大肠杆菌诱导产生,经过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０分离纯化,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测中表现为一条带,分子量在１５ｋＤａ左右。纯化产物对大肠杆菌有明显抗菌活性,对血细胞没有凝集作用,是抗菌蛋白。     

柞蚕抗菌蛋白纯化及性质

从雄性柞蚕（ Ａｎｔｈｅｒａｅａ ｐｅｒｎｙｉ） 蛹中分离和纯化抗菌蛋白．该抗菌蛋白由大肠杆菌诱导产生,经过 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ５０ 分离纯化,在 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 检测中表现为一条带,分子量在１５ ｋ Ｄａ 左右．纯化产物对大肠杆菌有明显抗菌活性,对血细胞没有凝集作用,是抗菌蛋白．     

国内期刊亮点

正乙酸钙不动杆菌磷脂酶C在大肠杆菌中重组表达、纯化及酶学性质江南大学汪艳红等以A.calcoaceticus ATCC17902基因组DNA为模板,PCR扩增得到2段磷脂酶C基因(PLC1、PLC2),构建重组大肠杆菌表达质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,实现PLC1、PLC2基因的表达。IPTG诱导表达后,经镍柱亲和层析纯化重组蛋白。成功构建2株产磷脂酶C的重组大肠杆菌并纯化,样品经SDS-PAGE分析在80 k Da附近均出现显著的特异性条带。得到了酶的活性、最适温度、最适p H的等酶     

宣威火腿中抗菌肽的分离、纯化及鉴定

为探究干腌火腿中生物活性多肽的抗菌活性及其组成,选取产自中国云南省曲靖地区的宣威火腿为材料,通过缓冲液浸提的方法提取火腿中的多肽成分。以粗提多肽对单增李斯特菌和O157型大肠杆菌的生长抑制情况为指标进行抗菌性评价,同时结合离子交换色谱、尺寸排阻色谱等技术对宣威火腿粗多肽进行分离与纯化,并选取其中抑菌活性较强的组分进行氨基酸序列测定。抑菌实验发现宣威火腿粗多肽具有显著抑制单增李斯特菌和O157型大肠杆菌生长的效果；经过逐级分离纯化得到的各组分具有不同的抑菌活性。其中组分7活性最强,对大肠杆菌和李斯特菌的抑菌率分别为98%和56%。通过Nano-LC-ESI-MS/MS肽序列鉴定,最终得到抑菌活性较强的多肽序列,分别为QYYNGEEHVRFDSDVGEYR、LRNLPNLEVLDLGTNFI、FASFEAQGALANIAVDK。将鉴定得到的3条多肽化学合成后进行抑菌实验发现,合成多肽均具有较好的抑菌效果,对O157型大肠杆菌的生长抑制效果均显著高于单增李斯特菌。研究结果表明宣威火腿中含有抑菌效果的肽类成分,从而为阐释宣威火腿多肽的功能特征提供理论依据。     

抗菌剂及抗菌材料的发展和应用

综述了近年来抗菌剂在国内外的研究开发及抗菌材料的应用发展状况，探讨了抗菌剂在今后几年内的发展方向，指出国内抗菌剂在发展中需要注意的问题。     

天然抗菌整理物质抗菌性能的实验

研究了由天然物质经加工制得的抗菌整理物质的抗菌机理．通过抑菌试验了解该抗菌整理物质的抑菌作用;通过动物急性毒性试验和动物皮肤的刺激试验,了解该抗菌整理物质的使用安全性,为进一步研究织物抗菌整理提供理论依据。     

扩菌沸石抗菌效果实验方法的研究和改进

采用液相离子交换法制备13X载铜抗菌沸石,对指标菌大肠杆菌（8099）、绿脓杆菌（ATCC27853）、金黄色葡萄球菌（ATCC6583）以及蜡样芽孢杆菌进行了抗菌试验,完善了抗菌沸石杀菌率量化的实验方法。结果表明该改性沸石抗菌效果优异,杀菌率均达到99．99％以上。     

银的抗菌作用机理

介绍银的抗菌机理的4种理论：静电吸附杀菌、金属溶出杀菌、光催化杀菌和复合作用杀菌。分析银的抗菌机理与抗菌材料载体种类、细菌结构与成分及银的价态的关系。要得到既长效又广谱、既高效又安全的银系抗菌材料，有必要对银的抗菌机理进行更深入的研究。     

抗菌水泥抗菌性能检测方法的初步探讨

抗菌水泥产品的日益丰富急需相应的方法来检测其抗菌性能。通过微生物细菌与抗菌水泥的共培养,采用平板计数法计算活菌数,定量鉴定抗菌水泥的抗菌性能。与普通水泥相比,抗菌水泥的活菌数明显要少。说明通过此方法可以快速检测抗菌水泥的抗菌性能,对抗菌材料抗菌性能检测方法的建立具有重要的参考意义。     

抗菌陶瓷的研究进展

为开拓传统陶瓷的应用范围，研究开发具有实用价值的抗菌陶瓷材料，掌握抗菌陶瓷的最新发展方向，本文介绍了陶瓷的抗菌机理，综述了成本低、适宜于规模生产的抗菌陶瓷材料的先进制备工艺及抗菌性能的研究开发现状，指出了抗菌陶瓷具有广谱抗菌、高效、无毒、持久和耐热性，抗菌陶瓷的市场潜力巨大，前景十分广阔。     

抗菌建筑陶瓷研制

 在陶瓷釉中引入自制新型无机抗菌材料,研究出了制备抗菌建筑陶瓷的配方和一次烧成工艺,并完成了工业性中间试验.其各种性能指标除达到建筑陶瓷的标准要求外还具有良好的抗菌效果.     

抗菌不锈钢的制备与应用

介绍抗菌不锈钢的制备方法及应用，并讨论了抗菌不锈钢的抗菌机理。     

抗菌纤维的研究进展

综述了抗菌纤维的性质及其加工方法，并对抗菌纤维中所用的抗菌剂进行了介绍，对抗菌纤维的发展进行了展望．     

真丝织物银抗菌整理

先用硝酸银溶液整理真丝织物,再用在位还原法在丝织物上生成银颗粒,赋予织物优良的抗菌性能.考察了不同消解介质对织物上银含量测定的影响,测定了整理后织物的白度、耐洗牢度及抗菌效果.实验结果表明：用HNO3/H2O2/HCL介质消解真丝,可以得到稳定的测定结果;使用质量浓度为2~8 mg/L的整理液整理时,织物白度受到的影响小,抗菌能力优异,织物上银的耐洗牢度强.