优化提取与分离海兔大脑神经节蛋白质组

蓝斑背肛海兔（Notarcus Leachii cirrosus Stimpson，NLCS）属于海洋软体动物．NLCS大脑神经节（cerebral ganglion，CG）富含高丰度的脂类物质，并干扰了三氯醋酸-丙酮法沉淀CG蛋白质．本实验的目的是找到一种适合提取、分离海兔CG蛋白的方法．经各种实验方法对比后，发现超速离心法能有效分离CG破碎液中的脂类化合物，提高双向凝胶电泳法分离BG蛋白质组的分辨率，大约可检测到450个蛋白质点．     

优化海兔肝蛋白质组提取与分离技术

为了提高海兔肝脏蛋白质组的提取及研究效率，本文描述和比较了3种提取海兔肝脏蛋白质组的方法：裂解液浸泡-超速离心，丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡，裂解液浸泡-丙酮-TCA-裂解液溶解．然后采用常规SDS-PAGE双向电泳对提取出的蛋白质进行检验，用Melanie 4 Trial软件分析电泳图谱，通过对蛋白质分辨率和斑点总数的比较，选出一种更适合海兔肝蛋白质的提取方法．结果表明采用丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡法提取海兔肝蛋白质所得的双向电泳图谱不论从蛋白质斑点分辨率还是总数上都优于其他两种方法，更适合提取分离海兔肝脏蛋白质．     

优化海兔肝蛋白质组提取与分离技术

为了提高海兔肝脏蛋白质组的提取及研究效率,本文描述和比较了3种提取海兔肝脏蛋白质组的方法裂解液浸泡-超速离心,丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡,裂解液浸泡-丙酮-TCA-裂解液溶解.然后采用常规SDS-PAGE双向电泳对提取出的蛋白质进行检验,用Melanie 4 Trial软件分析电泳图谱,通过对蛋白质分辨率和斑点总数的比较,选出一种更适合海兔肝蛋白质的提取方法.结果表明采用丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡法提取海兔肝蛋白质所得的双向电泳图谱不论从蛋白质斑点分辨率还是总数上都优于其他两种方法,更适合提取分离海兔肝脏蛋白质.     

提取与分离方法影响海兔口腔神经节蛋白质组的分离效果

选用丙酮沉淀法和直接裂解法分别提取离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosus Stimpson, NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)全蛋白质,发现采用直接裂解法所获得BG蛋白质种类多于丙酮沉淀法.在第一向等电聚焦电泳 (IEF)中,分别选用pH 为3.0～9.0, 4.0～6.0和 5.0～8.0 的载体两性电解质,发现载体两性电解质pH 范围为5.0～8.0时分离效果最好.使用Melanie 4 Trial软件统计BG蛋白质斑点数目约为290点,适于开展BG蛋白质组学研究.     

HPLC和MALDI-TOF质谱技术研究海兔口腔神经节多肽组分与分布

蓝斑背肛海兔中枢神经系统相比于其他海兔，缺少脏神经节．口腔神经节是蓝斑背肛海兔的主要神经节之一，它控制着口腔和其他附属器官的生理活动，其中多肽起着重要的作用．本文选用反相高效液相色谱和质谱非在线联用技术分析口腔神经节多肽组成与分布情况，发现口腔神经节含有丰富的神经活性多肽组分，以颊肽、肌肉调节素、心脏活性小肽、肌动蛋白片段和吸引素为主．经Paws软件和数据库检索分析后，发现部分多肽组成来自于前体蛋白的酶解产物，认为这些酶解产物与其他多肽一同参与执行口腔神经节各种不同的生理功能．     

HPLC和MALDI-TOF质谱技术研究海兔口腔神经节多肽组分与分布

蓝斑背肛海兔中枢神经系统相比于其他海兔,缺少脏神经节. 口腔神经节是蓝斑背肛海兔的主要神经节之一,它控制着口腔和其他附属器官的生理活动,其中多肽起着重要的作用. 本文选用反相高效液相色谱和质谱非在线联用技术分析口腔神经节多肽组成与分布情况,发现口腔神经节含有丰富的神经活性多肽组分,以颊肽、肌肉调节素、心脏活性小肽、肌动蛋白片段和吸引素为主.经Paws软件和数据库检索分析后,发现部分多肽组成来自于前体蛋白的酶解产物,认为这些酶解产物与其他多肽一同参与执行口腔神经节各种不同的生理功能.     

金乌贼视神经节蛋白质组分离方法的初步研究

选用TCA/丙酮沉淀法、缓冲液法、柱层析法、裂解液法和裂解液-超速离心法分别提取金乌贼视神经节蛋白质,其中蛋白质得率较高的方法有裂解液-超速离心法、裂解液法,其次为TCA/丙酮沉淀法.经双向凝胶电泳分离,并采用Melanie 4 Trial软件统计蛋白质斑点数目.发现pH 5~8范围的载体两性电解质适合于分离视神经节蛋白质组,其电泳图谱中多数蛋白质斑点清晰可见,显示出高分辩率、重复性好和易取样供质谱分析的优点,适合于开展视神经节蛋白质组学研究.裂解液-超速离心法是金乌贼视神经节最佳蛋白质提取方法.     

蛋白质组亲和分离研究(Ⅰ)蛋白质氨基生物素化反应条件的研究

运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,以马心肌红蛋白为代表研究蛋白质氨基生物素化的条件,包括蛋白质与生物素量的关系、反应物浓度、反应完全所需的时间以及蛋白质助溶剂对反应的影响等,为基于生物素—抗生物素蛋白质相互作用的亲和分离,简化复杂蛋白质组体系,实现蛋白质的分析鉴定奠定基础。     

蛋白质组浅谈

本文将针对蛋白质组的概念、方法、常用研究技术以及目前现状作一简单的介绍 .     

甘蔗叶片蛋白质组双向电泳技术优化

为了建立适合甘蔗叶片蛋白质组研究的双向电泳技术,对甘蔗叶蛋白质的溶解方法、IEF电泳、上样量等关键步骤进行了优化.结果表明:裂解液中有2 mmol/L的硫脲才能更充分地溶解蛋白;上样量1.0 mg时得到质量较好的凝胶图谱;甘蔗叶片蛋白质主要分布在pH4～7范围.通过对甘蔗叶片蛋白双向电泳技术的优化,提高了双向电泳图谱分...     

大豆异黄酮提取及纯化分离工艺探索

通过溶剂提取、浓缩、离心，然后进行层析分离，从大豆原料中提取及纯化分离大豆异黄酮，大豆异黄酮质量分数由原料中的0．0955％增加为提取液的0．582％，层析分离后达到8．23％，含量测定用HPCL法。     

板栗壳中黄酮类生物活性成分的提取与微乳薄层分离分析

利用正交实验研究了提取温度、时间、溶剂浓度和酸碱度对板栗壳中黄酮类物质提取率的影响.结果表明在料液比为1∶20的条件下,以70%的碱性乙醇溶液为溶剂,在80℃下回流提取3h提取效果较好.进行了多项定性实验,证明了板栗壳中含有黄酮类化合物,并用微乳薄层色谱法从板栗壳中分离出3个黄酮斑点,其中一个斑点与卢丁的Rf值相同.     

薏苡仁酯的提取,分离与鉴定

禾本科植物薏仁（ＣｏｉｘＬａｃｈｙｍａ－ｊｏｂｉＬ）的种仁，称薏苡仁，我们从其丙酮提取液中提取、分离与鉴定了薏苡仁酯，它是薏苡仁有抗癌活性的有效成份     

液-液萃取从Th中分离Ac

用234Th、228Ac和139Ce 3做示踪剂,二(2-乙基己基)磷酸做萃取剂,研究了初始HNO3浓度对234Th、228Ac和139Ce 3萃取效率的影响。发现在广泛的酸度范围内,234Th均能被定量地萃取;当HNO3浓度大于2.0mol/L时,228Ac和139Ce3 的萃取效率下降到2%以下。研究了震荡时间对234Th萃取效率的影响,数据显示,1min便可达到萃取平衡。从含大量钍的溶液中分离痕量Ac的实验结果显示,用二(2-乙基己基)磷酸-苯的萃取流程,可使Ac与大量的钍分离,同时Ac的损失又较小。