采用重组小鼠凝血因子Ⅸ制备单克隆抗体的研究 |
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引用本文: | 赖立辉,陈立,包意芳,杨月涛,卢大儒,邱信芳,薛京伦.采用重组小鼠凝血因子Ⅸ制备单克隆抗体的研究[J].复旦学报(自然科学版),2000,39(3):251-253,258. |
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作者姓名: | 赖立辉 陈立 包意芳 杨月涛 卢大儒 邱信芳 薛京伦 |
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作者单位: | 1. 复旦大学 2. 中国预防医学科学院 |
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基金项目: | 国家科委八六三高科技资助项目 (Z2 0 0 2 0 1) |
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摘 要: | 将小鼠凝血因子Ⅸ (mFⅨ )cDNA蛋白编码区序列克隆至原核表达载体 pQE30 ,在大肠杆菌M 15中获得高效表达 (约占细菌蛋白总量的 5 1 2 % ) ,并经过SDS PAGE纯化获得均一的重组mFⅨ蛋白 .以此蛋白为抗原 ,免疫Lou/MN系大鼠 ,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 (Sp 2 / 0 )融合后 ,经 3次克隆化选择获 2株杂交瘤细胞(H4B5和C2B10 ) .以 1× 10 6杂交瘤细胞注射免疫缺陷型裸鼠 ,10d后获得腹水 .对此单抗的功能和特异性初步研究表明 ,所制备的抗小鼠FⅨ单抗可用于Western免疫印迹等研究 .
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关 键 词: | 凝血因子 血友病 抗mFⅨ单克隆抗体 基因治疗 |
文章编号: | 0427-7104(2000)03-0251-03 |
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