酵母细胞麦角固醇含量测定的研究

以石油醚取代正庚烷和乙醚作为萃取剂对麦角固醇含量进行了测定，并分析和比较了皂化，干细胞或湿细胞提取等条件对麦角固醇含量测定的影响，在此基础上，提出了一种快速测定发酵液中酵母麦角固醇含量的方法。     

红曲霉产生的生理活性物质的研究──Ⅰ．含麦角固醇红曲霉产红色素的条件因子及其培养条件

在研究红曲霉产生生理活性物质的过程中，获得麦角固醇含量较高的红曲霉菌株，从中选择两株进行产生红色素条件因子的研究，实验结果表明，甘油、大米粉、温度、ｐＨ对产生红曲色素具有较大的制约作用。     

红曲霉产生的生理活性物质的研究──Ⅱ．红曲霉菌株产生麦角固醇的研究

红曲霉Ｍｏｎａｓｃｕｓｐｕｒｐｕｒｅｕｓ７２１菌株不仅能产生红曲色素，而且还能产生麦角固醇。在１００ｇ干菌体中可获１ｇ以上麦角固醇。该菌株以大米粉培养基培养最适宜，发酵周期为９６ｈ，产生的麦角固醇最高吸收值为２８１ｎｍ，产生的红曲色素平均色价约为８０。     

维生素D2酵母深层培养

采用生长周期短 ,易于工业化生产的酵母为实验菌株 ,以糖厂副产物甜菜糖蜜为主要原料 ,通过发酵工程技术细胞内合成麦角甾醇 ,经中波紫外线照射直接转化为维生素D2 酵母。在优化的条件下 ,每克酵母含维生素D2 15 0 0 0国际单位。经毒理实验、临床观察表明 :无毒、无副作用 ,可有效地防治维生素D缺乏性佝偻病     

虫草真菌克列特尼棒束孢霉菌丝体主要成分分析

从新鲜冬虫夏草上分离得到一株虫草真菌,经鉴定定名为克列特尼棒束孢霉(Isaria cretacea Morris)。并对冬虫夏草和此菌干菌丝体的主要化学成分进行了比较。结果表明,冬虫夏草与克列特尼棒束孢霉的粗蛋白含量相应为23.39mg/100mg和23.69mg/100mg;氨基酸含量为6.741mg/100mg和5.762mg/100mg;虫草菌素含量为66.99μg/g和249.71μg/g。此外,对二者的甘露醇和麦角甾醇结晶的熔点、紫外光谱、红外光谱等也进行了分析,表明二者均具有相同的性质。     

酵母细胞麦角固醇的提取条件

通过对酵母细胞麦角固醇皂化提取条件的研究,并在不同的菌株上进行验证,以及与其他方法的对比,提出了对麦角固醇进行皂化提取的方法:即1 mL发酵液的离心沉淀物加2 mL 500 g/L的KOH和1.5 mL无水乙醇,85～90 ℃皂化3 h,麦角固醇提取效率较高.     

冬虫夏草(Cordyceps sinensis)菌丝体固体发酵粉中麦角甾醇的定量分析

建立了冬虫夏草固体发酵粉中以麦角甾醇含量为生物量指标的分析方法:麦角甾醇含量的RP-HPLC检测方法.采用超声和回流等方法处理样品.结果:虫草粉的乙醇提取物中游离麦角甾醇的含量为53333±603μg/g,总麦角甾醇的含量138146±1896μg/g,HPLC分析采用麦角甾醇标准品外标定量法,线性范围:057～14317μg/mL,直线回归分析方程:Y=1879X-2E-13,R2=1.精密度相对偏差(RSD):0361%.样品中麦角甾醇的含量稳定,重现性好,可以作为冬虫夏草固体发酵的生物量的控制指标.     

甘蔗糖蜜发酵高麦角固醇酵母

采用麦角固醇产量高、生长周期短、有应用潜力的酵母为菌株,以甘蔗糖蜜为培养基,通过正交实验优化发酵条件,并在500 L发酵罐进行中试放大试验.结果表明,培养48 h,麦角固醇含量可达2.39 g/1OOg菌体干重,生物量为1.79 g/lOOmL发酵液.     

HPLC—ELSD法测定麦角固醇和光化学异构体

为测定麦角固醇和维生素D2及其他光化学异构体,研究确定了HPLC-ELSD测定的色谱分离条件:Kromasil C18柱(4.6×250 mm,5 μm),流动相为体积比95:5甲醇-水溶液,流速1.3 ml/min,蒸发光散射检测器漂移管温度为75℃,气体流量1.6 L/min.在此条件下,各组分得到有效地分离,麦角固醇和维生素D2色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系(r>0.997),精密度RSD为1.89%～2.75%.最低检测限为0.05～0.1μg,回收率测定值为101.4%～102.8%.     

用酵母生产麦角固醇发酵动力学的研究

研究了酵母以蔗糖为废物发酵生产麦角固醇的动力学模型：菌体生长模型．拟合值和实验值之间的平均相对误差１３．５％；底物庶糖消耗动力学模型．拟合值和实验值之间的平均相对误差９．８８％；麦角固醇合成动力学模型：拟合值和实验值之间的平均相对误差９．０％．