苏芸金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌基因组DNA同源性及多态性的研究

用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增到６１个标准株、生产用菌株及２４个蜡状芽孢杆菌参比菌株的全ＤＮＡ指纹图,通过计算多态性扩增片段的大小,利用ＮＴＳＹＳ软件进行聚类分析,蜡状芽孢杆菌菌株并未形成独立于苏芸金芽孢杆菌的聚群,这是此近缘种ＤＮＡ分子水平高度同源的新证据．６１个苏芸金芽孢杆菌的聚类结果表明：其ＤＮＡ指纹图与Ｈ－血清型有一定相关性．与引物０９５５－０３相比,引物０９４０－１２对苏芸金芽孢杆菌不同亚种及蜡状芽孢杆菌菌株具有更高的鉴别价值,大多数特异株ＤＮＡ全指纹图有菌株特异性,证实ＲＡＰＤ－ＰＣＲ技术是苏芸金芽孢杆菌及蜡状芽孢杆菌种下分类和鉴定的简便快速有效的方法     

果蝇基因组DNA的大规模提取及其RAPD-PCR反应条件的优化

介绍了一种大规模提取高质量果蝇基因组DNA的方法，该法不需液氮研磨，不需匀浆转移，不需高速离心，全部操作在3个1.5μL离心管中完成，所以特别适用于对不同果蝇品系等多样本的大规模提取，以本法提取的DNA为模板建立了RAPD－PCR分析的最佳反应体系，获得了稳定而理想的扩增效果，特别适用于小型昆虫的群体遗传多样性研究。     

RAPD-PCR技术及其在昆虫学研究中的应用综述

聚合酶链反应 (Polymerase Chain Reaction,简称 PCR)技术是一项可在生物体外对特定 DNA序列进行快速扩增的新技术。随机扩增的多态性 DNA技术 (Random amplified polymorphic DNA,简称 RAPD)是一项基于 PCR技术上的 DNA分子水平上的大分子多态检测技术。本文对该技术在昆虫学研究领域的应用状况做了一个系统的收集和整理 ,认为它在昆虫分类、系统进化、抗药性机理及抗性基因检测等方面的研究中具有着广泛的应用前景 ,而且它的应用前景随着技术和统计方法的完善将更加广阔。     

干用辣椒RAPD—PCR反应体系正交优化的研究

以干用辣椒幼苗为材料,研究了干用辣椒RAPD分析过程中的Taq酶、Mg^2＋,dNTPs、引物、模板DNA浓度、退火温度等影响因素,建立适合干用辣椒RAPD反应的PCR体系,即25μL反应体系中含有解体Taq酶1．5U、Mg^2＋2．5mmol／L,dNTPs0．6mmol／L、引物0．8μmol／L、模板DNA60ng．扩增程序为：94℃预变性4min;94℃变性1min,37℃退火1min,72％延伸1．5min,40个循环;最后72℃副延伸5min．     

极大节旋藻RAPD-PCR反应体系的比较及优化

以极大节旋藻基因组DNA为材料,比较了节旋藻RAPD-PCR常用反应体系与2×Taq Master Mix反应体系的不同之处及扩增效果,并对2×Taq Master Mix反应体系进行了优化实验,初步建立了较理想的极大节旋藻基因组DNA的RAPD-PCR反应体系:2×Taq Master Mix 4μL,随机引物1μL,模板DNA 1μL,ddH2O4μL.优化的反应体系操作简便快捷,扩增结果稳定.