用流式细胞术研究PKC及VRP，CsA对多药抗性细胞的调制与逆转

利用流式细胞术检测抗药性细胞内Ｒｈｏ－１２３的荧光强度作为检测抗性细胞抗性程度的指标，研究了蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｈ７，肿瘤促进剂佛波酯（ＴＰＡ）对多药抗性细胞的调节；钙离子通道阻断剂维拉帕米（ＶＲＰ），免疫抑制剂（ＣｓＡ）对多药抗性的逆转作用．测定了抗性细胞细胞膜和胞浆ＰＫＣ活性水平，指出ＰＫＣ可能通过磷酸化细胞膜上的Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）来调节多药抗性细胞的抗性水平，并提供了一种筛选多药抗性逆转药物的简便方法．     

PKCα反义RNA对乳腺癌细胞增殖及cyclinD1和CDK4表达的影响

ＰＫＣ,ｃｙｃｌｉｎ和ＣＤＫ基因直接参于调控细胞的增殖与分化,因此它们在细胞癌变中的作用已成为重要的研究课题。利用反义ＲＮＡ技术抑制ＰＫＣａ基因的表达,然后观察分析了乳腺癌细胞增殖的变化以及对ｃｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４基因表达的影响。     

PKC对HeLa细胞G1/S期进程调控及其机理的研究

研究了ＰＫＣ活性变化对ＨｅＬａ细胞Ｇ１／Ｓ期进程的影响及其作用机理，结果表明：（１）ＨｅＬａ细胞Ｇ１期ＰＫＣ活性的变化影响其Ｇ１／Ｓ期进程，其中Ｇ１期ＰＫＣ活性升高促进Ｇ１／Ｓ期进程，而ＰＫＣ活性降低显著抑制Ｇ１／Ｓ期进程；（２）ＰＫＣ的刺激剂ＴＰＡ促进早期应答基因ｃ－ｍｙｃ与ｃ－ｊｕｎ的表达，ＰＫＣ的抑制剂ＧＦ－１０９２０３Ｘ抑制其表达；（３）ＨｅＬａ细胞Ｇ１／Ｓ期进程中，ＴＰＡ作用促进Ｇ１期Ｃ     

蛋白激酶C对转录延伸正调节因子b(P-TEFb)的影响

本文探讨了PKC的4种亚型α、βⅡ、γ和λ对PTEFb各蛋白组分的表达影响.成功构建了带有HA标签的pcDNA3.1 PKC的各亚型真核表达载体,并转染HEK293细胞株,用Western bolt检测其表达情况,发现这四种PKC亚型在细胞中表达良好。将PKCβⅡ或者PKC λ转染进入HEK293细胞株 ,发现其可使CDK9和Cyclin T蛋白表达量升高;但在细胞中高表达PKCα和PKCγ,对P-TEFb各组分表达量没有影响.表明PKC可通过提高P-TEFb的组分表达量,从而上调某些基因的表达.     

膜去极化激活的PKC抑制依赖生肌素的AChRγ基因启动子活性

烟碱样乙酰胆碱受体（Acetylcholine receptor,AChR）是由4种亚基组成的五聚体,其表达受神经电活动控制。胚胎期神经植入前,AChR弥散分布于肌细胞表面;突触发生后,突触外AChR表达受抑制,而集中于突触后膜表达。出生后去神经或用特异的Na~ 通道阻断剂阻断电活动可引起骨骼肌组织突触外AChR mRNA明显升高。电刺激去神经的肌肉又可使突触外AChR基因表达关闭。因此,有关膜去极化与AChR基因转录激活的偶联机制研究已成为当前愈发感兴趣的课题。Klarsfeld等利用特异的阻断剂证明,电活动抑制AChR的生物合成涉及Ca~（2 ）和PKC的作用。huang等发现,Ca~（2 ）通过去极化的膜由L型钙离子通道进入胞浆,可引起AChR基因快速失活;膜去极化可引起核内PKC活性升高,进而导致AChR基因表达所必需的1个因子磷酸化而失活。Neville等根据神经和电刺激后基因表达动力     

NF-κB和PKC在腺性膀胱炎中的表达及意义

采用免疫组化SP法检测24例腺性膀胱炎中NF-κB和PKC的表达，探讨NF-κB和PKC在腺性膀胱炎中的作用。结果显示，NF-κBP65和PKC在24例腺性膀胱炎中的阳性表达率分别为70．8％、79．2％，NF-κB与PKC在腺性膀胱炎中的表达呈正相关。NF-κB阳性表达率随腺性膀胱炎复发次数的增多而增高。提示NF-κB可能在腺性膀胱炎中起促进作用，并可作为评价腺性膀胱炎预后的参考指标。     

细胞因子诱导的肿瘤杀伤细胞(CIK)培养条件优化的研究

肿瘤生物治疗目前是继手术、药物、放化疗治疗之后的第四种肿瘤治疗主要手段,目前,临床上应用最广泛的是细胞因子诱导的肿瘤杀伤细胞(CIK).由于CIK培养方式多样,因子选择及配比不同,医疗机构各有不同,造成CIK细胞数量、有效细胞数量、杀伤率有较大的差异.本研究通过对无血清培养基中添加的单克隆抗体CD3,注射用重组人白介素-2(IL-2),采血者自体血浆进行正交实验,得知在无血清培养基中加入CD3 100ng/mL,I-2 700IU/mL,自体血浆2％时,培养效果最好,双阳性有效细胞比率可达97.88％,以效靶比10:1接种,MTT法检测,效应细胞CIK对Hela细胞杀伤率为32.80％.初步观察此种培养条件下的CIK细胞在临床治疗上有一定的疗效.     

An improved digital watermarking scheme combining with PKC 

Digital watermarking is the enabling technology to prove ownership on such copyrighted product as software, documents, music, and video, monitor the usage of them, and even trace them back to the user with embedding of unique buyer identification(ID) as a part of watermark into them. This thread of detection will deter users from releasing unauthorized copies. A problem arises when the seller is dishonesty, he has a chance to use the digital watermarking with the buyer ID maliciously and make the buyer receive falseaccusation. In this paper, an improved digital watermarking scheme is introduced to prevent falseaccusation to an honest buyer, which is combined with the advantage of PKC(public key certificate) so that it fits the online transaction and helps to realize secure ecommerce. In addition, the extended application of this scheme is discussed. 