秋水仙素诱导青虾次级卵母细胞二倍体初探

以青虾卵巢为材料，采用秋水仙素诱导多倍体次级卵母细胞．经滴片试验，确立此实验最佳滴片高度为1．5cm，通过设置5个秋水仙素浓度(0．08～0．40mg／mL)及3个作用时间(6～24h)，观察发生染色体加倍的细胞相对数目．实验结果表明：在使用秋水仙素的浓度为0．08～0．40mg／mL，处理6～24h时都可以获得多倍体卵细胞．在秋水仙素浓度是0．32mg／mL，处理6h可得到最高二倍体突变率(32．58％)．还测试了0．32mg／mL COM作用6h时ATPase活性与生理盐水对照组的变化，结果显示COM会在一定程度上影响细胞的新陈代谢．但是50％左右的成活率表明，这种诱导突变的方法仍具有一定的应用价值．     

罗氏沼虾精子发生的超微结构

应用透射电镜技术，研究了罗氏沼虾精子发生的全过程．观察表明：精原细胞较大，近卵圆形，核大而圆，染色质分散．初级精母细胞比精原细胞略小，染色质凝聚成块状，散布于核质中．次级精母细胞呈多边形，染色质致密，核膜双层，细胞质和核质问通过核孔进行物质交换．精细胞近圆形或多边形，染色质较密集地均匀分布，胞质较丰富，有线粒体、游离核糖体和内质网分布．精子分化早期，染色质向胞核的一侧移动，随着分化的进行，精细胞核逐渐拉长，变得弯曲．分化晚期，细胞质中出现许多膜片层结构，分泌一些碎细丝状物质，沿核的边缘向核凸起的一端推进，不断聚集、突起，最终形成具横纹精子的棘突．成熟的精子呈漏斗状，包括一个杯形的核和由其发出的一个横纹状棘突．     

罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)卵子发生的细胞化学研究

本研究应用细胞化学方法研究了罗氏沼虾卵子发生过程中主要生物大分子的变化。从卵原细胞到卵母细胞的发育过程中，核酸逐渐分散，蛋白质大量沉积。尽管卵原细胞和卵黄发生前的卵母细胞中，PAS和苏丹黑反应为阴性，但随着卵母细胞被滤泡细胞包围，这两种反应阳性物质在卵母细胞质中大量出现，似乎表明滤泡细胞可以向卵母细胞提供糖类和脂类或能构成糖类、脂类的物质。成熟卵子内含有大量蛋白质、糖类和脂类，为此后的胚胎发育作好了准备。     

日本沼虾精荚结构的研究

应用光镜和透射电镜对日本沼虾精荚的结构研究表明：单个精荚由精子团，粘液团和非细胞的包膜三部分组成。包膜具单层结构，主要由细小的相交纤丝所组成的基质构成。在超微结构上，包膜可再分成内，外侧二个区域。包膜几乎完全包被精子团和粘液团。精子团由精子和非细胞基质构成，基质包括沟网，球状体和丝线网三部分，它们分别和精子间在不同的部位连结。     

光周期条件对罗氏沼虾幼体存活率及体长生长率的影响

用４Ｌ：２０Ｄ、８Ｌ；１６Ｄ；１２Ｌ；１２Ｄ和２４Ｌ：０Ｄ四种光周期条件培养罗氏沼虾骚状幼体，观察其存活率和生长、发育情况。研究结果表明，随着光照时间的延长，特别是在连续照明的条件下，与最短的光照条件相比，幼体的存活率及体长生长率分别提高１５７．７％和２．２％ｄ，而育成Ｐ１的时间却相应缩短了１０ｄ。     

日本沼虾基因片段PCR扩增的条件优化

以日本沼虾肌肉组织为材料，提取其基因组DNA，研究了该虾16S rRNA基因片段扩增的PCR反应条件.经对扩增反应体系中各因子和扩增程序的梯度实验，确定优化反应条件为: 在25μL反应体系中，10×Buffer 2.5 μL，DNA模板200～300 ng，4×dNTP 0.2 mmol/L，Mg²⁺1.5 mmol/L，引物0.4μmol/L，Taq DNA聚合酶1 U，95 ℃预变性5 min；接着35个循环包括95 ℃变性1 min，56 ℃复性50 s，72 ℃延伸1 min；最后72 ℃延伸10 min.应用此优化体系扩增日本沼虾18S rRNA，细胞色素氧化酶亚基I (cytochrome oxidase subunit I, COI),NADH脱氢酶亚基V (NADH dehydrogenase subunit 5, ND5)等基因片段均获得了稳定而理想的效果.研究结果为深入探讨日本沼虾种群的遗传和变异,以及开展其种质鉴定和分子标记等研究提供了参考.     

青虾的人工育苗试验

选择产自天然水域的抱卵虾作为亲虾进行室外小水泥池人工育苗试验,两口水泥池共32平方米共获0.8～1.2厘米的虾苗30万尾,平均每平方米水面产虾苗9300尾。     

4个群体西太公鱼mtDNAD—loop区段的限制性片段长度多态性分析

应用PCR技术对天津市于桥水库、北京市密云水库、日本北海道和日本青森县4个群体共151尾西太公鱼（Hypomesusnipponensis）的mtDNAD-loop区段进行扩增,得到长度约为1．8kbp的扩增片段．扩增出的DNA片段使用13种核酸内切限制酶进行酶切,其中8种核酸内切限制酶（AluI、DraI、HaeⅢ、Hindm、HinfI、MboI、TaqI和XspI）有酶切位点,5种核酸内切限制酶（AluI、HinfI、MboI、TaqI和XspI）个体间存在变异．不同酶切结果组合后,共得到28种单倍型,于桥水库、密云水库、北海道和青森西太公鱼均以单倍型6为主,分别为36．36％、38．30％、43．33％和26．67％;于桥水库、密云水库、北海道及青森西太公鱼单倍型多样性指数（危）分别为0．8171、0．8141、0．7793和0．8828;核苷酸多样性指数Or）分别为0．007918、0．007326、0．007255和0．009710．于桥水库西太公鱼与密云水库西太公鱼之间的Rogers遗传距离最小,为0．1499;于桥水库西太公鱼与日本青森西太公鱼之间的Rogers遗传距离最大,为0．2215;日本北海道西太公鱼与密云水库西太公鱼之间的遗传距离为0．1511,大于于桥水库西太公鱼与密云西太公鱼之间的遗传距离,但小于日本境内北海道西太公鱼与青森西太公鱼之间的遗传距离．     

饥饿时间对日本沼虾能源物质利用和能量收支的影响

研究饥饿时间对不同体重的日本沼虾(Macrobrachium nipponense)能源物质利用和能量收支的影响.结果表明:饥饿初期日本沼虾主要依赖脂肪和碳水化合物供能,随着饥饿时间增加,开始部分消耗体内的蛋白质,最后完全依赖蛋白质作为能量来源,虾体营养组成和含量影响供能物质的利用.能量收支方程表明,在饥饿状态下日本沼虾代谢活动减弱,代谢能(R)逐渐降低,而排泄能(U)逐渐增加,体重对日本沼虾能量收支不产生影响.     

紫背金盘提取物对菜青虫的效应研究

采用无水乙醇、正丁醇、乙酸乙酯和氯仿四种溶剂提取紫背金盘杀虫活性物质,并以菜青虫3龄幼虫为试虫,探讨紫背金盘杀虫活性物质对菜青虫的毒性。结果表明:紫背金盘各提取物对菜青虫具有一定杀虫效果,其中氯仿提取物和乙酸乙酯提取物对菜青虫的拒食率和校正死亡率显著高于其他组,100 g/L氯仿提取物拒食率、24 h和48 h校正死亡率分别92%、21.23%和32.69%,100 g/L氯仿提取物拒食率、24 h和48 h校正死亡率分别90%、20.67%和31.24%。结论:紫背金盘的各种提取物对菜青虫具有一定的拒食和触杀作用,其中以氯仿提取物效果和乙酸乙酯提取物最为显著。