细胞选择性穿膜肽的穿膜效果研究

细胞穿膜肽是一类能够穿透细胞膜并且不损坏细胞膜结构的小分子多肽,该多肽一般由不多于30个氨基酸组成.针对FITC标记的具有肺癌或肝癌细胞选择性的两种穿膜肽,设置不同浓度梯度,分别处理多种肿瘤细胞,荧光显微镜下观察不同作用浓度下细胞中绿色荧光的强弱,并通过流式细胞仪检测含有荧光的细胞数.结果表明:两种细胞穿膜肽具有不同的细胞选择性. CPP33在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于50%,CPP44在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于60%.并且随着作用浓度的增加,两种细胞中含有荧光的细胞数不断上升.因此这种针对肿瘤细胞的选择性穿膜肽可能为小分子药物在体内的精确递送提供一种新的方法.     

FOXM1688-748结构域相互作用蛋白的鉴定

为了鉴定转录因子FOXM1转录激活结构域(C-端第688位到748位氨基酸序列)的互作蛋白,以FOXM1的cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法扩增获得其转录激活结构域序列,克隆进入原核表达载体pGEX-4T2;利用大肠杆菌原核表达获得融合谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)标签的重组蛋白GST-FOXM1688-748;通过GST-pulldown结合质谱方法鉴定FOXM1688-748的互作蛋白,成功构建了原核表达质粒pGEX-4T2-FOXM1688-748,获得了原核表达的重组蛋白GST-FOXM1688-748.将质谱鉴定获得的互作蛋白进行分析和归类,预示一些互作蛋白可以参与激活FOXM1的转录活性,如RPN2、MISP、MCM7蛋白,一些互作蛋白可以参与调控FOXM1蛋白的稳定性,如USP9Y、CUL4A、HSPB1、BAG2蛋白.FOXM1蛋白的转录激活结构域与许多不同功能的蛋白发生相互作用,暗示该结构域具有重要的分子生物学作用,期望为以FOXM1为靶点的临床药物研发提供实验依据.     

精选例题 提高数学复习效率的尝试

选题是上好初中数学复习课的重要一环，而例题教学设计是复习课的主体部分。例题的选择是否恰当，教法是否科学，往往是复习课成败的关键。在平面几何总复习时，我们一定要深入研究课本的例题、习题，认真分析近几年各地的中考试题，掌握中考命题的最新动态。根据新课标要求，针对学生实际，紧紧围绕中考说明，精选好每一个例题，充分发挥例题的作用，提高数学复习效率。那么如何精选例题呢？下面，笔者谈谈自己通过尝试的几点体会。     

精选例题 提高数学复习效率的尝试

选题是上好初中数学复习课的重要一环,而例题教学设计是复习课的主体部分.例题的选择是否恰当,教法是否科学,往往是复习课成败的关键.在平面几何总复习时,我们一定要深入研究课本的例题、习题,认真分析近几年各地的中考试题,掌握中考命题的最新动态.根据新课标要求,针对学生实际,紧紧围绕中考说明,精选好每一个例题,充分发挥例题的作用,提高数学复习效率.那么如何精选例题呢?下面,笔者谈谈自己通过尝试的几点体会.     

政府信息系统有效性控制评价案例研究

本文在研究政府信息系统建设项目整体成功度和绩效目标实现度的评价指标体系和评价方法的基础上,结合具体评价案例,阐述了"基于统一数据交换标准的信息采集比对体系+IT评价比对指标数据库+专业评价测试方法"的技术与绩效评价模式的实现过程.