Y-152和K-156在果蝇ADH催化中的作用

果蝇醇脱氢酶酪氨酸－１５２（Ｙ－１５２）和赖氨酸－１５６（Ｋ－１５６）处于同类脱氢酶的保守位点。经人工定点突变和酶动力学分析,前者的苯丙氨酸（Ｙ１５２Ｆ）、组氨酸（Ｙ１５２Ｈ）和谷氨酸突变体（Ｙ１５２Ｅ）及后者的异亮氨酸突变体（Ｋ１５６Ｉ）均丧失催化活性。而半胱氨酸－１５２（Ｙ１５２Ｃ）及精氨酸－１５６（Ｋ１５６Ｒ）突变体活性分别是对应野生型的０．２５％和２．２％。此外,Ｙ１５２Ｃ和Ｋ１５６Ｒ的Ｋ     

高效液相色谱法快速测定发酵液中的藤黄绿菌素

应用反相高效液相色谱,以φ=0.7甲醇为流动相,流速1.0mL/min,紫外检测波长308nm,建立了快速测定荧光假单胞菌M18发酵液中藤黄绿菌素(Pyoluteorin)的方法.实验结果表明,藤黄绿菌素在4.9min出峰,线性范围0.02~1g/L,线性范围良好(r=0.9997),最低检测浓度0.01g/L,回收率平均为97.7%.     

具有ACC脱氨酶活性及抗枯萎病菌的假单胞菌株B*8

运用新的快速筛选程序,获得了具有１－氨基环丙烷－１－羧酸（１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１ｃａｒ－ｂｏｘｙｌａｔｅ,ＡＣＣ）脱氨酶活性和拮抗瓜类枯萎病菌双重功能的根际假单胞菌株Ｂ８．利用ＡＣＣ为唯一氮源,从不同的土样中,快速筛选出８０个具有ＡＣＣ脱氨酶活性的菌落．在马铃薯葡萄糖培养基和西瓜培养基上,经异步培养法进一步筛选并纯化出３株对西瓜枯萎病菌具有较强拮抗作用的拮抗菌Ａ９、Ｂ８和Ｃ１７．对拮抗作用最强的Ｂ８进行分析表明,它属于假单孢菌属,能分泌较多的铁载体,对瓜类枯萎病以及其他植物病原菌具有广谱抗性．结果显示,此程序可替代通常采用的低效而耗时的筛选和生物测定过程,加快新的促进植物生长根际细菌的筛选和应用．     

Asp38与果蝇醇脱氢酶的辅酶特异性

果蝇醇脱氢酶依赖于ＮＡＤ＾＋,Ａｓｐ３８是一个保守残基,它与ＮＡＤ＾＋的ＡＭＰ单位中核糖羟基作用。野生型果蝇ＡＤＨ的Ａｓｐ３８突变成Ａｓｎ３８（Ｄ３８Ｎ）后,Ｋｍ（ａｐｐ）ＮＡＤＰ值下降至１／６２,Ｋｃａｔ／Ｋｍ（ａｐｐ）ＮＡＤＰ值则增加至５９０倍（ＰＨ９．８）。     

筛选假单胞菌株M18防治大棚黄瓜枯萎病害

设计了一种新的高效筛选程序,从植物根际土壤中分离出一株具有ＡＣＣ脱氨酶活性的促生拮抗双功能假单胞菌株Ｍ１８．在培养皿中,Ｍ１８能有效地抑制黄瓜枯萎病菌以及多种其他枯萎病原菌和植物病原菌的生长．Ｍ１８活菌浸种处理春黄瓜种子以及在大棚定植后根际土壤浇灌的试验中,与对照组相比,黄瓜枯萎病的株发病率降低７０％～８０％,霜霉病的发病率和病情指数都同时平均下降７０％左右,黄瓜产量提高２０％以上,每公顷可增加产值０．９万元以上,Ｍ１８的生物防治效果达到极显著程度．     

假单胞菌株M18分泌羧基吩嗪抑制黄瓜枯萎病害

设计并应用新的高效筛选程序,从植物根际土壤分离出同时具有促进植物生长和抑制黄瓜枯萎病害的假单胞菌株Ｍ１８。它对黄瓜幼苗的根系具有明显的促进作用,在培养皿中,Ｍ１８能有效地抑制黄瓜枯萎病菌以及多种其它植物病原菌丝体的生长,经Ｍ１８活菌浸种处理秦黄瓜种子并在大棚内浇灌定植后的粮际土壤,与对照相比,黄瓜枯萎病的株发病率降低７０％－８０％,霜霉病的发病率和病情指数都同时平均下降,７０％左右,黄瓜产量提高％以上,Ｍ１８的生物防治效果达到极显著程度,对培养液中纯化的抗真菌物质进行光谱分析和ＬＣ－ＭＣ测定的结果表明,Ｍ１８是一株产羧基吩嗪的假单胞菌。     

荧光假单胞菌株M18防治甜瓜蔓枯病害

荧光假单胞菌株M18在离体条件下,能有效抑制甜瓜蔓枯病菌的菌丝生长。经甜瓜蔓枯病菌的苗期接种试验。M18的菌悬液（10^8CFU/mL)对甜瓜蔓枯病的防治效果达到80％左右。在苗期接种抗性诱导试验中,发现荧光假单胞菌株M18还具有诱导甜瓜幼苗产生系统性抗甜瓜蔓枯病菌感染的能力。从M18培养液中,提取并纯化了抗生物质吩嗪－1－羧酸（PCA）,该物质对甜瓜蔓枯病菌具有强力抑菌作用,EC50值仅为3.24μg/mL。在大田试验中,M18可以保持80％的防治效果,显著提高甜瓜产量,并且还发现在蔓枯病发病初期,M18具有良好的治病作用。     

一株拮抗稻瘟病菌的产荧光假单胞杆菌

从稻草茬中分离到的拮抗细菌中,筛选出高效菌株ＪＫＤ－２．无论在稻瘟菌孢子培养基或扩大培养基中,它都具有溶解菌丝体和抑制孢子形成的能力．在土豆培养基中,对多种植物病原菌具有拮抗作用．经电镜观察,培养物性状和生理生化鉴定,可确定该菌为具有荧光的假单胞杆菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｐ．）的一个成员．该菌体培养液经氯仿、乙酸乙酯、８０％丙酮水和水分别提取,除８０％的丙酮水外,都能从细菌菌体或培养基中获得对稻瘟菌的拮抗物质．在盆栽试验中,水稻秧苗叶面喷洒ＪＫＤ－２,能抑制稻瘟菌的接种感染,与对照组相比,防治效果可达６０％,差异达到显著程度．该菌经稻草培养基诱导,能分泌一种胞外蛋白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,相对分子质量约为１３ｋｄ．     

荧光假单胞菌株M18产吩嗪-1-羧酸的条件

在摇瓶发酵条件下，研究了产吩嗪—1—羧酸(PCA)的荧光假单胞菌M18在各种碳源、氮源、盐类、温度、接种量下PCA的分泌量，确定了适合PCA分泌的最佳培养基(1L)：葡萄糖20g，肉胨22g，KNO310g；最佳培养条件：温度28℃，起始pH7．0，装瓶量200／500(mL)，接种量5％；最佳培养时间72h．在此条件下，PCA在发酵液中的浓度可达到820mg/L．