抗肿瘤因子内皮抑素基因的克隆及表达

为了克隆抗肿瘤因子内皮抑素基因并表达内皮抑素蛋白,从人胎盘组织中分离总ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出５７０ｂｐ的ＤＮＡ片段,并成功地克隆到ｐＵＣ１８质粒载体中,经序列测定证实为内皮抑素基因,用Ｘｐｒｅｓｓ本外表达了内皮抑素蛋白并纯化成功。     

黔产八角枫HPLC指纹图谱研究

目的:建立黔产八角枫药材指纹图谱,结合相似度评价、聚类、主成分分析评价黔产八角枫药材品质,为其质量研究提供技术方法借鉴和基础数据。方法:色谱柱采用HC-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm),以甲醇-缓冲液(缓冲液：0.2 g庚烷磺酸钠,2.0 g磷酸二氢钾,0.3 mL磷酸,定容至1000 mL)为流动相进行梯度洗脱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)进行相似度评价分析,采用SPSS26.0软件进行主成分分析和聚类分析。结果:建立了黔产八角枫药材指纹图谱,综合10个批次样品的色谱图谱,标定了8个共有峰,指认了八角枫碱色谱峰。10批次药材的相似度在0.801～0.994之间,主成分分析结果表明,贵州遵义和毕节质量较优;聚类分析结果表明,类间距为15时,10份样品被分为3类,即产自凯里的2批八角枫药材聚为一类,产自毕节和遵义的2批聚为一类,其余6批聚为一类。结论:该方法准确,稳定,可靠,可为八角枫质量评价提供参考。     

八角枫药材质量控制含量测定方法研究

目的:建立八角枫总生物碱含量测定方法,测定黔产八角枫中的水分、浸出物含量,并规定其限度范围,为八角枫质量控制提供实验依据。方法:以八角枫碱为标准品,采用酸性染料比色法测定八角枫中总生物碱的含量,依照《中国药典》2020年版水分和浸出物测定方法,测定八角枫中水分和浸出物含量。结果:八角枫碱在0.180～0.450 mg/mL浓度范围内,回归方程Y=1.6024X-0.0389,R²=0.9996,吸光度与浓度具有良好线性关系,平均加样回收率为100.19%,RSD<3%。不同产地10批次八角枫药材总生物碱含量在0.015%～0.029%之间,水分含量在4.36%～9.00%之间,水溶性浸出物含量在10.23%～24.59%之间,醇溶性浸出物含量在9.69%～23.81%之间,建议水分含量不得超过8.50%,水溶性浸出物含量和醇溶性浸出物分别不得低于10.06%和9.54%。结论:采用酸性燃料比色法测定八角枫中的总生物碱方法操作简单、重复性好、准确度高,同时,水分和浸出物含量的测定结果可以用于八角枫药材的质量控制。