二十碳五烯酸和亚油酸对黄姑鱼肝脏细胞炎症相关基因表达的影响

饲料中过高比例植物油替代鱼油会引起肝脏炎症反应,养殖实验普遍存在周期长、价格昂贵以及干扰因素多等问题,离体实验部分弥补了养殖实验的缺点。植物油替代饲料中鱼油的本质是脂肪酸的替代。以往的研究发现豆油替代饲料中鱼油会引起炎症反应。为探究豆油对黄姑鱼肝脏细胞炎症影响,本实验分离并培养了黄姑鱼原代肝脏细胞。分别使用BSA(对照)、0.1 m M二十碳五烯酸-牛血清白蛋白复合物(EPA-BSA)、0.1 mM亚油酸-牛血清白蛋白复合物(LNA-BSA)孵育黄姑鱼原代肝脏细胞6 h,用1.0 mg·mL-1 LPS刺激细胞。结果表明:EPA与LNA相比,显著降低了促炎基因TLR2、TLR22、MyD88、TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量(P0.05)。本研究建立的黄姑鱼原代肝脏细胞模型可用于营养免疫研究,在黄姑鱼原代肝脏细胞中相同浓度的EPA相对LNA有更强抑炎效果,饲料中豆油替代鱼油引起的肝脏炎症反应可能是由于EPA含量减少,LNA含量升高引起的。     

发酵豆粕替代鱼粉对黄姑鱼幼鱼肌肉氨基酸,IGF-I基因相对表达量及肝脏组织结构的影响

通过探究发酵豆粕替代鱼粉对黄姑鱼幼鱼肌肉中氨基酸组成、肌肉和肝脏中IGF-I基因相对表达量及肝脏组织形态结构的影响,以确定黄姑鱼幼鱼饲料中发酵豆粕替代鱼粉的适宜比例。试验以发酵豆粕、豆粕、鱼粉和小麦蛋白粉为蛋白质源,鱼油、豆油和大豆卵磷脂为主要脂肪源,配制含45%鱼粉的基础饲料。以发酵豆粕替代基础饲料中0%(FSM0组)、10%(FSM10组)、20%(FSM20组)、30%(FSM30组)、40%(FSM40组)、50%(FSM50组)的鱼粉,共配制6组等氮(蛋白质水平为50%)等脂(脂肪水平为12%)的饲料。各实验组(除对照组)均添加适量的蛋氨酸和赖氨酸,使得各组蛋氨酸和赖氨酸水平一致。试验选取360尾平均体重为(31.24±0.02)g的黄姑鱼幼鱼,每组设置3个重复,每个重复为20尾黄姑鱼,饲养于500 L水桶中。在水温(28±2)℃,盐度27~30的条件下养殖8周。实验结果表明:缬氨酸和蛋氨酸均无显著性差异(P0.05),其余氨基酸均随着发酵豆粕替代水平的提高而呈现增高的趋势;黄姑鱼肌肉中IGF-I表达量呈先上升后下降的趋势,在FSM30组时显著最高;黄姑鱼肝脏中FSM50组IGF-I表达量显著低于对照组;通过肝脏组织学观察发现,随着发酵豆粕替代水平的增加,肝脏细胞受损严重,FSM50组肝细胞轮廓模糊,部分肝细胞核甚至已经消失不见。结果分析表示,本实验条件下,发酵豆粕替代鱼粉可以有效提高黄姑鱼鱼体中氨基酸的积累(除缬氨酸和蛋氨酸),替代量在20%-30%为宜否则会降低肝脏和肌肉中IGF-I的表达量并造成肝脏损伤。