正常成年CBA小鼠短声诱发听性脑干反应测试波形分析

目的:利用不同频率短声刺激正常CBA小鼠,诱发听性脑干反应(Auditory brainstem responses,ABR),分析各波形出现频率、潜伏期、阈值和幅值,找出最适合用于检测CBA小鼠阈值的ABR波,为CBA小鼠听觉研究提供参考依据。方法:对50只CBA小鼠进行短声(click声)诱发ABR测试,分别观察高(90 d B SPL)、中(60 d B SPL)、低(30d B SPL)3个刺激强度下波Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的出现率,阈值的判断使用出现率最高的波,并测量其的潜伏期和幅值。结果:(1)在高中低三个刺激强度下波Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的引出率分别是100%、100%、100%、100%、65%,100%、100%、100%、100%、59%,95%、97%、65%、55%、45%;发现波Ⅱ的引出率最高并且最稳定,相比较其他波而言最适合用来判断反应阈值,其平均阈值为30 d B SPL;(2)观察发现从90 d B SPL逐渐降低到30 d B SPL时,波Ⅱ的潜伏期在2.08~2.35 ms之间,幅值在2.15~1.62μV之间。结论:CBA小鼠短声诱发ABR波Ⅱ引出率最高且最稳定,引出波Ⅱ的刺激声强度应作为其反应阈值的参考标准。     

快速建立CBA小鼠急性耳毒性模型的研究

目的 利用硫酸卡那霉素(Kanamycin sulfate,KM)与呋塞米(furosemide,Fur)快速建立CBA小鼠急性耳毒性动物模型,观察给药时间对致聋的影响。方法 1、利用KM+Fur联合用药快速建立急性耳毒性动物模型:60只5~8周龄的健康CBA小鼠(雌雄各半)随机平均分成6组:正常组(空白对照)、KM+Fur联合用药后1 d组、用药后3 d组、用药后7 d组、用药后14 d组、用药后28 d组;2、在KM+Fur用药前和用药后1、3、7、14、28 d不同时间段检测运用听性脑干反应测试(auditory brainstem response,ABR)进行听力阈值及ABR波Ⅱ振幅分析;3、各组小鼠通过耳蜗基底膜HE染色铺片显微镜下观察小鼠耳蜗基底膜病理切片中毛细胞缺失和排列情况。结果 1、CBA小鼠联合运用KM+Fur后各时间点的ABR阈值与给药前相比,听力阈值明显升高,差异具有统计学意义(0.01);2、CBA小鼠联合运用KM+Fur后各时间点的ABR波Ⅱ振幅值与给药前相比较,幅度降低明显,差异具有统计学意义(0.01)3、CBA小鼠联合运用KM+Fur 1 d后,外毛细胞出现轻微的紊乱,随着损伤时间的延长,耳蜗外毛细胞的排列越来越紊乱;4、CBA小鼠联合运用KM+Fur后在不同时间段的ABR听力阈值及ABR波Ⅱ振幅值比较,差异均无统计学意义(0.05)。结论 硫酸卡那霉素和呋塞米联合一次给药,可以快速建立理想的CBA小鼠急性耳毒性模型。     

发根农杆菌Ri质粒介导的植物基因工程及应用

发根农杆菌Ri质粒作为一种天然存在的植物遗传转化系统,已在植株再生,品种改良,增强植物抗逆性以及生产次生代谢产物等方面得到广泛应用,并取得了巨大的经济和社会效益.全文概述了发根农杆菌Ri质粒介导的植物基因工程原理、方法、影响因素、应用前景及存在的问题.     

温泉环境宏基因组文库中醛脱氢酶基因的克隆及分析

甲基丙二酸半醛脱氢酶(MMSDH)是唯一需要CoA的一类醛脱氢酶.采用免培养-PCR技术结合基因组步移从宏基因组中成功分离一条MMSDH,获得的MMSDH在序列上具有醛脱氢酶的10个保守模块,以芽胞杆菌的MMSDH为模板预测其三维结构.研究证实采用免培养-PCR技术及基因组步移在微生物基因研究中具有重要的价值,且为新酶的筛选技术提供一条简单有效的途径.