产胶原酶地衣芽孢杆菌菌种的分离、筛选及发酵条件研究

从成都皮革厂等处采集的样品中,分离筛选到一株胶原酶的产生菌Ｊ－４－８,菌种鉴定为地芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）。该菌产酶的最适碳源为蔗糖,氮源为明胶,超始ｐＨ为７．５,容瓶装量为１０ｍＬ,种龄是２４ｈ,接种量为６％,在此条件下,摇瓶振荡发酵后,酶活达２５Ｕ／ｍＬ发酵液,较原发酵培养基发酵后的酶活提高３５％。     

地衣芽孢杆菌JF—20菌原生质体的形成及其再生的最佳条件

以地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis)JF-20菌为出发菌株,对原生质体制备及再生的各种影响因素进行了研究,在原生质体形成及再生的最佳条件下制备原生质体。结果发现：JF-20菌的原生质体形成率及再生率分别达到以86.9%和38.4%,并通过光学显微镜技术,观察了原生质体形成及再生的有关现象。     

秋水仙碱对木霉F10纤维素酶系的诱变处理研究

纤维素酶是一种多组分起协同作用的复合酶系 .它通常包括内切型葡聚糖酶 (ＥＣ3 .2 .1 .4,也称Ｃｘ酶 )、外切型葡聚糖酶 (ＥＣ3 .2 .1 .91 ,也称Ｃ1酶、微晶纤维素酶 )和纤维二糖酶 (ＥＣ3 .2 .1 .2 1 ,也称β 葡萄糖苷酶 )等 3种主要组分[1～ 3 ] .不同来源的纤维素酶其酶系在组成上具有较大差别 ,其协同组合酶之种类、比例亦往往不同 ,即酶系中的各组分对菌株具有严格的专一性 .但是 ,当突变发生时 ,它们的构成比例将会有所变化[4] .一旦纤维素酶的各组分发生变化 ,则纤维素酶系的协同作用也可能发生变化 .因此 ,我们应设法获得某些纤维…     

变电所的防雷措施及方法

变电所是电力系统中改变电压的场所与地方,也是在电力系统中需要重点进行防雷保护的设施。如果没有采取防雷措施,或者防雷措施不够安全可靠,当变电站发生雷击事故,不可避免地会造成大面积的停电事故,不仅会造成严重的经济损失,同时还会扰乱社会生产,影响人民群众的正常生活。因此变电所的防雷措施必须十分可靠。     

hPNAS-4腺病毒载体的构建及其体外抗肿瘤作用

[摘要] 目的：构建携带人的凋亡相关新基因PNAS-4(hPNAS-4)的重组腺病毒,并观察其感染人肺癌A549细胞所引起的hPNAS-4过表达对体外肿瘤细胞凋亡的影响。方法：用RT-PCR从293A细胞中克隆hPNAS-4编码区cDNA,将其酶切后连接至pENTR11载体上,再通过pENTR11与腺病毒骨架载体pAd/CMV/V5-DEST之间的同源重组作用将hPNAS-4基因片段重组至pAd/CMV/V5-DEST上,最后经293细胞的包装扩增后得到携带hPNAS-4基因的重组腺病毒;将重组腺病毒体外感染人肺癌A549细胞;用RT-PCR检测感染细胞中hPNAS-4的过表达情况;通过MTT、流式细胞术及DNA Ladder分别检测感染细胞的增殖与凋亡情况。结果：从293A细胞中中克隆到hPNAS-4全长cDNA并成功构建腺病毒表达载体Ad-hPNAS-4,经测定其滴度为：2.4×108 pfu/ml,感染人肺癌A549细胞后：经RT-PCR测得其mRNA表达明显上调,MTT检测结果为细胞增殖受到明显抑制,流式细胞术测得细胞凋亡率明显升高,琼脂糖凝胶电泳显示其基因组DNA有明显的梯状条带（DNA ladder）;结论：hPNAS-4腺病毒载体感染人肺癌A549细胞后,发现hPNAS-4过表达对肿瘤细胞的生长有明显的抑制和诱导凋亡作用,为今后研究其分子机制以及hPNAS-4腺病毒载体应用于肿瘤动物实验和肿瘤基因治疗提供实验资料。