宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中HPV16感染与hTERT,P21wafl和Ki67表达关系的分析

为了探讨宫颈鳞状细胞癌(SCC)及宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织中人乳头瘤病毒(HPV)16感染及端粒酶反转录蛋白(hTERT)、抑癌基因P21wafl和增生抗原Ki67表达的关系及其意义,在130例正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤样病变和宫颈鳞状细胞癌组织中,利用组织芯片技术,结合原位杂交技术,检测HPV16感染及结合免疫组织化学技术检测hTERT,Ki67,P21wafl的表达.结果表明:1)CINⅡ级、CINⅢ级、原位癌、浸润性鳞癌组织HPV16杂交信号阳性率显著高于正常宫颈组织(P均＜0.05),浸润性鳞癌HPV16阳性率也显著高于CIN(χ2=5.670,P=0.017).2)hTERT在CINⅡ级、CINⅢ级、原位癌、浸润性鳞癌组织中的表达都显著高于正常宫颈组织(P均＜0.05),浸涧性鳞癌hTERT表达率也显著高于原位癌及CIN(χ2=18.870,P=0.000;χ2=66.390,P=0.000).CIN三级之间相比差异也具显著统计学意义(χ2=30.468,P=0.000).3)P21wafl在浸润性鳞癌组织中的阳性率显著低于正常宫颈组织(P＜0.05),但与CIN相比差异无显著统计学意义(P＞0.05).CIN三级之间P21wafl表达差异也无显著统计学意义(P＞0.05).4)随着宫颈病变组织学严重程度的增加,Ki67表达逐渐增加(P＜0.05).5)HPV16感染率与hTERT表达之间呈正相关(P＜0.05,r=0.339),与P21wafl表达之间呈负相关(P＜0.05,r=-0.337),与Ki67表达无相关性(P＞0.05):hTERT与P21wafl之间呈负相关(P＜0.05,r=-0.248),与Ki67表达呈正相关(P＜0.05,r=0.398);P21wafl与Ki67表达呈负相关(P＜0.05,r=-0.446).可见:在宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中,hTERT,P21wafl,Ki67表达改变可能与HPV16感染有关,且几者之间互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈鳞癌的发生.这些指标综合分析可能为阐明HPV16的恶性转化机制以及为提高宫颈鳞癌及其癌前病变诊断率提供参考依据.组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台.     

MCM4在宫颈癌中的表达及其意义

目的探讨微染色体维持蛋白4（MCM4）在子宫颈癌中的表达及与临床病理因素之间的关系．方法采用免疫组织化学法检测50例宫颈癌组织,20例宫颈内皮瘤病变组织CINⅠ、20例CINⅡ-Ⅲ、20例正常宫颈组织的表达．结果正常宫颈,宫颈内皮瘤病变组织CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ及宫颈癌中MCM4阳性表达率差异有显著性（χ^2=45．588,P〈0．05）．正常宫颈、宫颈内皮瘤病变组织CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ及宫颈鳞癌组织四组间MCM4的阳性表达程度差异有显著性（Hc=36．655,P〈0．05）,在不同分化程度的宫颈癌中,MCM4的表达强度的差异有显著性（χ^2=10．359,P〈0．05）;在不同临床分期的宫颈癌中,在淋巴结有转移与无转移组之间,MCM4的表达强度差异有显著性（χ^2=5．748,P〈0．01）;MCM4的阳性表达率与年龄分组和临床分期进展无关（χ^2=1．666,P〉0．05;χ^2=0．076,P〉0．05）．结论①MCM4的表达与宫颈癌的发生发展有关;②检测MCM4可作为判定宫颈癌恶性程度、评估其侵袭性及转移性的分子生物学指标,其对早期宫颈癌的诊断及宫颈癌的预后判定可能具有重要的参考价值．     

乙酰肝素酶与人类复发性自然流产的关系研究

目的研究乙酰肝素酶（heparanase，HPSE）与人类早期复发性自然流产的关系，进一步探讨HPSE在自然流产过程中所起的作用。方法采用免疫组织化学法检测选取的非意愿性正常妊娠者和早期复发性自然流产者绒毛组织中HPSE的表达情况。结果正常妊娠组的HPSE表达率明显高于复发性自然流产组，差异有统计学意义。结论在正常妊娠过程中HPSE表达增高，促进正常胚泡的植入，而复发性自然流产中HPSE表达降低会影响胚泡的植入，导致自然流产的发生。     

通过母血中胎儿表观遗传学标记物预测子痫前期的探讨

目的通过实时荧光定量PCR法测定孕妇血浆中胎儿表观遗传学标记物非甲基化丝氨酸蛋白酶抑制剂B5（un—methylated serpin peptidase inhibitor,clade B,member 5,U—maspin）基因的含量,初步探讨母血浆中U—maspin基因的定量能否预测子痫的发生．方法随机选择子痫前期孕妇40例为实验组,其中轻度和重度患者各20例,以健康同期妊娠妇女20例为对照组．提取血浆游离DNA,用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测各组血浆标本中U-maspin基因的含量．结果子痫前期组孕妇血浆中U—maspin的水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,轻、重度子痫前期患者平均浓度有差异,分别为1402．05copies／mL及2189．60copies／mL（P〈0．05）．结论U—maspin基因作为孕妇血浆中游离的胎儿特异性表观遗传学标记物,可以预测子痫的发生．     

TGF-β1和Caspase-3的表达及妊娠结局在流产模型孕鼠中的研究

目的研究阻断CD86协同刺激分子对自然流产模型孕鼠母胎界面TGF-β1和Caspase-3的表达及妊娠结局的影响.方法实验组于妊娠第4.5d腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单抗,对照组注射大鼠同型IgG2b.于妊娠第13.5d计算胚胎吸收率,用免疫组化测定TGF-β1和Caspase-3的表达,并进行图像分析检测免疫组化染色灰度值（A）.结果①实验组的胚胎吸收率显著低于对照组（P〈0.05）②实验组中TGF-β1蛋白的灰度值明显低于对照组（P〈0.05）,实验组中Caspase-3蛋白的灰度值明显高于对照组（P〈0.05）.结论妊娠早期阻断CD86可使母胎界面中的TGF-β1和Caspase-3分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用并且使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平.