松针褐斑病菌的产毒培养和毒素粗提方法

松针褐斑病菌在PD和MS培养基中生长良好,能产生毒素。在这两种培养基中加入敏感寄主火炬松的针叶浸汁对毒素的产生和活性没有明显影响。甲醇、甲醇、正丁醇、氯仿甲醇（氯仿：甲醇＝2：3）混合溶剂等均能把毒素物质充分提取出来,苯、氯仿、乙酸乙酯等极性小的溶剂不能充分提取毒素。通过生测和高效液相（HPLC）比较分析表明,采用MS培养液培养病菌,以氯仿甲醇混合溶剂提取毒素,将有利于毒素的产生和毒素的分离。     

松针褐斑病菌毒素的层析分离及紫外吸收特性研究

以生测为导向，采用柱层析和薄层层析相结合，从松针褐斑病菌发酵液中分离出3个致毒活性组分m，p和q。经薄层层析检验可知m，q在A，C两个展开系统中R，值一致，分别为0．57和0．75，且m，q展开后在254nm和365nm紫外光下都呈蓝色荧光，基本认为m和q是同一组分；p在365nm紫外光下为黄白色荧光，在A、C两个展开系统中R，值分别为0．46和0．66。层析分离的结果表明，松针褐斑病菌可能含两个或两个以上的毒素物质。对m和p两组分进行紫外扫描的结果显示，m，p分别在波长210nm和208nm处有最大吸收峰，在365nm和254nm紫外光下无吸收或吸收很弱。高效液相分析显示：m，p都不是纯物质，在210nm检测波长下，m有3个吸收峰，保留时间分别为2．41，3．80和16．68min，p有4个吸收峰，保留时间分别为2．46，3．75，12．00和17．25min。研究结果表明组分m和p可能含有相同或相似的化学物质，要获得纯物质还需进一步分离。     

松针褐斑病菌毒素的专化性研究

用松针褐斑病菌毒素粗提液处理湿地松、火炬松、黑松和马尾松的切根苗,发现湿地松和火炬松对毒素最为敏感,其次为马尾松,黑松最不敏感。毒素生测的结果与松树在田间自然感染的情况有一定的相似性,但不完全一致。不同湿地松抗病无性系对毒素的反应存在着差别,其中３３ 号所受伤害较轻,１０ 号及３６ 号较重。结合毒素薄层层析半定量试验,利用寄主愈伤组织对毒素的反应,发现毒素对寄主愈伤组织的最低作用浓度应在１００ μｇ／ｍ Ｌ 以下。试验了５ 种杂草对毒素的反应,其中空心莲子草和稞草对毒素敏感。进一步研究利用毒素作为除草剂不失为毒素利用的一个新思路。上述研究表明该毒素为非寄主专化性毒素。     

松针褐斑病菌毒素的确定及其基本性质研究

以ＭＳ液体培养基培养２０ｄ左右至菌丝大量生长并紧密交织成团时病菌即可大量产生毒素,病菌是否产孢对产毒量大小无显著影响。毒素原液中仅非蛋白质部分具致病活性,经高温高压灭菌１５ｍｉｎ后活性仍不丧失,且有所加强。该毒素在冷冻条件或灭菌后于室温下可保存两个月以上而不失活。毒素粗提液中活性成分为一类极性较大的物质,易溶于水、甲醇、乙醇,可溶于正丁醇,微溶于乙酸乙酯,不溶于苯,可被活性炭吸附并为甲醇所洗脱。毒素粗提液的ｐＨ值为６０,渗透势为－１２２ｋＰａ,经试验确定毒素粗提液的毒性非溶液的酸度或渗透势所致,从而进一步确定了病菌人工培养滤液中存在具致病活性的毒素物质。     

植物病原真菌毒素研究进展

综述了近年来有关植物病原真菌毒素的研究进展 ,对产毒真菌的种类和毒素的化学类别 ,病原真菌的产毒培养条件、毒素的提取纯化以及结构鉴定方法 ,毒素的 3种检测途径与致病机理 ,以及毒素的分子遗传学和毒素的应用研究作了简要概括