北京小鸭病毒性肝炎的研究(五) 免疫母鸭卵清和血清中的抗病毒成分

我们从免疫母鸭的卵清或血清中各分离出13种不同的成份。病毒中和试验和有效成份生物检定的结果表明,只有免疫母鸭卵清中的“A_(12)”和血清中的“S_(12)”具有抗鸭肝炎病毒(Duck hepatitisvirus)的生物活性。“A_(12)”和“S_(12)”都是一些分子量在10000以下的物质。     

C-反应蛋白的研究:1.驴C反应蛋白的纯化与理化性质

1930年Tillet和Francis在炎症急性期病人血清中观察到有一种能特异性地与肺炎球菌细胞壁C多糖发生沉淀反应的蛋白质,后来被命名为C-反应蛋白(简称CRP)。 最初,CRP被认为是一种抗体,后来的实验证明它不是抗体,而是典型的非特异性的炎症急性期的反应性蛋白质。用放射免疫方法测定,CRP在正常动物血清中仅微量存在(平均为1340ng/ml血清),当动物患有组织损伤或炎症时,血清中CRP含量便成千倍地增加,几乎与组织损伤或炎症的程度成正比。当病理状况恢复正常时,CRP含量也下降。     

C-反应蛋白的研究:2,骆驼和猪C反应蛋白的分离和性质

自30年代发现人血清中C-反应蛋白(CRP)以来,由于它与免疫系统功能有密切关系,因此,对它的生理生化特性和功能的研究正在逐步深入。这些研究在很大程度上取决于有足够数量的高纯度的CRP样品。早期的研究多采用在血清中加入固体硫酸铵,先将CRP沉淀出来,然后再进一步纯化。后来又发展了用人工合成的带磷酸胆碱的各种亲和吸附剂来分离CRP。由于不同种属动物血清的成分十分复杂,除人和兔血清通过亲和层析法,直接可以得到SDS凝胶电泳纯制品以外,其他动物血清用此方法一般都得到两种以上的蛋白质组分的产物,还需要经过离子交换、凝胶过滤等进一步纯化,才能得到适于结构分析的CRP制品。     

不同发育时期胎儿胸腺和肝脏染色体蛋白质非组蛋白HMG的研究

我们从三个不同发育时期入的流产胎儿的肝脏和胸腺染色质中提取出高迁移率组(HGM)蛋白质,比较了它们的电泳行为。发现,1)不同发育时期胎儿肝脏染色质HMG的SDS电泳行为没有明显地区别;2)不同发育时期胎儿胸腺HMG的SDS电泳图型也没有明显的区别;3)胎儿肝脏HMG和胸腺HMG以及与小牛胸腺HMG相比具有某些差异。 从5—7个月胎儿肝脏总HMG中纯化出几个不同的蛋白质组分。其中HMG—e和HMG—c二个组分的氨基酸组成已被测定,发现它们各有独特的氨基酸组成。 用SDS凝胶电泳测得胎儿肝脏和胸腺HMG的分子量范围为12,000—26,000。     

北京鸭血清中C-反应蛋白的研究

C-反应蛋白(CRP)从北京鸭血清中分离和纯化。其方法是根据此蛋白对Ca~(2+)结合依靠性的亲和层析,之后通过Sepharose 4B和DEAE-Sephadex A-50层析。在C_4~(2+)存在下,鸭CRP很容易和肺炎球菌C-多糖反应生成沉淀。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和SDS-PAGE测定结果表明,鸭CRP的表观分子量是1,100,000 doltons。很可能天然条件下的CRP是两种不同亚基的聚合体。鸭CRP是糖蛋白。在电子显微镜下观察到CRP分子呈圆盘状,其直径约为100nm。