冷活性琥珀酸脱氢酶的特性

用常规酶学方法从嗜冷酵母(Y18)中分离纯化有催化活性的琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase, SDH).该酶的最适反应温度为20℃,0℃仍然保持酶活性的20%,40℃处理30min酶活性损失90.4%,不同温度处理后酶在280nm的紫外吸收明显改变,随温度升高在280nm紫外吸收值增大.这些结果表明所分离到的SDH是对温度敏感的冷活性酶.纯化的SDH经PAGE电泳分析显示单一条带,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测出相对分子质量为60×103和32×103的2条带,分别为黄素蛋白(flavoprotein, FP)大亚基和铁蛋白(iron-protein, IP)小亚基.通过对FP的1491个碱基的DNA序列分析表明(酿酒酵母FP基因全序列由1923个碱基组成),菌株Y18与酿酒酵母具有很高的DNA序列同源性;Y18与酿酒酵母FP一级结构包括酶的活性中心基本一致,但Y18的FP中3个位置的氨基酸变为R基较小的氨基酸,并有3个位置的氨基酸被在β-转角处出现频率较高的氨基酸所取代(丝氨酸、天冬氨酸和苏氨酸).这些结构特性可能使Y18 SDH的空间结构更具柔韧性(flexibility),有利于在低温条件下发挥催化功能.     

聚羟基烷酸的生物合成途径及相关基因组特性的研究进展（综述）

聚羟基烷酸（Ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙａｌｋａｎｏｉｃ ａｃｉｄｓ,ＰＨＡｓ）是一类由许多原核生物在非平衡生长（如缺乏氮、氧、磷、镁等）条件下合成的细胞内碳源和能源的贮藏性聚合物。根据单体中碳原子数目,可以将ＰＨＡ分为２种类型：①短侧链ＰＨＡ（ｓｈｏｒｔ－ｓｉｄｅ－ｃｈａｉｎ ＰＨＡ,ｓｓｃ－ＰＨＡ）,单体为含３－５个碳原子数的羟基脂肪酸,以聚－ －羟基丁酸［ｐｏｌｙ－　　－ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ,Ｐ（３ＨＢ）］和聚　－羟基戊酸［ｐｏｌｙ－　－ｈｙｄｒｏｘｙｖａｌｅｒｉｃ ａｃｉｄ,Ｐ （…     

罗耳阿太菌酸性β-甘露聚糖酶纯化与性质的研究

产β-甘露聚糖酶的罗耳阿太菌(Athelia rolfsii)菌株CBS1 91.62,发酵培养5日,发酵液离心去菌体,上清经硫酸铵沉淀,琼脂糖凝胶(DEAE Sepharose Fast Flow)层析、羟基磷灰石(Hydroxylapatite)层析和冷冻干燥等步骤,β-甘露聚糖酶的比活提高了15.1倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品.经SDS-PAGE测定β-甘露聚糖酶分子量为42kDa,证明该酶为单聚体;用等电聚焦电泳测得其等电点为2.95;该酶的最适反应温度为30℃,在不超过50℃时酶活较稳定;酶反应的最适pH为5.0,pH稳定范围为3.5～7.0.重金属离子Zn2+、Fe3+、Co2+、Hg2+能强烈抑制该酶活性,而Mg2+、Al3+对该酶有部分的抑制作用,低浓度的Li+、Mn2+、Ca2+对该酶基本没有影响.     

一株分离自新疆天池寡营养环境的糖丝菌(Saccharothrix sp PYX-6)降解芘的特性

从没有被芳烃污染的新疆天池采集的水样中分离得到一株能够以蒽、菲、芘为惟一碳源和能源的菌株, 并编号为PYX-6.通过对其形态、生理生化特征、细胞壁组分、脂肪酸组成、DNA分子(G + C)摩尔百分含量及16S rDNA 序列同源性比较发现, 菌株PYX-6为Saccharothrix sp.对菌株PYX-6以芘为惟一碳源生长和底物降解的研究结果表明, 0.005%酵母膏对细胞生长和芘降解具有明显的促进作用, 细胞生长和底物降解的最佳pH和摇床转速分别为pH 6～8和200 r/min, 细胞生长比底物消失稍迟.对降解过程中间代谢产物进行质谱分析表明, 邻苯二甲酸是芘降解的中间代谢产物, 说明Saccharothrix sp PYX-6 的降解途径不同于过去报道的Mycobacterium sp PYR-1 的降解途径.     

Overexpressions of Lambda Phage Lysis Genes and Biosynthetic Genes of Poly-β-hydroxybutyrate in Recombinant E.coli

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＰｏｌｙβｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅ（ＰＨＢ）ｉｓａｋｉｎｄｏｆｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅｐｌａｓｔｉｃｓａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄａｓｇｒａｎｕｌｅｓｉｎｃｅｌｓ．Ｔｈｅｆｉｒｓｔｓｔｅｐｔｏｓｅｐａｒａｔｅｉｔｉｓｃｅ...