犬卵母细胞体外成熟培养前后的超微结构变化

从屠宰场采集犬卵巢，收集间情期（不可见卵泡）和发情期卵巢卵母细胞。成熟培养前，其超微结构有以下特征：间情期犬卵母细胞与卵丘细胞间以及卵丘细胞之间通过胞质突起相连，胞质中的主要细胞器是线粒体和脂滴，质膜下有发达的粗面内质网；囊状卵泡的卵母细胞，结构近似于间情期犬卵母细胞，但细胞间连接更为普遍，胞质中细胞器更加丰富，并出现零星的皮质颗粒。经ＴＣＭ１９９＋２０％ＦＣＳ＋１０ＩＵ／ｍＬＦＳＨ体外培养３６ｈ后，微绒毛、线粒体、滑面内质网、皮质颗粒等细胞器增多，胞质内细胞器向皮质区迁移，核仁发生致密化。体外培养７２ｈ后，卵母细胞进一步成熟，表面微绒毛由倒伏状变得细长且坚起，皮质颗料沿质膜下呈线行排列，线粒体分散于皮质中央     

慢病毒载体感染小鼠曲细精管的研究

目的探讨基于慢病毒载体曲细精管注射方法建立转基因动物的可行性。方法将8只4w～5w龄的雄性昆明小鼠分为高剂量(2只)、低剂量(6只)2个实验组,曲细精管注射滴度分别为1×109、2×107TU/mL的绿色荧光蛋白慢病毒载体(LV-GFP),注射量均为20μL/testis。注射后第4w、8w分别处死高剂量组小鼠各1只,于第5w、13w、17w各处死2只低剂量组小鼠,取睾丸,通过PCR、荧光显微镜和免疫组化等方法检测睾丸组织中GFP基因及表达。结果3只低剂量和2只高剂量小鼠睾丸组织中均可检测到GFP基因;但GFP表达仅见于高剂量组小鼠睾丸,其分布范围主要集中于曲细精管基膜及管间隙。结论慢病毒载体可通过曲细精管注射感染小鼠睾丸组织,但其感染效率与病毒滴度有关。