piggyBac共转染系统的构建以及转座活性的验证

piggyBac(PB)转座子的末端反向重复序列(ITR)和转座酶编码序列(PBase)分别克隆于质粒PB1156、atub-pBac-K10. ITR与包含红色荧光蛋白表达序列(RFP)的质粒pmCherry-N1重组构成供体质粒(Donor);PBase与真核表达载体pEFrF-PGK重组构成辅助质粒(Helper).使用由供体质粒与辅助质粒组成的PB二元共转染系统转染HEK293细胞,结果表明该二元共转染系统具有较好的转座活性,并且在分子水平验证了转座的发生以及使用反向PCR(IPCR)定位了其中一     

PiggyBac 转座子在肝脏中的活性研究

本实验运用高压尾静脉注射的方法将PB转座系统导入小鼠肝脏,研究其在肝脏中的转座活性,系统中PB转座子携带表达红色荧光蛋白的基因以指示转座的发生.注射10个月后取出小鼠肝脏,体视荧光显微镜观察肝脏是否有红色荧光,并通过基因组PCR、splinkerette PCR分析PB转座子在肝脏中的插入情况.实验结果表明,PB转座子在肝脏内发生高效转座,检测的68个PB插入位点中有34个位于基因序列,使得PB系统可以作为有效的基因诱变工具来研究基因功能.     

瓮福集团如何发挥思想政治工作在管理中的优势

思想政治工作实际上就是做人的工作,在瓮福人事制度日益深化的情况下,如何发挥思想政治工作在引进、留住人才等方面的重要作用,是做好瓮福人事管理工作的关键所在。本文主要从瓮福人事管理中存在的问题入手;然后分析了加强瓮福思想政治工作的必要性;最后提出了在瓮福人事管理中发挥思想政治工作优势的对策。     

高职学生顶岗实习期间的合理化管理建议

高职院校肩负着培养面向生产、建设、服务和管理第一线的应用型高技能人才的光荣使命,故学生的顶岗实习这个实践性教学环节是必不可少的。顶岗实习是高职生就业的重要过渡期和准备期,对提高高职人才培养质量至关重要。由于顶岗实习在校外企业进行,有别于校内的教学活动,对顶岗实习期间学生的有效合理的管理尤其重要。针对高职学生在顶岗实习期间存在的安全问题、心理问题及学校管理问题,本文在实践的基础上提出了一些合理化管理建议。