葡萄离体培养中胚状体发生的研究Ⅰ.胚状体发生的组织细胞学观察

以葡萄（ＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａＬ．）的花药和花丝为实验材料，观察了葡萄离体培养中胚状体的发生发育过程．结果表明：（１）葡萄的花药和花丝经诱导都可形成胚性和非胚性两类不同的愈伤组织，与外植体来源无关，胚状体经胚性愈伤组织产生．（２）胚状体多起源于胚性愈伤组织表层或表层以下的单个细胞，这些细胞核大，细胞质浓，染色深，在表层者易于脱落而处于单个离散状态，它们的第一次分裂有均等分裂，也有不等分裂，经２细胞、３细胞、多细胞原胚等阶段发育为成熟的胚状体．（３）葡萄胚状体具有与双子叶植物合子胚相似的发育过程     

葡萄与柴胡科间体细胞杂交再生杂种植株

狭叶柴胡原生质体用强度为 2 6 0 μW/cm2 紫外线照射 0 ,1 ,2和 3min后 ,与酿酒葡萄原生质体融合 .对融合再生的 1 9个单细胞克隆进行表型、同工酶、染色体和 5SrDNA间隔序列分析 .结果表明 ,它们均为体细胞杂种 . 1 1个杂种愈伤组织包括对称及不对称融合产物 ,在培养 5个月时 ,再生了体细胞胚、幼叶及叶丛 ;其中有 4个不对称融合的杂种细胞系在培养8～ 1 0个月后 ,再生出有根的完整小植株 .染色体观察表明 ,完整植株的再生与杂种细胞的染色体数目相对减少相关 .对部分小植株幼叶的核糖体 5SrDNA间隔序列差异的分析 ,证实它们为科间体细胞杂种 .     

葡萄耐盐细胞系的超微结构研究

运用透射电子显微镜技术研究葡萄耐盐细胞系和对照系的细胞超微结构 .结果表明两类细胞系均由排列紧密的分生细胞团组成 .但是 ,与对照系相比 ,耐盐细胞有几个显著的超微结构变化 :液泡较大 ;质体内积累淀粉粒 ,形成杯形变形质体 ;脂滴、高尔基体和平行于胞壁堆积的内质网明显增多 ,出现包绕着高密度核糖体的环形内质网 ,细胞壁内突生长 ,表面凹凸不平 ,胞间连丝丰富 .这些结构改变可能与葡萄细胞的耐盐能力密切相关 .     

葡萄原生质体分离和培养的研究

以葡萄花药诱导的胚性愈伤组织为材料,在附加5％纤维素酶(OnozukaR-10)和0.5％蜗牛酶的混和酶液中分离,获得大量具有活力的原生质体.分离的原生质体在附加2mg/L 6—BA和0.5mg/L 2,4—D的改良B_5培养基中进行液体浅层培养,原生质体能再生细胞壁、生长和分裂,形成了较大的细胞团。     

葡萄胚性愈伤组织无性系的建立、保持及其植株再生的研究

以葡萄“胜利”品种的花药、花丝为外植体，采用附加２ｍｇ／１６－ＢＡ和０．５ｍｇ／１２，４－Ｄ的改良Ｂ５培养基诱导葡萄胚性愈伤组织，诱导频率约为２０％．具有胚性的愈伤组织，经过五年以上的继代培养，至今无性系仍保持着很强的分化和再生植株的能力．激素成份对胚性愈伤组织的建立、长期保持、胚状体发生及产生丛生芽均有明显影响．利用一种简易高效的试管苗移栽技术，使葡萄试管苗的移栽成活率高达９５％以上．     

葡萄胚状体发生的初步研究

由葡萄(Vitis Vinisera L)花药愈伤组织产生的胚状体形成单倍体幼苗后,经4—5次继代培养,发现其表皮细胞具有形成胚状体和进一步发育成幼苗的能力。胚状体的表层也具有同样的能力。将这样的一棵幼苗,整株置于液体培养中,在黑暗中震荡培养一周,然后在光照下静止培养,可获得大量完整的小植栋。实验结果证明葡萄单倍体的体细胞具有再生完整植株的全能性。在植物组织和细胞培养中,通过胚状体再进一步形成幼植物具有繁殖数量多、成苗速度快和结构完整的特点。因此,对于胚状体发生的研究,已经引起人们广泛的注意。目前,在植物的组织培养中,记载有胚状体发生的植物已涉及到广泛的分类类群,产生胚状体的离体培养物也有多种多样。但是对于胚状体形态发生的详细研究报导甚少。在1965年,Konor和Nataraja利用石龙芮的下胚轴进行切片观察时,看到了一系列胚状体发生的组织学过程。1970年Backs-Hüseman,D等在胡萝卜的单细胞悬浮培养中,见到了游离单细胞发育成胚状体的过程,1974年,Sunderland等在烟草中,也报导了小孢子胚状体的发生过程。但是,在具有经济价值的木本果树中,尚无这方面的报导。本文以葡萄单倍体幼苗为材料,进行切片观察和培养,对葡萄胚状体的发生进行了初步的探讨。     

普通小麦(Triticum aestivum L)“提型”和“潍型”雄性不育系小孢子发生的细胞形态学观察比较

在小麦杂种优势利用中往往把雄性不育类型区分为细胞质雄性不育和细胞核雄性不育两类,前者以“提型”,为代表,后者以“潍型”为代表。为了解小麦“提型”和“潍型”不育系在小孢子发生过程中的异同,以探索雄性不育的机理,我们就这两个不育类型的小孢子发生进行了细胞形态方面的观察比较。     

大花君子兰幼嫩子房培养再生植株的研究

以大花君子兰(Clivia miniata)的幼嫩子房组织为外植体,在附加2mg/LKT和lmg/L2,4-D的MS基本培养基上培养,诱导愈伤组织的频率可达90％以上,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后可以“一次成苗”。胚性愈伤组织在2～6年的继代培养过程中,其增殖生长与苗的分化同时进行,分化频率随着继代培养的延长而上升,经长期继代培养后,已建立了具有持久高分化潜力的胚性愈伤组织无性系,由无性系不断分化产生的大量再生植株,移栽到盆钵中能够成活,并且生长良好。