反相HPLC色谱法测定盐芥和菠菜中的甜菜碱含量

本实验利用反相HPLC色谱法测定了盐芥和菠菜中的甜菜碱含量，实验分别以菠菜和盐芥的叶组织为材料，用去离子水提取甜菜碱．提取液经浓缩后依次通过阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱进行纯化，用NH4OH洗脱阳离子交换树脂柱，洗脱液收集浓缩干后用磷酸盐流动相溶解．样品用C18反相色谱柱进行分离，流动相为50nmol／L的KH2PO4溶液(pH4．56)，色谱条件为0．7ml/min。192nm波长测定；此色谱条件能使甜菜碱与其它组分很好的分离，甜菜碱加样回收率达到90％-98％．经测定。盐芥叶片中的甜菜碱含量为1．367mg/g，菠菜叶片中的甜菜碱含量为1．656mg/g．     

涡虫整体原位杂交方法的优化改良

从原位杂交样品的预处理、固定液选择、杂交温度和时长选择、封闭时长等方面对日本三角涡虫整体原位杂交技术进行优化改良。实验表明,采用 NAC 处理 10 min、w=4%的多聚甲醛溶液固定、56oС 杂交 48 h 以及封闭 3 h 的改良方法可获得高特异性、低背景且着色清晰的实验结果。     

鲤鱼NOD1基因克隆与组织特异性表达分析

利用RT-PCR技术在鲤鱼(Cyprinus carpio)中首次克隆得到了NOD1基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼NOD1具有3个保守结构域和相应的保守位点,在进化中与草鱼亲缘关系最近;半定量RT-PCR分析NOD1基因在鲤鱼不同组织中分布发现,NOD1在头肾和血液中表达最高,在肌肉、皮肤和性腺中表达量最少;鳗弧菌(V.anguillarum)刺激后NOD1基因在肝脏、脾脏、头肾和前肠中表达量都有明显上升。研究结果显示NOD1在鲤鱼应对鳗弧菌刺激天然免疫过程中可能发挥着重要作用。     

甜菜碱的生物合成及其基因工程的研究进展

综述了甜菜碱的合成过程和催化酶类的相关特性。并对催化甜菜碱合成的胆碱脱氢酶(CDH)、胆碱单加氧酶(CMO)、甜菜碱醛脱氢酶(BADH)、胆碱氧化酶(COD)基因工程方面的研究进展进行了综述．     

鲤鱼Xbp1基因克隆与组织特异性表达分析

利用RT-PCR和RACE技术克隆得到鲤鱼(Cyprinus carpio L.)X盒结合蛋白1(Xbp1)基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼Xbp1 mRNA的26 bp内含子及其两侧序列能形成典型的茎环结构,其蛋白结构具有1个保守的碱性亮氨酸拉链(bZIP)结构域;系统进化分析表明鲤鱼Xbp1与斑马鱼的亲缘关系最近;实时荧光定量PCR检测结果表明,两种亚型Xbp1 mRNA在鲤鱼不同组织中广泛表达,且未剪接型Xbp1 mRNA的表达量明显高于剪接型。     

RACE法克隆日本三角涡虫β-actin基因

采用cDNA末端快速扩增法(RACE),以日本三角涡虫cDNA为模板扩增β-肌动蛋白(β-actin)基因,对聚合酶链式反应(PCR)产物进行测序和拼接。经与NCBI核酸数据库进行序列比对,结果表明:产物的cDNA长度为1168 bp,开放阅读框ORF长999 bp,编码332个氨基酸,具有actin蛋白家族典型特征。     

一种大肠杆菌胆碱脱氢酶活性的测定方法

本文提出了一种简单易行的测定微生物中胆碱脱氢酶活力的方法。通过测定549nm波长下电子传递体系PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐)-cty.c(细胞色素C)光吸收值的增加,就可以计算出胆碱脱氢酶活力。利用此方法测定了大肠杆菌胆碱脱氢酶热激诱导前后的活力,结果发现受到诱导的大肠杆菌中胆碱脱氢酶的活力明显高于对照组。     

鳗弧菌质粒编码的铁吸收系统的分子调控

鳗弧菌是鱼类弧菌病的主要病原菌，该菌中质粒编码的铁吸收系统是重要的毒力因子．在铁吸收系统中，铁转运体系以及弧菌素合成基因受到AngR、TAF、Fur、反义RNAs、铁离子以及弧菌素等调控因子的调节，这些调控因子分别在转录或后转录水平参与铁吸收系统的正负调控、