RNA干扰及其应用

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是真核生物中普遍存在的一种自然现象，是由双链RNA（double—stranded RNA，dsRNA）启动的序列特异的转录后基因沉默过程．在这一过程中，双链RNA被核酸内切酶切割成小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA），小干扰RNA与相关的蛋白质结合成RNA诱导沉默复合体（siRNA—induced silencing complex，RISC），RISC识别并降解靶mRNA．现在认为RNA干扰是真核生物共有的抗病毒、抗转座子、抗转基因和抗异常RNA的基因组免疫系统．随着RNA干扰的研究，产生了一种新的技术-RNA干扰技术，并得到了广泛的应用．     

反相HPLC色谱法测定盐芥和菠菜中的甜菜碱含量

本实验利用反相HPLC色谱法测定了盐芥和菠菜中的甜菜碱含量，实验分别以菠菜和盐芥的叶组织为材料，用去离子水提取甜菜碱．提取液经浓缩后依次通过阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱进行纯化，用NH4OH洗脱阳离子交换树脂柱，洗脱液收集浓缩干后用磷酸盐流动相溶解．样品用C18反相色谱柱进行分离，流动相为50nmol／L的KH2PO4溶液(pH4．56)，色谱条件为0．7ml/min。192nm波长测定；此色谱条件能使甜菜碱与其它组分很好的分离，甜菜碱加样回收率达到90％-98％．经测定。盐芥叶片中的甜菜碱含量为1．367mg/g，菠菜叶片中的甜菜碱含量为1．656mg/g．     

应用酵母双杂交系统筛选与Spr2相互作用的蛋白

Spr2在斑马鱼胚胎发育过程中的中胚层和外胚层中表达,它可以通过调控Fgf信号通路来调控斑马鱼中胚层的发生.为了进一步揭示Spr2调控Fgf信号通路的分子机制,本文通过酵母双杂交系统在斑马鱼早期胚胎cDNA文库中筛选可能与Spr2相互作用的蛋白,以酵母融合的方法在6.3×106个转化子中筛选到78个阳性克隆,测序鉴定后最终得到Pairedboxgene6a、mSin3A-associatedprotein130等11种可能与Spr2蛋白相互作用的蛋白,通过结果分析推测Spr2可能通过fgf8参与Fgf信号通路的调控.