毛尖紫萼藓1-半胱氨酸过氧化物酶基因GpPER1的克隆、表达载体构建及序列分析

从本实验室已成功构建的毛尖紫萼藓干旱cDNA文库中获得一条与抗旱相关的基因,即1-半胱氨酸过氧化物酶(1-Cys peroxiredoxins)基因,简称GpPER1,GenBank登录号为GU989314,该基因全长1040bp,开放阅读框(ORF)为666 bp,编码221个氨基酸。根据GpPER1基因的开放阅读框设计特异性引物,通过RT-PCR技术扩增得到GpPER1基因片段,并成功构建了表达载体pRI 101-GpPER1,为进一步在分子水平上研究毛尖紫萼藓的耐旱机制,发现并利用植物的抗逆基因奠定了基础。     

计算机分子模拟提高蛋白质热稳定性的研究

计算机分子模拟作为一种重要的研究手段在生物、医药、化学、材料、微电子等领域受到了广泛的关注.其不仅可以从分子水平研究系统的微观结构及其宏观性质,而且在某些极端条件下及实验设备非常昂贵时,能直接提供实验数据以供参考.文章以解淀粉芽孢杆菌核糖核酸酶Barnase为研究对象,研究其在高温下的结构特征和动力学行为,分析蛋白质体系内的相互作用,寻找提高该蛋白质热稳定性的因素.为研究提高蛋白质热稳定性提供了一种计算思路和方法,同时为设计新的能在高温下发挥作用的新型酶类提供理论依据.     

环己烯类神经氨酸酶抑制剂的三维定量构效关系研究

环己烯类神经氨酸酶抑制剂是目前效果最好的流感病毒抑制剂.选取26个典型的环己烯类神经氨酸酶抑制剂,应用比较分子力场分析(CoMFA)方法,研究它们与神经氨酸酶(NA)的相互作用,建立了环己烯类NA抑制剂与NA的三维定量构效关系(3D-QSAR)模型.该模型的最佳非交叉验证系数R2为0.991,交叉验证系数R2cv为0.760,检测值F为521.53,标准偏差SEE为0.098,立体场、静电场的贡献分别为74.6%、25.4%,最佳主成分为4,这表明模型具有很强的稳定性和预测能力.用该模型对随机挑选的3个化合物进行预测,得到了满意的结果.     

外源性H2S通过调节β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达对PC12细胞APP／Aβ代谢的影响

目的观察外源性硫化氢对嗜铬细胞瘤细胞β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）的调节作用，进而探讨其对淀粉样前体蛋白／β-位淀粉样蛋白代谢途径的影响。方法用硫氢化钠作外源性H2s供体，实验设空白对照组、NaHs50μmol／L组、NaHS100μmol／L组和NariS200μmol／L组，按分组浓度处理PC12细胞24h后，RT-PCR和Western blot法检测细胞内BACE1 mRNA及蛋白表达，并用Western blot法继而检测APP代谢过程中关键蛋白APP、C99、C83表达变化，EusA法检测细胞培养液中AB40和AB42水平。结果NaHS在实验浓度范围内从基因与蛋白两个水平上呈剂量依赖性下调BACE1表达，并下调C99、Ap40和Ap42蛋白表达，上调C83蛋白，各NaHS组分别与对照组比较，差别均有统计学意义（P〈0．05），而对APP蛋白表达没有影响，各组间比较差别无显著性（P〉0．05）。结论外源性H2s具有通过调节PC12细胞BACE1表达下调APP／Aβ代谢的作用。     

铝胁迫对油菜生长及叶绿素荧光参数、代谢酶的影响

以铝敏感(华油2790,简称华油)和耐性(中双7号,简称中双)油菜品种为材料,在水培条件下,研究了0,50,100和200 μmol/L铝胁迫处理7 d后对油菜根和叶的各项生理指标的影响.结果表明:随着铝处理浓度的增加,油菜的相对根长逐渐减小,华油的抑制率大于中双,但两者相对株高的变化不大;根的总长和总表面积等均随着铝处理浓度的增加而减小,但根系直径在200 μmol/L铝处理时都略有增加;叶的各项指标则变化不大.此外,各项叶绿素荧光参数,如最大荧光(Fm)、PSⅡ潜在活性(Fv/F0)、光化学量子产量(Yield)等均随着铝浓度的增加而降低,而初始荧光(F0)与上述指标的变化趋势相反,中双的变化幅度小于华油.铝处理下,油菜根尖的酸代谢酶--柠檬酸合成酶(CS)、苹果酸脱氢酶(MDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)和乌头酸酶(ACO)等的活性均高于对照,且随着铝处理浓度的增加而增加.表明铝胁迫对油菜根和叶均造成了一定的伤害,且对根的影响更明显.随着铝浓度的增加,根尖各代谢酶的活性增加,可能是铝胁迫促进了油菜的生理代谢,是对铝毒的一种生理响应机制.     

胰岛素信号通路PI3K／Akt对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA水平的影晌

目的通过胰岛素和磷脂酰肌醇-3激酶（P13K）抑制剂渥曼青霉素（wortmannin）对P13K／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（P13K／Akt）信号通路的激活和抑制作用，观察P13K／Akt信号通路对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACEl）mRNA水平表达的影响。方法20只sD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、胰岛素组和渥曼青霉素组，海马立体定向注射胰岛素和P13K抑制剂渥曼青霉素。逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测P13K／Akt信号传导下游蛋白Akt以及BACEImRNA水平。结果注射胰岛素的海马P13K信号通路下游信号分子：AktmRNA表达上调（分别较空白和阴性对照组P=0．047，P=0．002），而BACElmRNA表达下调（分别较空白和阴性对照组P=0．004，P=0．01）。渥曼青霉素组的P13K下游信号分子AktmRNA表达明显被抑制（分别较空白和阴性对照组P=0．002，P=0．039），同时BACEImRNA的表达较对照组上调（分别较空白和阴性对照组P=0．039，P=0．018）。结论胰岛素信号通路P13K／AM可以调节BACEl的转录水平参与阿尔茨海默病的发病机制。     

铜离子对淇河鲫肝胰脏中3种酶活性影响的研究

本文研究了不同浓度铜离子暴露处理及暴露解除后淇河鲫(Qihe crucian carp)肝胰脏中酸性磷酸酶(ACP),碱性磷酸酶(AKP)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明:铜离子暴露处理后,随铜离子浓度的升高,与对照组相比,ACP和AKP的活性先升后降,而CAT活性均极显著下降(p<0.01);暴露解除后,3种酶活性在12天内均恢复正常;肝胰脏中的CAT对铜离子比较敏感,因而可作为对铜离子污染的环境指示。     

新型蛋白质与肥胖相关疾病

更好地了解PPARs对人体作用的细微差别 ,可能对找到治疗诸如肥胖症、心脏病、糖尿病、癌症等疾病的有效药物提供新的途径     

快速测定氧化还原酶活力的一次性介体电极

以葡萄糖氧化酶（GOD）为模型酶，用一次性丝网印刷电极检测氧化还原酶活力，选用具有较低氧化还原电位的单羟基二茂铁（HMF）作为电子传递介体，以电流法测定氧化酶的活力，所需时间仅为60s，线性响应范围为0～40U/mL，将电极用于检测黑曲酶发酵产生的葡萄糖氧化酶 （GOD）的活力，测定结果与传统的方法相对照，具有较好的一致性，相关系数为0.9813。     

亚麻/棉针织物酶抛光工艺探讨

为了解决麻类针织物穿着刺痒的问题，改善手感和外观，根据酶剂对纤维素纤维的作用机理，选用特定亚麻 /棉混纺纱织制的针织汗布进行实验，测定 5种酶剂的处理效果及酶用量、处理时间、搅拌程度、处理温度及表面活性剂等因素对处理后织物失重、吸水性、手感及外观等的影响规律，并绘出曲线.结果显示，选择合适的酶剂于一定的条件下处理，效果明显.实验证实，酶抛光技术确实可提升麻类针织物的品质，有助于高档麻针织产品的开发.