pTYB11载体的应用及其重组子破菌条件的研究

IMPACTTM—CN蛋白质纯化系统的pTYB11载体的应用,有利于快速分离靶蛋白。因靶蛋白位于胞内,需采取有效破碎手段获取。采用超声波破碎,试验找出重组大肠杆菌的最佳破碎条件为：超声时间占空比为3：7,输出功率40W,破碎0.5h。western-blotting检验可以得到抗原性正常的靶蛋白。     

奇妙的生物发光

灯笼鱼挂着绿色小灯笼,巨口鱼发射红色光束,萤火鱿在海水里翻腾起一片蓝色泡沫,"鬼火蘑菇"在密林深处发出幽幽荧光……生物发光是大自然最奇妙的现象之一。     

HBED、EHPG分子内氢键与光谱性质

在pH 7.4、0.1 mol·L-1 Hepes条件下,由Tb3+荧光测得Tb-EHPG条件稳定常数log K为13.95±0.13;EHPG与金属离子结合后分子内O…H-O型氢键断裂而导致荧光被淬灭；HBED与金属离子结合后分子内N…H-O型氢键断裂而导致荧光增强,荧光变化均与结合的金属离子的原子量成反比.由此总结了稀土离子与HBED,EHPG结合的规律.并用荧光方法推断了脱铁伴清蛋白N-,C-端结合部位酪氨酸残基的分子内氢键类型.     

神经丝轻链蛋白在自身免疫性脑炎中的研究

自身免疫性脑炎(autoimmune encephalitis, AE)是一类与神经元自身抗体或中枢神经系统(central nervous system,CNS)自身免疫生物标志物相关的炎症性中枢神经系统疾病的总称。神经丝轻链蛋白(neurofilament light chain, NfL)是神经元细胞骨架中选择性表达最多且最为重要的蛋白质，已有研究证实Nf L水平升高可以作为多种神经退行性疾病发生或发展的重要标志物。最近的研究发现，Nf L与AE的早期筛查与诊断、疾病发展与治疗以及预后检测与评估等有关，有望成为AE疾病治疗的潜在生物标志物。基于此，文章从Nf L的基本结构功能、检测方法和AE疾病诊断等方面进行了综述，尤其是对Nf L在AE的前期诊断筛查、疾病进展监测和预后治疗评估方面的作用进行了着重分析，表明Nf L在AE临床治疗中的潜在应用前景。     

科学家解锁大脑编码情绪模式

正中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所胡海岚研究组利用一项叫作TAI-FISH的新技术揭示了小鼠前脑边缘系统各脑区对于喜好或者厌恶的情绪反应的编码模式。生活中充满了七情六欲,喜乐哀愁。为什么人们高兴时心花怒放、如步云端,痛苦时又五内俱焚、似坠深渊?在这些情绪的背后,大脑中发生了什么样的变化?情绪使生活多姿多彩,帮助人们趋利避害,对生存和生活至关重要。然而,长久以来,大脑如何编码情绪信息却一直是个谜。在胡海岚的指导下,研究生修建     

嗜盐古菌ABDH12的部分生理生化特征及Br蛋白基因部分序列的研究

文章分析新疆艾比胡嗜盐古生菌物种与细菌视紫红质（bacteriorhodopsin，BR）蛋白基因资源，对分离纯化到的极端嗜盐古生菌菌株ABDH12，对其进行了生理生化特性研究，采用PCR方法扩增技术和编码螺旋c至螺旋G的BR蛋白基因片断，测定了BR蛋白基因核心序列。基于生理生化特性和BR蛋白基因序列的同源性比较，以及系统发育分析表明，BR蛋白中对于完成质子泵功能以及与视黄醛结合的关键性氨基酸残基均为保守序列，位于膜内侧的序列比位于膜外侧的序列更保守，并且ABDH12中的螺旋C至螺旋G的蛋白与其他菌株差异明显，是两种新的BR蛋白，序列号为：FJ796897。迄今为止，国内极少有关艾比湖嗜盐古菌的BR蛋白研究的报道，文章可为今后研究同类极端环境中新的物种资源提供素材和参考。     

毛尖紫萼藓1-半胱氨酸过氧化物酶基因GpPER1的克隆、表达载体构建及序列分析

从本实验室已成功构建的毛尖紫萼藓干旱cDNA文库中获得一条与抗旱相关的基因,即1-半胱氨酸过氧化物酶(1-Cys peroxiredoxins)基因,简称GpPER1,GenBank登录号为GU989314,该基因全长1040bp,开放阅读框(ORF)为666 bp,编码221个氨基酸。根据GpPER1基因的开放阅读框设计特异性引物,通过RT-PCR技术扩增得到GpPER1基因片段,并成功构建了表达载体pRI 101-GpPER1,为进一步在分子水平上研究毛尖紫萼藓的耐旱机制,发现并利用植物的抗逆基因奠定了基础。     

C-反应蛋白研究进展及热点争议

长期以来,C-反应蛋白(CRP)作为炎症标示因子被应用于临床检测,用来表征急性炎症反应.近期大量研究表明CRP在与慢性炎症相关的心血管疾病中扮演预报因子和参与者的双重角色,而后者逐渐成为邻域内研究的热点.但是,CRP参与病理过程的机制尚未明确,研究结果还存在各种争议.流行病调查、体外效应、动物模型及免疫组化多方面的数据调研显示:除了研究方法的原因外,CRP存在不同的天然异构体形式(五聚体pCRP和单体mCRP),或许可以更为合理地解释目前研究中所存在的争议.     

乙酰基转移酶TIP60蛋白乙酰化位点定位的研究

乙酰基转移酶TIP60(tat-interaction protein,60ku)介导众多蛋白的乙酰化修饰,如核心组蛋白、p53、ATM、H2AX、RB和E2F1等,参与调控细胞凋亡、周期阻滞、DNA损伤修复和细胞衰老等多种重要细胞生理活动,并且与肿瘤发生密切相关.与另外2种乙酰基转移酶p300和PCAF相似,TIP60也可以介导自乙酰化.目前,TIP60自乙酰化修饰的精确位点和细胞功能并不清楚,因此在体外条件下,对TIP60蛋白的乙酰化位点进行了初步定位.构建了4种GST-TIP60原核表达质粒,利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达型菌株BL21系统,诱导表达并纯化含有TIP60全长和不同片段的GST融合蛋白,通过体外乙酰化实验证实TIP60蛋白的乙酰化位点集中在N端,而不是含有保守的MYST结构域的中间段.这些实验结果为进一步研究TIP60自乙酰化调控方式及其对TIP60蛋白细胞功能的影响提供了必要条件.