枯草芽孢杆菌启动子的克隆及功能验证

以pHT01穿梭质粒为骨架,构建以卡那霉素抗性基因为报告基因的启动子探针载体pHT-kan.利用该探针载体在大肠杆菌中克隆枯草芽孢杆菌168的启动子活性片段,挑取得到100个重组子.通过卡那霉素浓度梯度筛选出2个抗性最强的片段进行序列测定和分析,将启动子片段命名为BSP25、BSP31.将抗性最高的两个载体转入枯草芽孢杆菌168菌株,结果表明,它们可以在枯草芽孢杆菌中启动卡那霉素抗性基因的表达,重组菌株表现出卡那霉素抗性.     

微生物油脂中多不饱和脂肪酸的富集研究

采用脲包法富集微生物油脂中的多不饱和脂肪酸 (亚油酸和γ -亚麻酸 ) .结果表明 :当混合脂肪酸∶尿素∶甲醇为 1∶3∶7.88时 ,富集效果最佳 ,微生物油脂中亚油酸和γ -亚麻酸的含量从 9.88%增加到 44 .79% ,其中γ -亚麻酸的含量从 2 .0 3%增加至 19.79% ,富集了将近 10倍     

假单胞交替菌BYS-2产褐藻胶裂解酶条件研究

以褐藻酸钠作为初筛培养基的唯一碳源,从鲍鱼养殖水样中分离获得一株产褐藻胶裂解酶的假单胞交替菌BYS-2。对该菌株进行产酶条件研究,获得最适产酶配方(w/v)为：褐藻酸钠0.1%,葡萄糖0.05%,酵母膏1%,黄豆饼粉0.3%,(NH4)2HPO4 0.3%,初始培养基pH8.0;最佳产酶条件为：接种量2%(v/v),装液量50mL/250mL,发酵温度20℃,摇床转速200 r/min,在此条件下发酵24h酶活力可达5.29U/mL,比优化前(1.57 U/mL)提高2.37倍。     

《他们眼望上苍》的女性主义叙事结构研究

《他们眼望上苍》是一部黑人女作家书写的表现美国社会新黑人女性意识的著作。它以女主人公的自述为文本推进方式,描述了一个虽然经历了三段失败的婚姻,却能牢牢掌握自己的生活、从幼稚走向成熟的社会下层黑人女性。作品出版之后给作家尼尔·赫斯顿带来了声誉,若从叙事学角度考量,小说独特的框架式叙事结构为黑人女性主义意识的显现起到了重要的作用,值得一探究竟。     

多菌种微生物混合培养的条件及生长关系研究

对3种具有水质净化功能的地衣芽孢杆菌、假丝酵母菌和荚膜红假单胞菌进行混合培养,探讨3种菌混合培养的培养基、培养条件及其生长关系.实验结果表明,3种菌均可良好生长的培养基为每升水含葡萄糖10g,酵母膏10 g,蛋白胨6 g,NaCl220 g,MgSO40.2 g,KH2PO40.5 g,K2HPO40.3 g,pH6.5;3种菌混合培养的接种顺序与培养条件为在培养液中先分别接种3%荚膜红假单胞菌与假丝酵母菌,于35℃、200 r/min摇床下培养48 h,后接种4%地衣芽孢杆菌继续混合培养至60 h;3种菌混合培养时的生长关系为假丝酵母菌与荚膜红假单胞菌存在互惠互利关系,而地衣芽孢杆菌与其它两株功能菌为无关共栖关系.     

双歧杆菌对抗菌素的敏感性与抵抗性

对 10种抗菌素进行双歧杆菌的敏感性试验 ,探讨VitC、VitB1、VitB6及异麦芽寡糖对双歧杆菌抵抗抗菌素的敏感作用 .结果表明 ,双歧杆菌对 β -内酰胺类 (MIC :青霉素 0 .1177～ 0 .310 5 μg /mL ,先锋VI号 0 .2 95 9～ 0 .885 3μg /mL)、大环内酯类 (MIC :红霉素 0 .0 85～ 0 .1137μg /mL ,制霉菌素 0 .90 46～ 8.0 2 9μg /mL ,乙酰螺旋霉素 1.2 9～ 2 .94μg /mL)以及四环类的四环素 (MIC :0 .2 46 3～ 0 .4118μg /mL)很敏感 ;对四环类的土霉素(MIC :15 .7～ 2 9.4μg/mL)较敏感 ;对氨基糖苷类 (MIC :链霉素 6 5 .9～ 190 μg /mL、庆大霉素 490～ 941μg /mL、卡那霉素 16 5～ 2 15 μg /mL)的作用不敏感 .而 3种维生素和异麦芽寡糖均具有提高双歧杆菌对抗菌素的耐药性     

产脂酵母脂肪粒计数方法的数学分析

为了确定一个简便有效的产脂酵母的初筛方法，采用数学分析的方法对脂肪粒数目、脂肪粒大小和菌体含油率之间的关系进行探讨，得到一个多元非线性回归方程：ｚ＝４．３４－２４．０９６ｘ＋１．１６２ｙ＋８．５５１ｘ２＋２．８２４ｘｙ－０．２１２ｙ２，其中含油率（ｚ）与脂肪粒直径（ｘ）、脂肪粒数目（ｙ）之间的复相关系数Ｒ＝０．９９９７２．     

荚膜红假单胞菌类胡萝卜素的提取条件研究

对荚膜红假单胞菌类胡萝卜素的提取条件进行优化.结果表明,当采用超声波法破碎细胞(破碎功率160W,时间8min),以4∶1的丙酮—甲醇溶液作为溶剂,抽提2.5h时,提取效果最好,提取率为4.9mg/g干菌体.     

产琼脂糖酶海洋微生物的筛选鉴定及酶学性质研究

从红藻中筛选获得一株能产生明显液化现象并具有较高琼脂糖酶活力的菌株Ag-1,经生理生化实验和16S r DNA序列分析鉴定为弧菌属(Vibrio sp.).酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为50℃,40~50℃水浴保温1 h可保持68%以上的酶活力;最适反应p H值为8.0,在p H 7.0~8.0保温1 h可保持90%以上的酶活力,在p H 8.0~9.0保温1 h仍可保持70%以上的酶活力,具有较好的耐热性和耐碱性;且该酶对琼脂底物具有高度专一性;K+、Ca2+、Mg2+、Li+和Fe3+对琼脂糖酶活力具有激活作用,Mn2+、Zn2+和Cu2+对琼脂糖酶具有抑制作用.酶反应动力学实验结果表明,该酶的最适底物浓度为8 mg·m L-1,动力学参数Km为0.58 mg·m L-1,vmax为3.29 U·mg-1.     

齿毛菌漆酶的基因克隆、异源表达及脱色研究

通过简并PCR、TAIL-PCR、Site Finding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因(包括启动子)序列,将其c DNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS(2,2-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid))为底物测定温度和p H对酶活及其稳定性的影响,并探究重组漆酶的脱色效果.结果表明,Lac DNA长3 129 bp,含有10个内含子,编码的Lac蛋白共有542个氨基酸,与已知漆酶氨基酸序列的相似性最高为60%,在5’端950 bp序列内发现多个可能的启动子元件;成功分泌表达重组漆酶r Lac,在含1 mmol·L-1铜离子的YP培养基中28℃发酵15 d达到酶活最高峰2.89 U·m L-1;酶学性质研究发现,r Lac的最适作用温度和p H值分别为55℃和3.0,且在p H 4~10及20~40℃有较好的稳定性;r Lac对靛类、偶氮类、三苯甲烷类等多种染料都有脱色效果.