首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   1733篇
  免费   23篇
  国内免费   90篇
系统科学   42篇
丛书文集   45篇
教育与普及   163篇
理论与方法论   43篇
现状及发展   5篇
综合类   1548篇
  2024年   1篇
  2023年   10篇
  2022年   8篇
  2021年   10篇
  2020年   9篇
  2019年   21篇
  2018年   5篇
  2017年   25篇
  2016年   18篇
  2015年   37篇
  2014年   54篇
  2013年   65篇
  2012年   89篇
  2011年   86篇
  2010年   78篇
  2009年   110篇
  2008年   112篇
  2007年   135篇
  2006年   103篇
  2005年   119篇
  2004年   135篇
  2003年   128篇
  2002年   106篇
  2001年   103篇
  2000年   71篇
  1999年   38篇
  1998年   24篇
  1997年   29篇
  1996年   27篇
  1995年   16篇
  1994年   13篇
  1993年   20篇
  1992年   8篇
  1991年   10篇
  1990年   12篇
  1989年   8篇
  1988年   2篇
  1987年   1篇
排序方式: 共有1846条查询结果,搜索用时 15 毫秒
31.
冯俊 《咸宁学院学报》2005,25(5):229-230
这里所指的重组即指立足于素质教育,着眼于人的发展,结合历史学科特点,为全面落实教学目标和教学任务而对教学内容和教学方法等进行重新组合的一种创新性教学实践活动。  相似文献   
32.
中华哲水蚤线粒体DNA COI基因序列分析   总被引:7,自引:7,他引:7  
采用苯酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)提取、异丙醇沉淀、酒精洗涤、TE缓冲液保存方法提取了采自胶州湾青岛海域的中华哲水蚤基因组DNA;以相应引物经PCR扩增得到线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ亚基基因(mtCOD)片段;PCR产物采用化学法进行质粒重组(载体pGEM—T Easy Vector)、热休克转化重组质粒至大肠杆菌感受态细胞(JM109)、氨苄LB培养基扩大培养;测序.结果表明。中华哲水蚤线粒体COI碱基大小为710bp(国际基因库索引号AY665663)。其碱基组成A、C、G、T含量分别为24.23%、19.15%、22.54%和34.08%;G C含量为41.69%。A T为58.31%.  相似文献   
33.
人粒细胞集落刺激因子 ( h G-CSF)有促进粒系造血干细胞增殖分化及增强成熟细胞功能的作用 ,广泛应用于医疗上癌症化疗、骨髓发育不良、再生障碍性贫血和先天性、特发性等嗜中性白细胞缺乏症的治疗。目前 ,h G-CSF主要来源工程菌发酵产生 ,浓缩于菌体包涵体之中 ,包涵体之中的 h G-CSF是没有生物活性的 ,必须经过溶解、分离、纯化和复性才有活性 ,有关 h G-CSF纯化和复性的研究实验如下 :一、材料与方法1 .包涵体来源 :上海三维公司赠送 ,由工程菌经发酵、收集菌体、破菌、离心和沉淀获得。2 .包涵体的洗涤 :主要是洗去包涵体表面的…  相似文献   
34.
信息素在八肋游仆虫接合生殖过程中起着重要的诱导配对作用,为了进一步研究其诱导机制,根据已知的基因序列,应用PCR技术,扩增信息素G3基因,并将该基因插入表达载体pGEX-6P1中,构建了重组表达质粒pGEX-6P1-G3.重组菌在37℃下,经1.0mmol/L IPTG诱导,12%SDS-PAGE分析,在37kDa处出现明显的特异目的带。  相似文献   
35.
阐明了期刊社会效益与经济效益的内涵及其相互关系,论述了新时期图书馆期刊知识重组的内涵、意义与基本要求。  相似文献   
36.
重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的培养条件研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
对重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的发酵条件进行了优化,并在BiofloⅢ发酵罐中实现了高密度培养和高效表达。结果表明;温度30C,培养基pH6.0,当酵母密度达到200A600mm以上时,加入无水甲醇,控制甲醇的流加体积,使其终体积分数为1.0%~3.O%,继续诱导培养72h左右,酵母菌密度可达到150g/L,重组肠激酶总活性可达58kIU/L发酵液。  相似文献   
37.
经营策略从本土套路到全盘西化,两股不相伯仲的力量一直是水火难容  相似文献   
38.
目的构建包含新型隐球菌细胞免疫主要相关基因-迟发超敏反应抗原基因(delayed-type hypersentivity antigen 1,DHA1)与小鼠共刺激分子B7-1的嵌合重组质粒。方法设计合成两对寡核苷酸引物。用PCR法分别从pUCmB7-1TM和新型隐球菌重组质粒pcDNA3-DHA1中特异扩增出编码B7-1和DHA1的基因片段(921和984bp)。分别用HindⅢ、EeoRⅠ、XbaⅠ酶切后。逐个定向连接到质粒pcDNA3中,转化宿主菌DH-5α.分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果酶切鉴定示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与献报道序列及预计结果一致。证实符合表达框架。结论本实验成功构建了新型隐球菌嵌合重组质粒pcDNA3-B7-1-DHA1。为进一步研究新型隐球菌DNA免疫奠定了基础。  相似文献   
39.
为研究重组人截短型白细胞介素6(rhIL-6)工程菌高效表达的影响因素及纯化方法的优化.观察不同培养温度对重组人截短型IL-6工程菌生长密度和IL-6表达的影响;复性蛋白终浓度对复性效率的影响;细菌诱导培养后,经破菌-洗包-溶包初步纯化后,再经柱层析纯化IL-6.其结果为30℃培养后42℃诱导培养5h的IL-6表达效率最高,达32.8%;复性蛋白终浓度在0.5 g/L以下时,蛋白复性效率最佳,比活性为4.42×108 μmol/min*mg-1;进一步柱层析后,IL-6的纯度达96.5%,得率可达46.5%.最后得出培养和纯化工艺简便易行,可获得高纯度、高比活性的截短型rhIL-6的结论.  相似文献   
40.
同源重组在染色体DNA基因克隆中的应用方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
黄庆华  吴兰  罗玉萍 《江西科学》2003,21(4):321-324
同源重组是生物界普遍存在的现象,从噬菌体、细菌到真核生物都有能发生同源重组的种类。如何把同源重组应用到基因克隆中成为近年来生物学家研究的热点。本文从宿主细胞的改造、重组功能的诱导、感受态细胞的制备、线性同源载体的获得及重组体的鉴定等几个方面具体叙述这种基因克隆的新方法,从分子水平上较为详尽地介绍了同源重组在染色体基因克隆中的应用、前景展望及存在的局限性。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号