琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法

对现有的DNA片段回收方法进行了改进.琼脂糖凝胶中目的DNA片段条带切割后,浸入适量的TE溶液(0.2～0.4 mL/g 琼脂糖胶),在37 ℃水浴保温15 min,以溶出凝胶中的DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原PCR反应相同条件下的PCR扩增,直接用75 %乙醇沉淀后,适量TE溶解得到回收的目的DNA样品.此法回收的DNA片段可用于分子克隆,特别是适用于TA载体的克隆与测序,适合大批量微量样品的准确回收,防止了因试剂盒回收造成的微量DNA片段的丢失.     

昆明产银杏叶总黄酮含量测定及抗氧化活性研究

目的:测定昆明产银杏叶提取物中总黄酮的含量和研究其抗氧化活性.方法:采用AlCl3显色分光光法测定银杏叶提取物中总黄酮的含量,并利用DPPH自由基(DPPH.)捕获分光光度法和连苯三酚红褪色光度法对银杏叶提取物进行抗氧化活性测定.结果:银杏叶提取物中总黄酮含量为5.85%;提取物对DPPH.的捕获能力达59.11%,IC50=114.6μg/mL,对.OH的最大清除率为39.16%.结论:昆明产银杏叶提取物具有良好的抗氧化能力.     

空气真菌及其毒素研究现状

对不同环境下气载真菌及其分布规律的研究现状进行了综述。阐述了空气真菌的危害机理、气传真菌引起的职业性真菌病及造成这种危害的临界值,介绍了空气真菌的检测方法,为深入开展空气真菌研究和有效控制其危害提供理论指导。     

烟碱降解菌DAB2菌株的筛选、鉴定和降解特性

以烟碱为唯一碳源,从湖北省襄阳烟叶种植土壤中分离得到了一株烟碱降解菌,命名为DAB2,经形态观察、生理生化分析和16S rDNA序列分析,初步鉴定该菌株为中间苍白杆菌(O.intermedium).当培养基中烟碱质量浓度为1.0 g/L,DAB2菌株生长良好,烟碱降解率为88.42%;当烟碱质量浓度为3.0 g/L,降解率为52.46%;当烟碱质量浓度高于6.0 g/L时,菌株生长和烟碱降解率均呈下降趋势,烟碱降解率低于10.36%.DAB2菌株在烟碱质量浓度为1.0 g/L的烟碱培养基中培养,不同时间样品紫外扫描显示:0 h只有259nm处有吸收波峰,8 h时259nm处波峰降低,在230nm和290nm处出现了新峰,表明产生了中间产物.     

枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981的克隆及转基因菌株的构建

目的:为揭示真菌紫杉醇合成分子机制.方法:克隆了产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981,该基因DNA和cDNA序列分别为969 bp和894 bp;其编码蛋白含有298个氨基酸、无跨膜结构和信号肽,与酰基辅酶A脱氢酶(ACAD)具有73%的一致性.进一步构建该基因的超表达载体pTFC-A00981,并转化枝状枝孢霉MD2,共获得9株转基因菌株.结果:Southern blot分析证明其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式插入.结论:该结果为深入分析超表达候选基因A00981对枝状枝孢霉MD2紫杉烷类合成的影响奠定了基础.     

具有AHL降解能力的海洋微生物的筛选与鉴定

以紫色视杆菌Chromobacterium violaceum 026为报告菌株,以己酰基高丝氨酸内酯作为菌株生长的唯一碳源及能源,通过富集培养、分离纯化,从西南印度洋海泥中筛选得到2株菌S2和S3。检测结果表明,S2、S3可能具有胞内AHL降解酶活性。形态鉴定和16S rDNA序列分析表明,2株菌均为芽孢杆菌属。系统发育分析表明,菌株S2、S3与Bacillus amyloliquefaciens的亲缘关系最近。     

稻瘟病抗性基因Pita~2的克隆及其介导的防御相关基因表达分析

为了克隆位于水稻12号染色体着丝粒区域具有广谱抗性的稻瘟病抗性基因Pita~2,研究构建并筛选了该基因供体品种PiNo.4的Fosmid文库,构建Pita~2候选区域的物理图谱并互补验证了5个候选基因,克隆得到了稻瘟病抗性基因Pita~2,确认了该基因就是Ptr基因.一组基因型接近、对Pita~2致病性相反的稻瘟病菌菌株对水稻进行离体接种,接种前后相关防御基因的表达量分析结果表明,Pita~2基因在稻瘟病菌侵染后均成功激活了水杨酸和茉莉酸抗病信号通路,主要通过参与水稻水杨酸信号通路赋予水稻抗性,该研究为利用Pita~2培育持久广谱抗性水稻提供了一定的理论基础.     

代谢组学及其在药用植物研究中的应用

指出了代谢组学是继基因组学和蛋白组学之后新兴的一门研究生物体内源代谢物的种类、数量及其在内外因素作用下变化规律的组学技术,是以组群指标分析为基础,以高通量检测和数据处理为手段,以信息建模与系统整合为目标的系统生物学的一个分支.近年来,随着代谢组学积累的数据和信息量的增大,其在药用植物学各个领域的应用价值也与日俱增.主要对代谢组学的产生、研究方法和技术及其在药用植物研究中的应用进行了阐述,以期为相关研究提供参考.     

激素和PEG对华重楼种子萌发的影响

为研究不同浓度的赤霉素(GA3)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和不同浓度的PEG4000、PEG6000、PEG8000和PEG10000对华重楼种子萌发的影响,采用培养皿培养法,用不同浓度的2种激素和4种PEG浸种处理,观察记录了种子萌发率和萌发开始时间(胚根突破种皮所需的天数)、第120 d时胚根长3 cm的种子所占的比例,筛选了促进华重楼种子萌发的最适浸种试剂和浓度.结果表明:500 mg/L GA3,0.5 mg/L 2,4-D,25%(质量比)PEG4000和25%PEG8000浸种能有效打破华重楼种子休眠并促进种子萌发,其中500 mg/L GA3效果最佳.这是国内首次关于华重楼种子萌发条件的全面研究报道.     

具有抗农作物病原真菌活性链霉菌Ⅰβ1菌株的筛选鉴定及其聚酮合酶基因分析

从土壤中筛选出一株具有抗农作物病原真菌活性链霉菌,命名为Ⅰβ1.根据生理生化特性对其进行了鉴定及16S rRNA基因序列同源性比对,分析了该菌株的发酵滤液抑菌稳定性和聚酮合酶基因.结果表明:该菌株初步鉴定为链霉菌属,Ⅰβ1菌株发酵滤液在温度为-20~55℃,紫外线照射10~30 min,pH为1.0~9.0条件下均较稳定,聚酮合酶基因在其系统分类上与Streptomyces noursei ATCC 11455制霉菌素生物合成基因簇的聚酮合酶基因分枝较近.