茉莉酸甲酯对杂交鹅掌楸体胚发育的影响

【目的】探讨作为植物生长调节剂的茉莉酸甲酯(MeJA)对杂交鹅掌楸体胚发育的影响,为进一步提高杂交鹅掌楸体胚发生效率奠定基础。【方法】在已建立的杂交鹅掌楸未成熟胚体细胞发生体系的基础上,选用杂交鹅掌楸3种基因型C138、233012、253010为材料,分别添加5种浓度的茉莉酸甲酯,测定杂交鹅掌楸在添加不同浓度茉莉酸甲酯条件下的体胚发生率、成熟率、畸形胚发生率,以及再生植株率。【结果】在体胚诱导培养基中添加不同浓度的MeJA可以显著影响杂交鹅掌楸体胚发生效率,且随着MeJA浓度的增加,体胚发生率和成熟率逐渐升高,畸形胚发生率逐渐降低,而当MeJA浓度超过一定值后,体胚发生率和成熟率呈现下降趋势,畸形胚发生率也逐渐升高。杂交鹅掌楸3种基因型体胚发生率和成熟率从高到低的次序为233012、C138、253010。脱落酸(ABA)能够增强MeJA的上述效应。在体胚苗的生长阶段,浓度逐渐升高的MeJA限制了根的生长,但ABA不能改变该效应。【结论】添加1 μmol/L MeJA和2 mg/L ABA时杂交鹅掌楸体胚诱导效果最佳,此时体胚发生率和体胚成熟率相对较高,体胚畸形率最低。     

迎接21世纪现代林木生物技术育种的挑战

林木组织培养及其工厂化育苗技术,细菌工程种苗工厂化生产新技术,林木体细胞胚胎发生、植株再生和人工程子技术,林木原生质体培养和细菌杂交,体细胞突变体的筛选与利用和林木基因工程育种等是林业面向２１世纪的新型产业关键技术。２１世纪我国林业生物技术育种,要充分重视拥有自主知识产权的林木基因和基因工程品种培育,同时林木基因工程应从单基因生物抗性转向持久抗性,生物抗体转向非生物因子抗性;要重视优良基因型的体细胞胚胎发生工程的实用化和自动化研究,常规育种技术与现代生物技术有机结合,林木转基因植株的环境安全性评估问题也应予以重视。     

杉木两水平双列杂交亲本配合力分析

对两套杉木亲本在种源和个体两水平的双列杂交试验进行了遗传分析,其中试验Ａ选取的亲本材料主要来自于杉木的中心产区,主要生长性状经过了一般配合力测定,具有较高的遗传改良水平;试验Ｂ选取的亲本材料大部分来自于杉木的边缘产区,遗传改良程度较低。配合力分析结果表明：杉中源间杂交组合生长量存在显著的遗传差异,主要受一般配合力效应的影响;在个体水平上,试验Ａ中一般配合力方差小于特殊配合力方差,试验Ｂ中则相反因此     

枫香种子成熟期的研究

从枫香果实的含水量、粗脂肪含量、果实比重等方面来探讨枫香种子成熟的指标与成熟期。结果表明：种子粗脂肪含量可作为机香种子成熟的精确指标；枫香果实的含水量可预测枫香种子成熟期；果实比重及颜色的改变不能作为枫香种子成熟的精确指标；南京地区枫香种子于１０月上旬成熟。     

柳杉优良无性系离体培养再生体系研究

以柳杉当年生茎段为外植体,采用正交试验设计,用离体培养的方法,对6个柳杉不同无性系进行芽增殖及3个无性系进行生根诱导,建立了柳杉组培快繁体系。结果表明:1在DCR添加6-BA、NAA不同组合的培养基上,6个柳杉无性系均能诱导出不定芽,但不同无性系芽增殖的能力有差异,其中精1#无性系芽增殖系数最高,达到了5.00。2在柳杉无性系离体生根的诱导过程中,1/2DCR培养基是适宜的基本培养基,并且所试验的3个无性系均在添加0.10 mg/L IBA和0.20 mg/L NAA时生根率最高,可达93.3%。     

杉木合子胚愈伤组织的诱导及植株再生

以杉木成熟及未成熟合子胚为外植体，研究了基本培养基、植物激素、合子胚的发育阶段等因素对杉木愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明：1／2MS＋2mg／L 2，4-D＋1．0mg／L 6-BA＋1．0mg／L KT＋30g／L蔗糖是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基；处于胚胎选择阶段或者组织与器官分化阶段的幼胚，能诱导出松软、晶莹透明的愈伤组织，诱导频率为2％～6％。成熟阶段的幼胚诱导出的愈伤组织的外观形态与成熟合子胚诱导出的愈伤组织相似，愈伤组织的诱导频率随着合子胚发育的成熟而迅速提高；DCR＋1．5mg／L 6-BA＋1．5mg／L KT＋20g／L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基。高约1．5cm的不定芽转入生根培养基，生根率可达100%。     

植物体细胞胚胎发生机理的研究进展

介绍了植物体细胞胚胎发生技术的产生历史及国内外的研究进展;从细胞学、生物化学和分子生物学等方面综述了体细胞胚胎发生机理的研究现状;分析了体胚再生植株的遗传稳定性以及体胚系统作为遗传转化系统的重要应用价值和最新研究成果;同时对植物体胚发生研究中试验设计的重要性作了述评。     

泸定百合根尖染色体C-带分析

利用Giemsa C-带方法对泸定百合(Lilium sargentiae Wilson)进行了研究.结果表明:泸定百合的染色体数目为2n=24,每条染色体都显示出了可以明显区别的特征带;强带主要集中在染色体的着丝粒区域,在长短臂上也显示出可以相互识别的深浅不一的带纹.通过Giemsa C-带方法可以将泸定百合的每条染色体区分开.     

一种DNA侧翼序列分离技术--TAIL-PCR

在分子生物学研究中，基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列，热不对称交错PCR(简称TAIL—PCR)反应技术能够较好地解决上述难题。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环，利用不同的退火温度选择性地扩增目标片段，所获得的片段可以直接用做探针标记和测序模板。TAIL—PCR技术简单易行，反应高效灵敏，产物的特异性高，重复性好，能够在较短的时间内获得目标片段，已经成为分子生物学研究中的一种实用技术。笔综述了TAIL-PCR反应的原理、引物设计、反应条件设置及产物分析。     

中国栗属特有种保守RAPD片段分析

利用RAPDDNA分子标记技术研究了栗属特有种(板栗、茅栗和锥栗)特异保守片段。结果表明，从520多个随机引物中筛选出有扩增产物，且多态性丰富的10个引物，其中引物B08(GTCCACACGG)分别在所有供试的板栗、茅栗和锥栗中均扩增出各自特异的DNA片段，其片段大小分别为2050，900和1500bp。这些DNA片段在种水平上的高度保守性，可以用来区分这3个种。此次研究结果同时也说明RAPD标记是鉴别近缘种的理想工具。