用化学发光法研究谷胱甘肽对羟自由基氧化鸟嘌呤的保护作用

利用鸟嘌呤-过氧化氢-钴（Ⅱ）化学发光体系，结合流动注射技术研究了生物活性物质谷胱甘肽（GSH）对羟自由基氧化鸟嘌呤的保护作用．实验结果表明，GSH明显抑制鸟嘌呤的化学发光，且抑制率与GSH浓度成量效关系，达到50％抑制率的GSH浓度为6．5mg／L．该方法为进一步研究DNA的抗氧化损伤机制提供了有效的研究手段．     

肺宁对小鼠博莱霉素肺纤维化药理作用研究

观察中药肺宁对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的治疗作用,以博菜霉素气管内注入建立肺纤维化模型,次日始分别给予中药肺宁和强的松灌胃治疗,于给药后三个月处死动物,右肺组织行病理组织学检查,左肺组织匀浆进行丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量检测。结果与模型组相比,肺宁各剂量组、强的松组的MOA、TNF-α含量显著降低(P<0.05);肺宁高、中剂量组的GSH含量显著升高(P<0.05)。各治疗组相比,肺宁高剂量组TNF-α含量低于肺宁低剂量组(P<0.05);肺宁高剂量组GSH含量高于肺宁中、低剂量组(P<0.05);肺宁中剂量组GSH含量高于肺宁低剂量组(P<0.05)。证明肺宁可使肺损伤大鼠肺组织匀浆中TNF-α水平下调,减轻脂质过氧化反应,清除自由基抑制自由基生成,并削弱炎症反应干扰肺纤维化进程。     

啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）M－05变株合成谷胱甘肽的研究Ⅰ．菌种的选育

从１２种５５株酵母菌株中筛选出１株相对富含谷胱甘肽（ＧＳＨ）的菌株──啤酒酵母Ｓ─１２，经紫外线及硫酸二乙酯等复合诱变处理，以甲硫氨酸缺陷型（Ｍｅｔ－）为筛选模型，获得１株高产谷胱甘肽变株Ｍ—０５，其干细胞每ｇ含有ＧＳＨ１４．４３ｍｇ，较出发菌株提高了６８．４％．     

锌离子增强荧光光谱法测定谷胱甘肽

探讨了金属离子对还原型谷胱甘肽(GSH)-邻苯二甲醛(OPA)体系荧光信号的影响,实验结果表明Zn2+对体系的荧光信号有增强作用,而且Zn2+能够提高GSH-OPA体系的稳定性,据此建立了一种以Zn2+作为荧光增强剂,快速简便测定还原型谷胱甘肽的新方法.GSH在1.3×10-8～1.4×10-6mol/L的范围内其浓度与体系相对荧光强度有良好的线性关系,检出限为1.1×10-8mol/L.本实验方法比较适合生物样品中还原型谷胱甘肽浓度的测定.     

舞毒蛾谷胱甘肽S-转移酶的结构预测及其与杨树次生物质的分子对接分析

【目的】明确舞毒蛾(Lymantria dispar)谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST)与杨树主要次生物质的结合能力和结合方式,为解析GST介导的舞毒蛾对杨树次生物质适应性机制提供理论基础,并通过GST分子模拟筛选结合能力强的次生物质,为舞毒蛾的科学防治提供新的策略。【方法】基于Swiss-model算法,经序列多重比对后,以氨基酸序列一致性大于30%的GST蛋白作为建模模板,对10条舞毒蛾GST蛋白进行同源建模,成功构建其三维结构。随后,利用SAVES软件对已构建的GST蛋白三维结构进行评估。从Pubchem网站获得6种杨树次生物质的3D结构并运用Discovery Studio 2019软件对10种GST模型和6种杨树次生物质进行分子对接,通过结合能和可视化分析其对接情况。【结果】10种舞毒蛾GST蛋白同源建模所得模型均满足拉氏构象图中氨基酸位于最佳合理区和允许区域的数量大于90%的条件;三维结构与一级结构的兼容性评分大于0.2的氨基酸数量大于80%;所得ERRAT值为91.73%~97.82%,可知10种GST模型评估合格。分子对接结果表明,GST与杨树次生物质分子间均含有氢键及共价键。其中:与水杨苷结合最优蛋白为LdGSTs2,结合能为-45.70 kJ/mol;与咖啡酸结合最优蛋白为LdGSTz2,结合能为-43.96 kJ/mol;与邻苯二酚和芦丁结合最优蛋白为LdGSTz1,结合能分别为-25.86和-95.46 kJ/mol;与黄酮结合最优蛋白为LdGSTe2,结合能为-32.49 kJ/mol;与槲皮素结合最优蛋白为LdGSTo2,结合能为-62.09 kJ/mol。【结论】舞毒蛾GST与杨树次生物质结合能均≤-5 kJ/mol均含有氢键和共价键,同种杨树次生物质与不同GSTs的结合能相似,表明舞毒蛾GST与杨树次生物质之间具有较好的亲和力并且分子间结合稳定;GST对次生物质特异性不高,但同种GST与不同的杨树次生物质的亲和力强弱存在差异。研究结果可为添加次生物质以降低杀虫剂抗药性提供理论依据。     

谷胱甘肽研究(开发)

谷胱甘肽(以下简称GSH)的化学名称为Y-L-谷氨酰-L 甘氨酸,1921年由Hopkins首先发现,GSH在自然界主要存在于动、植物体内,1930年GSH的化学结构得到确定,接着J.Rudinger等先后合成谷胱甘肽(1).谷胱甘肽是一种重要的生物活性三肽,具有多种生物功能,有清除自由基、解毒、延缓衰老和解除疲劳等作用.因此,谷胱甘肽的研究开发越来越被人们重视.     

脉冲电场和磁场对小鼠肝组织GSH2px活性及MDA含量的影响

用不同脉冲电场和磁场上升沿的平均变化率,分别作用于小鼠,每天平均4h,15d后检测小鼠肝脏组织中的丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化酶(GSH2px)活性.脉冲电场和磁场暴露的小鼠,肝组织中MDA含量较对照组明显减少(P<0.01),GSH2px活性明显增加(P<0.01).随着脉冲电场和磁场平均变化率的增大,实验组小鼠肝组织中MDA含量及GSH2px活性变化更加明显,提示一定强度的脉冲电场和磁场可以影响小鼠肝组织的脂质过氧化代谢,提高抗氧化酶的活力,降低氧化物的生成,对延缓衰老有积极作用.     

叶黄素改善老龄大鼠抗氧化功能的研究

用D-半乳糖注射Wister雄性大鼠5个月,建立衰老模型.对模型组、药物组血清MDA含量、肝脏匀浆MDA含量和血液SOD、GSH-Px酶活性进行测定及比较.实验结果表明药物组血清MDA含量和肝脏匀浆MDA含量均比模型组有显著降低(P<0.01),而血液SOD、GSH-Px酶活性比模型组有显著升高(P<0.01).因此摄入适量叶黄素可以有效地增强大鼠机体抗氧化能力,从而延缓D-半乳糖诱发的大鼠衰老.     

一种基于酵母3',5'-二磷酸核苷酸酶的蛋白亲和层析纯化体系

<正>蛋白质是生命活动的主要承担者。蛋白质的结构和功能的研究在后基因组时代尤为重要。为深入分析蛋白质的结构和功能,研究者们需要分离纯化大量不同的蛋白质。亲和层析具有高选择性、高活性回收率和高纯度等特点已成为纯化蛋白质等生物大分子最有效的技术之一。目前,常用的亲和层析标签有多聚组氨酸、谷胱甘肽转硫酶、麦芽糖结合蛋白等,但不同的标签各有其优缺点。例如:研究发现如果表达的蛋白表面有几个接近的组氨酸,此蛋白可能结合Ni-NTA介质,最终和目的蛋白一同洗脱下