High expression of human serum albumin in milk of transgenic mice directed by the goat β-casein gene promoter region

We have constructed a mammary gland expression vector that contained the goat β-casein gene promoter, 5′upstream regulatory region, exons 1,2, intron 1 as well as the human serum albumin (hALB) mini-gene (including the full-long sequences of hALB cDNA and its intron 1). Injection of the vector into mouse tail veins showed that the recombinant construct was expressed only in mammary glands. The vector was microinjected into the mouse fertilized eggs, followed by transferring the eggs into the foster mice. 33 F₀ mice were obtained. Of the 33, 8 mice (5♀, 3 ♂) were transgenic with hALB gene integration identified by PCR as well as Southern blot hybridization. The integration rate was 24.2% (8/33). Western blot analysis showed that 3 female transgenic mice had hALB expression in their milk. The hALB contents in milk reached 3.54, 0.21 and 3.03 g/L, respectively.     

真空冷冻干燥的羊乳及其分离产物的差示扫描量热法分析

为研究羊乳经冷冻干燥后的差示扫描量热法特征,指导羊乳生产加工。利用离心分离、等电点沉降过滤等方法分离生羊乳,得到各分离产物如:脱脂羊乳、乳脂、乳清、乳酪,经真空冷冻干燥48h后为粉状,用差示扫描量热(differential scanning calorimetry,DSC)仪对各冻干样品进行扫描,得到DSC热相图,并进行分析。结果表明,在羊乳及各分离产物的DSC热相图中,存在2个与脂肪熔融相关的吸热峰,1个与蛋白质熔融变性相关的吸热峰,1个与乳糖熔融产生的复杂放热峰,1个由乳糖引起的玻璃态转化温度T′_g,1个由酪蛋白引起的玻璃态转化温度T″_g,这些转化都不是单独出现的,无法在某单一组分中观察到所有热转化,这是由于不同成分之间存在着相互作用而产生的掩蔽、叠加、延迟等现象导致的。全脂乳粉分离为乳脂和脱脂乳粉后,乳糖的玻璃态转化温度、脂肪的吸热融化等指标发生了变化；脱脂乳粉分离为乳清和乳酪后,玻璃态转化温度、蛋白质变性吸热等指标发生了变化。DSC可作为一种研究评价冷冻干燥处理的羊乳粉物理性质以及鉴别乳组分、乳脂晶型和含量、乳蛋白种类、是否脱脂的工具。结果可为阐释冻干羊乳粉制品的独特特性、功能性和商业价值的开发提供理论支撑。     

羊乳制品中牛乳源成分的鉴别检测技术

羊乳含有丰富的蛋白质、脂肪和矿物质,与其他乳相比营养组成最接近母乳。羊乳中的脂肪球小,乳糖含量低,并含有丰富的腺苷三磷酸促进乳糖的分解,更适于具有乳糖不耐受症的亚洲成年人和婴幼儿饮用。国内外对羊乳及羊乳粉的需求不断增长。然而由于羊乳产量过低,价格高,不法商家在羊乳及羊乳制品中容易掺入一些价格低廉、方便易得的牛乳及牛乳源成分不时有报道。为了保护消费者权益和健康,规范市场,避免进出口贸易损失,鉴定纯正的羊乳及制品,检测其中的掺假牛乳源成分十分迫切。从免疫学法、色谱法、电泳法、基因检测法等方面综述了目前羊乳及羊乳制品中牛乳源成分鉴别和检测技术。     

山羊与岩羊间特异RAPD片段分析

在两组40个随机引物中，筛选出16个重复性好的多态引物，对山羊与岩羊闻RAPD片段分析表明，16个引物扩增出67条带，其中54条带表现多态，多态率80．60％，山羊各群体共有条带为23条，山羊和岩羊共有条带为13条，岩羊有4条特异带，不同引物所扩增出的片段在各群体中分布频率不同．岩羊特异RAPD片段，OPA-10724的序列与人类全基因组比较，同源的短序列较多，最太长度为86bp，唯有30bp的长度与绵羊ZFZ基因和牛ZFY基因内含子同源。     

微生物发酵剂对四川风羊腿产品特性的影响

在四川传统风羊腿加工中添加直投式微生物发酵剂,通过对风羊腿总氮、非蛋白氮、游离氨基酸和风味物含量等指标的测定,研究了微生物发酵剂对产品特性的影响.结果显示:与未添加微生物发酵剂的产品比较,总氮量和非蛋白氮量未见显著性差异;游离氨基酸量差异极为显著,未添加微生物发酵剂的产品增加4.9倍,添加微生物发酵剂的增加了8.2倍;风味物检测,添加微生物发酵剂后,风羊腿的风味物种类达到41种,而未添加组仅为25种;微生物发酵剂显然有利于游离氨基酸的降解和风味物的形成.     

通过差减文库筛选山羊羔肠道淋巴集结特异表达基因

羊羔肠道淋巴集合淋巴结（Peyer's patch，以下简称PP），是B淋巴细胞的主要来源地和发育、成熟场所，兼具中枢淋巴器官和周围淋巴器官的功能.采用抑制性差减杂交（suppression subtractive hybridization，SSH）方法，构建山羊羔肠道淋巴集结与其非PP肠壁组织的差减 cDNA 文库，以期找到在山羊羔肠道淋巴集结中特异表达的与免疫相关的基因. 分别从山羊羔PP与非PP肠壁组织提取总RNA，反转录成cDNA，以PP作为待检组织(tester)，非PP肠壁作为驱动组织(driver)，经过两轮杂交和抑制性PCR扩增，产物与T载体连接，经蓝白斑筛选，提取质粒,经EcoRI酶切鉴定插入片段并测序,由此构建了两种组织间差异表达基因的差减cDNA文库. 对其中160个克隆测序，得到几个可能与免疫相关的基因，为进一步从中挑选和表达活性蛋白基因用于生产免疫增强剂奠定了基础.     

山羊FGF5基因cDNA分子克隆及序列分析

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,首次从山羊脑组织总RNA中扩增出成纤维细胞生长因子5(FGF 5)基因的cDNA编码序列.通过对序列的分析表明,克隆的山羊FGF 5cDNA编码序列与其他动物的序列具有高度的同源性.与G enbank中人和小鼠序列比较,山羊与人和小鼠的FGF 5核苷酸序列的同源性分别为91%和87%.编码的氨基酸序列比较,山羊和人的相似性为87%,山羊与小鼠的相似性为83%.如FGF s家族的其他成员一样,山羊的FGF 5蛋白也有一信号肽序列.山羊FGF 5基因外显子在编码氨基酸时,对同义密码子的使用表现有强烈的偏好性.不同物种对同义密码子使用的偏倚程度与偏好类型各不相同,也具有种属特异性.山羊FGF 5基因所编码的蛋白质中,20种氨基酸的含量差异很大,极性氨基酸含量高于非极性氨基酸含量.     

高原型藏山羊春季补饲试验

在西藏那曲地区选择了初始体重为11.64±0.73kg的周岁龄高原型藏山羊公羊,研究春季补饲精料对增重、采食量和经济效益的影响,试验采用单因子试验设计分为四个处理:三个补饲组(放牧 补饲)和一个对照组(全放牧),每个处理12个重复.结果表明,三个补饲组日增重分别为47、45和45g/d,极显著高于对照组(-2g/d/头)(P<0.01),补饲组间差异不显著(P>0.05);三个补饲组采食量分别为134g/d、108g/d和131g/d,组间差异不显著(P>0.05);补饲组可以获得12.38～14.80元/头的收益.在青藏高原高寒草地,春季牧草青黄不接、自然放牧藏山羊普遍掉膘的情况下,通过补饲精料不但可以提高增重、缩短饲养周期、减少载畜量、获得良好的经济效益,而且可以减轻草场的压力,有利于青藏高原生态安全屏障的建设.     

不同血清对山羊成纤维细胞传代的影响

考察不同血清对山羊成纤维细胞传代培养的影响．第6～8代细胞分别在添加10％Hyclone和10％四季青胎牛血清的DMEM中传代培养，实验发现，前者平均增殖倍数和群体倍增次数均高于后者．随着传代次数的增多，细胞在四季青血清培养液中的生长行为发生明显变化，细胞不能倍增且生长曲线呈不规则波动状．结果表明，细胞传代过程中使用不同血清会改变细胞生物学特性，降低细胞活力．用这种方式传代的细胞不宜用作核移植供体细胞及其他实验研究．     

湘西州“种草养羊”富民工程暨肉羊产业发展模式（Ⅰ）——基础、优势及问题

湘西土家族苗族自治州“种草养羊”富民工程暨肉羊产业发展不仅已具有较好的群众思想基础和领导组织基础，而且也已具备一定的市场、技术和产业基础；发展“种草养羊”肉羊产业，湘西州不仅具有资源与政策优势，还具有市场、区位和环境优势，然而，制约湘西州肉羊产业发展的因素也是不容忽视的.