"两步法"体外培养山羊卵母细胞的初步研究

体外成熟培养的卵母细胞经本外受精后，囊胚发育率远低于体内成熟卵母细胞，原因之一是由于体外成熟卵母细胞的不充分获能造成的，有假说认为：卵母细胞在体外培养过程中，如果延长GV期，可促进卵母细胞进一步获能，从而提高发育潜能。本文以山羊卵子为研究对象，探讨了山羊卵泡各种成分以及异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制以及抑制解除后减数分裂的影响，结果显示，山羊50％Q卵泡液、100％卵泡液、半卵泡、打孔整体卵泡以及完整卵泡对山羊卵母细胞的核成熟抑制率分别为：0.00%、9.38%、60.47％、78.26%和70.09%，随后，对经山羊半卵泡、打孔整体卵泡、完整卵泡抑制培养后的卵子进行恢复培养发现，卵子核成熟率分别为：64.29%、3.49%和4.13%，山卵母细胞与半卵泡共培养24h后进行0h、12h、20h、24h和30h的恢复培养，核成率分别为：0.00%、20.00%、61.90%、64.29%和43.75%，表明山羊半卵泡可以有效抑制山羊卵母细胞使之处于GV期，并且这种抑制作用可以恢复，恢复培养时间以20h和24h较为适宜，初步研究异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制的影响发现，50％牛卵泡液、1005牛卵泡液、50％绵羊卵泡液、100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制率分别为3.7%、21.88%、10.00%、58.82%，表明，100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制效果较好。     

应用波尔山羊提高成都麻羊产肉性能研究

通过波尔山羊与成都麻羊二元杂交试验，含波血75％、50％和25％的杂种羊，均比成都麻羊的产肉性能有明显的提高。在不同生长发育阶段,含波血75％和50％的杂种羊体尺和体重均极显著大于成都麻羊（P＜0．01）；含波血25％的杂种羊体尺和体重也多极显著大于成都麻羊（P＜0．01）。含波血75％，50％和25％的杂种羊，24月龄公羊体重比成都麻羊相应重30．9kg、25．6kg和3．6kg，分别提高78．6％、65．1％和9．2％，差异极显著（P＜0．01），母羊比成都麻羊相应重21．7kg 17.3kg和4．5kg，分别提高66．6％53．1％和13．8％，差异极显著（P＜0．01）。含波血75％，50％和25％的杂种羊的日增重，在哺乳期公羊比成都麻羊相应重67．4g、66．7g和15g，分别提高59．5％、58．9％和13．2％，母羊比成都麻羊相应重41．7g、50．0g和11．2g，分别提高38．5％、46．2％和10．3％。杂种羊日增重在4月龄内都还明显高于成都麻羊， 特别是含波血75％和50％的杂种羊更为突出，保持高速增重时间长，在周岁内日增重公羊是成都麻羊的2．8倍和3．0倍，母羊相应为2．1倍和2．3倍。杂种羊的繁殖性能与成都麻羊比较差异不大。含波血75％，50％和25％的杂种羊的产肉性能与成都麻羊比较提高非常明显，6月龄羯羊的胴体重分别比成都麻羊重5．9kg、5．0kg和2．5kg，屠宰率相应高8．4、6．4和3．8个百分点，净肉率分别高7．9、6．7和4．0个百分点，差异均极显著（P＜0．01）。     

藏山羊遗传资源研究及其利用

随着中国西部的开发，藏山羊遗传资源研究和开发利用速度加快，在分析藏山羊遗传资源及其遗传特性的基础上，对藏山羊的利用及其保存作了系统全面的评论，作者认为对藏山羊应该进行选种选配，开展杂交改良，提高其生产性能．     

藏山羊生长发育及繁殖性能研究

在青藏高原测定高原型和山谷型藏山羊的生长发育和繁殖性能。高原型藏山羊初生重为１．５３±０，１ｋｇ、母羔为１．４１±０．１ｋｇ，２月龄断奶体重公羔为８．８４±１．４１ｋｇ母羔为８．７１±２．１２ｋｇ，周岁公羊为１２．２０±３．２０ｋｇ，母羊为１０．４０±３．１２ｋｇ，成年公羊为２４．０±６．９ｋｇ，母羊为２１．６±３．８２ｋｇ；山谷型藏山羊相应为１．６４±０．３０ｋｇ，１．５６±０．３０ｋｇ，６．４９±１．２７ｋｇ，６．３３±１．１２ｋｇ，１５．５２±２．７６ｋｇ，１４．８６±３．１３ｋｇ，２７．６０±７．７８ｋｇ，２３．２３±４．１８ｋｇ．藏山羊体格较小，高原型大于山谷型。藏山羊的繁殖规律受分布地区气候的影响。在高寒地区高原型藏山羊母羊８～１０月龄出现性行为，初配年龄１８月龄。在气候温暖地区山谷型藏山羊４～６月龄出现性行为，初配年龄８～９月龄。高原型藏山羊发情周期为１４～２０天，发情持续期为１～３天，妊娠期１４５～１５９天，产羔率为８５．６１％，繁殖成活率５４．２４％；山谷型藏山羊相应为１５～２３天、２～４天、１３６～１５７天、１３５．５３％、和１１８．４２％。     

伊维菌素对圈养黑山羊线虫及体外寄生虫的驱虫试验

间隔7天,用0.25mg/kg伊维菌素两次给圈养黑山羊口服进行线虫及体外寄生虫驱治试验和安全性观察,认为该药具有疗效高,驱虫谱广,生产上使用安全和药价低廉等特点,适合大面积推广应用.     

美姑县巴普黑山羊血液生化指标测定

本文对凉山州美姑县巴普黑山羊血液中血磷、血钙、胆固醇等10项指标进行了测定。结果表明：母羊血液胆固醇含量显著高于公羊（P〈0．05）,其它9项指标公母羊差异不显著（P〉0．05）。血糖、血磷、血钙、血中氯化物、总胆固醇、GPT均高于国内外山羊测定值的变异范围。     

Cloned goats (Gapra hircus) from foetal fibroblast cell lines

Mammalian cloning has been one of the most active research topics in the world. Cloning within vitro culured foetal fibroblast cells, in comparison with embryonic cells, can be used not only to theoretically study the embryonic or cellular development and differentiation in mammals, but also to utilize the unlimited fibroblast cells to produce large numbers of clonings. The preliminary results are as follows: (i) The division and development of the cloned embryos with embryonic donor cells and goat foetal fibroblast donor cells were 55%, 77% and 35%, 31%, respectively. There is no significant statistical difference between them, (ii) These studies result in the birth of two cloned goats derived from two 30-day foetal fibroblast cell lines, which are the first cloned mammals from somatic cells in China. This project has established a technological data base for the furture research on adult mammalian somatic cloning and nucleocytoplasmic interactions in animal development, and a novel technique for the cloning of animals with a high-level expression of transgene(s).     

High expression of human serum albumin in milk of trans- genie mice directed by the goat p-casein gene promoter region

We have constructed a mammary gland expression vector that contained the goat β-casein gene pro-moter, 5'upstream regulatory region, exons 1, 2, intron 1 as well as the human serum albumin (hALB) mini-gene (including the full-long sequences of hALB cDNA and its intron 1). Injection of the vector into mouse tail veins showed that the recombinant construct was expressed only in mammary glands. The vector was microinjected into the mouse fertilized eggs, followed by transferring the eggs into the foster mice. 33 F0 mice were obtained. Of the 33, 8 mice (5 , 3 ) were transgenic with hALB gene integration identified by PCR as well as Southern blot hybridization. The integration rate was 24.2% (8/33). Western blot analysis showed that 3 female transgenic mice had hALB expression in their milk. The hALB contents in milk reached 3.54, 0.21 and 3.03 g/L, respectively.     

金堂黑山羊血液蛋白遗传多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）研究了金堂黑山羊血液运铁蛋白（Tf)、后白蛋白(Pa）及白蛋白(Alb)三个基因座的遗传多态性,并计算了金堂黑山羊与成都麻羊、湘东黑山羊等七个山羊群体的欧氏遗传距离。结果表明：金堂黑山羊群体中Tf和Pa两个基因座均表现出多态性、Alb基因座呈单态;Tf和Pa两个基因型分布均符合Hardy-weinberg定律;金堂黑山羊群体内的基因一致度高、基因多样度低、平均等位基因有效数少,是宝贵的山羊遗传资源。     

山羊KLF17基因克隆与组织表达

克隆山羊Krüppel样因子17基因(KLF17)的c DNA序列,并检测其组织表达水平,为KLF17基因的功能研究奠定基础.随机选取2~3周岁的健康简州大耳羊和藏山羊羯羊各4只,屠宰采集山羊不同组织样品(心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪),提取组织总RNA,利用RT-PCR法克隆山羊KLF17基因序列,进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(q PCR)法检测KLF17基因mRNA的表达水平.结果表明,克隆得到山羊KLF17基因c DNA序列1 450 bp,包含CDS区全长858 bp,5'UTR序列12 bp,5'UTR序列580 bp,编码285个氨基酸残基.其CDS区与牛、绵羊相比在5'端少99 bp,而在531位多出361 bp,这导致其编码区在858位提前终止.山羊蛋白序列较牛、绵羊少113个氨基酸残基.组织表达结果显示,KLF17基因在藏山羊肺中具有最高的表达水平,而在简州大耳羊皮下脂肪中具有最高的表达水平.两种山羊均在背最长肌中具有最低的KLF17表达量.这些结果表明KLF17可能在山羊脂质代谢过程中具有重要调控作用.