基因治疗及其研究进展

基因治疗作为一种新型的疾病治疗手段 ,正在广泛用于血友病、糖尿病、癌症、心血管病、爱滋病等多种疾病的治疗领域 .基因治疗的一般步骤包括 :目的基因的转移和目的基因的表达两个方面 .其中目的基因的导入和目的基因表达的精确调控是两个关键步骤 .新发展的还有反义疗法以及应用核酶进行基因治疗等 .本文就基因治疗的基本步骤、基因治疗的对象、方式及基因治疗的现状和前景作一个简单介绍     

核酸某些碱性三苯甲烷染料体系的RRS及其分析应用

在Tris缓冲溶液中,核酸能与某些碱性三苯甲烷染料如乙基紫（EthyI Violet,EV)、结晶紫（Crystal Violet,CV)和甲基紫（MehtyI Violet,MV）结合而使共振瑞利散射（RRS）急剧增强并产生新的RRS光谱。以鲱鱼精DNA（Herring Sperm DNA,hsDNA)为例考察了其相应的光谱特征、影响因素和适宜的反应条件,体系均在hsDNA浓度为0～2.0μg/mL时与散射强度呈直线关系,方法具有较高的灵敏度,其检出限（3σ）分别为4.7ng/mL（EV-hsDNA体系）,13.0ng/mL（CV-hsDNA）和12.2ng/mL（MV-hsDNA体系）。考察了某些共存物质的影响,并用于全成样品中核酸的测定,获得了满意的结果。     

CTAB法在提取植物病原物核酸中的应用

植物病原物核酸类型较多，提取植物病原物核酸的方法也多种多样．目前，用一种方法提取多种植物病原核酸的报导较少．文章介绍了一种广泛适用于植物病原核酸的提取方法——CTAB法，CTAB法提取植物病原物核酸可解决多种植物病原物复合侵染植物时核酸提取的问题．     

核酸染料的应用研究进展

核酸染色是核酸研究的重要组成部分,溴化乙锭(EB)是核酸研究中常用的染料,因其自身存在的缺点,目前研究者正不断推出新的核酸染料,以期能找到可完全取代EB用于常规核酸染色的新型染料.本文对EB及近年新推出的一些新型核酸染料的特点进行了总结,并比较了它们的优缺点,为研究中选用何种染料进行核酸染色提供参考.     

The hybridization between peptide nucleic acid containing azobenzene and DNA labeled nanoparticle on chip surfaces studied by atomic force microscopy

Peptide nucleic acid containing azobenzene （N-PNA） was covalently bound on chip surfaces. Complementary DNA probes labeled by gold nanoparticles hybridizated with PNA on chip surfaces, The hybridization was successfully detected with AFM by the microscopy mothed. The influences of the position and the cis-trans isomerization of azobenzene unit on hybridization were investigated with AFM.     

从椭圆酿酒酵母中提取核酸

采用正交设计试验等方法研究了从椭圆酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）中提取RNA的适宜条件为NaOH浓度1．5％,SDS浓度2％,NaCl浓度4％,抽提温度95℃,抽提时间2h。RNA粗品收率85．1％,纯度90．5％,可满足核苷酸的生产要求。     

亚精胺对小麦离体叶片衰老过程中核酸和核酸酶的影响

用亚精胺（Ｓｐｄ）,亚胺环己酮（ＣＨＭ）,５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）与钙离子（Ｃａ＾２＋）单独或配合处理小麦离体叶片表明,Ｓｐｄ对ＲＮＡ含量和ＲＮａｓｅ活性不存在转录水平的调节,而主要是通过“电荷效应”抑制ＲＮＡ含量降低,对ＲＮａｓｅ可能通过抑制其合成和由于“电荷效应”抑制其活性升高。     

散射/荧光比率法测定核酸

在pH 9.62的BR缓冲溶液中,阳离子染料吖啶橙(AO)与鱼精DNA(fsDNA)通过静电作用形成二元复合物,导致AO在激发波长272 nm处产生增强的散射光,而在发射波长534 nm处出现荧光猝火.利用共存的散射和荧光信号,提出了一种散射/荧光比率法.在激发波长为272 nm和发射波长为534 nm的条件下,其散射/荧光比值(I/F)和0.02～1.40 μg,/mL范围内的fsDNA溶液成一定的线性关系,据此测定核酸的含量,其检出限为5.7 ng/mL.此方法成功用于核酸合成样的测定,RSD为1.3%-2.0%.实验结果表明,比率法比单波长的散射法或荧光法灵敏度更高,线性范围更宽.     

应用Digoxigenin标记的cDNA探针检测香蕉束顶病毒

用非放射性的Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的１１－ｄＵＴＰ取代３２Ｐ标记的ｄＡＴＰ或ｄＣＴＰ，标记克隆的ＢＢＴＶｃＤＮＡ－１０．５ｋｂｃＤＮＡ，制备成探针．通过核酸斑点杂交对粗提取的ＢＢＴＶ，ＢＢＴＶ－ＤＮＡ，感染ＢＢＴＶ的香蕉植物的拟茎，球茎处的组织，新生叶片以及成熟后的叶片进行了检测．结果表明：ＢＢＴＶｃＤＮＡ－１ｃＤＮＡ探针特异性强，不与ＣＭＶ—ＲＮＡ、无毒香蕉组培苗提取的核酸发生杂交反应；仅与粗提ＢＢＴＶ、ＢＢＴＶ－ＤＮＡ、ＢＢＴＶ侵染的香蕉组织的核酸提取物发生杂交反应．此探针灵敏度高，可检出含有ＢＢＴＶｃＤＮＡ－１０．５ｋｂ的质粒ＤＮＡ的最小量为１０ｐｇ；测定感病香蕉植株的拟茎汁液的最高稀释度可达１∶１２８，相当于０．４ｍｇ病蕉组织中的病毒含量．测定同一病株不同部位的结果表明，ＢＢＴＶ在植物体内的分布不均匀，拟茎处组织中病毒含量最高，球茎处的组织以及新生叶片中的病毒含量次之，成熟后的叶片中的病毒含量最低