Improving the thermal stability of lactate oxidase by directed evolution

Lactate oxidase is used in biosensors to measure the concentration of lactate in the blood and other body fluids. Increasing the thermostability of lactate oxidase can significantly prolong the lifetime of these biosensors. We have previously obtained a variant of lactate oxidase from Aerococcus viridans with two mutations (E160G/V198I) that is significantly more thermostable than the wild-type enzyme. Here we have attempted to further improve the thermostability of E160G/V198I lactate oxidase using directed evolution. We made a mutant lactate oxidase gene library by applying error-prone PCR and DNA shuffling, and screened for thermostable mutant lactate oxidase using a plate-based assay. After three rounds of screening we obtained a thermostable mutant lactate oxidase, which has six mutations (E160G/V198I/G36S/T103S/A232S/F277Y). The half-life of this lactate oxidase at 70 °C was about 2 times that of E160G/V198I and about 36 times that of the wild-type enzyme. The amino acid mutation process suggests that the combined neutral mutations are important in protein evolution. Received 15 September 2006; received after revision 21 October 2006; accepted 2 November 2006     

关于2-群的注记

通过对2-群的研究，得到了一类2-群的结构，进而给出了一类无限2-群有无限的阿贝尔子群的例子．     

2,3-二溴甲基-5,6-二氰基吡嗪的合成新方法

以2,3-二甲基-5,6-二氰基吡嗪为原料,在AIBN的引发下,用NBS进行自由基溴化反应,合成了标题产物,其结构经熔点,MS,1HNMR,UV等予以确证,从而为该物质的合成探索了一条新途径.     

数列{N(u,v)=2uv+u+v}的若干性质

本文得出了数列{N（u,v)=2uv u v}的一些性质，并提出了关于素数的一个猜想。     

四苯基卟啉蒽醌化合物与钴(Ⅱ)配位反应动力学

用光度法研究了5-[p-(β-蒽醌酰亚胺)甲氧基]-10，15，20-对甲基四苯基卟啉(H2TPP)在DMF溶剂中与金属钴(Ⅱ)离子配位反应的动力学以及镉(Ⅱ)离子对该反应的催化作用，提出了反应机理，并研究了温度对反应动力学参数的影响，求得基元反应的活化参数△rHm^≠、△rSm^≠及平衡步的△rHm^θ、△rSm^θ．     

二氧化氯在炼油循环水中的杀菌除泥作用

采用强氧化剂二氧化氯对炼油循环水进行杀菌灭藻、除垢和减缓腐蚀现场试验研究 ,且对试验结果进行了分析 .结果表明 :稳定性二氧化氯可有效控制炼油循环水中微生物量 ,加药量约 1mg/L ,2 4h后杀菌率达 10 0 % ;同时减少粘泥在热交换设备上的形成 ,有效除去污垢 ,使缓蚀剂发挥作用 ,腐蚀速率明显减小 (小于 0 .1mm /a) ,循环水浊度小于 10mg/L ;加药量小于 1mg/L时其对有机磷水稳定剂的影响小 .     

DNA聚合酶链反应鉴测梨树火疫病

对细菌Ｅ．ａｍｙｌｏｖｏｒａ，Ｅ．ｈｅｒｂｉｃｏｌａ和Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅ的ＤＮＡ提纯，并通过聚合酶链反应，发现引物Ｂ＿５等可用以有效地鉴别Ｅ．ａｍｙｌｏｖｏｒａ．对Ｅ．ａｍｙｌｏｖｏｒａ细胞培养液直接稀释，加清洁剂处理后进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）．据引物Ｂ＿５测定，得到清晰而强烈的相同的ＤＮＡ分子电泳光带，可有效反应测定５００个细菌细胞；用引物Ｂ＿５和Ｂ＿６进一步测定细菌Ｅ．ａｍｙｌｏｖｏｒａ。Ｅ．ｈｅｒｂｉｃｏｌａ和Ｐ．ｓｙｒｉｎｇａｅ，从Ｅ．ｈｅｒｂｉｃｏｄａ反应获得一个电泳光谱，从Ｐ．ｓｙｒｉｎｇａｅ获得３个泳谱；用引物Ｂ＿５和Ｂ＿７与细菌Ｅ．ａｍｙｌｏｖｏｒａ和Ｐ．ｓｙｒｉｎｇａｅ反应，从Ｅ．Ｅ．ａｍｙｌｏｖｏｒａ得到两条相同光带，从Ｐ．ｓｙｒｉｎｇａｅ反应获得了相似的带谱分布。     

实时实现MPEG2运动估计的DSP处理系统

本文根据ＭＰＥＧ２的图像标准与要求，利用若干大规模集成电路芯片，设计了实时实现活动图像运动估计的ＤＳＰ处理系统板，通过序列图像的测试，证明其工作正常，性能可靠，完全符合ＭＰＥＧ２的技术规范，从而为我国近期实现ＭＰＥＧ２的编解码系统、乃至ＨＤＴＶ实验系统在硬件方面打下了良好的基础。     

Z_2对称奇点理论的一点推广

本文推广了Golubitsky和Langford关于Z_2对称奇点理论的工作,从中给出了Z_2余维数的计算公式。     

2,5-二甲氧基-4-吗啉基苯基重氮氯化锡复盐的合成

本文采用较为简便的合成手段,较好地合成了一种高速感光重氮型化合物--2,5-二甲氧基-4-码啉基苯基重氮氯化锡复盐,并经 IR 谱、′HNMR 谱,以及元素分析等检测,证实该产物的存在.产品紫外特征吸收峰艾λ_(max)=398. 2nm,热分解温度为158℃.