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51.
双链RNA技术在果树病毒研究中的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
含RNA基因组的植物病毒在复制时会产生双链RNA(dsRNA)。本文介绍了用CF-11纤维素粉提取dsRNA的步骤,并列举了dsRNA在果树病毒研究中的应用,其主要应用有:1)果树病毒病及病原鉴定;2)病毒分化株系的鉴定;3)以dsRNA为中介对病毒核酸序列进行测定;4)探针制备和cDNA克隆的获得;5)用于检测病毒卫星RNA和亚基因组RNA;6)侵染性测定和制备抗血清等方面的研究。 相似文献
52.
免疫鸡群感染新城疫强毒后排毒规律研究 总被引:1,自引:1,他引:0
将经过2次新城疫(ND)疫苗基础免疫的SPF鸡,随机分成5组,每组8只,在60日龄时分别用F48E8、Texas、Hert33、Lasota等新城疫强毒和弱毒经口腔接种(剂量为0.25mL),12h后采取泄殖腔棉试样品,利用ND强毒快速检测试剂盒进行排毒的动态监测,并在攻毒前期、中期、后期各试验组SPF鸡的HI效价。结果发现试验组鸡群中个体在第3天开始排毒,20d左右排毒结束,其间在6 ̄7d和11 相似文献
53.
免疫沉淀法分离纯化感染细胞中的甲肝病毒RNA 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究采用抗血清(多抗血清)沉淀甲肝病毒,并用盐酸胍酸性酚,氯仿一步法分离纯化病毒RNA.此方法能排除非病毒RNA的污染,操作简单,要求条件较低,RNA的纯度和完整性都较好 相似文献
54.
钟劲 《北京大学学报(自然科学版)》1998,34(4):549-553
有限稀释法筛选重组AcNPV病毒钟劲胡美浩1)(北京大学生命科学学院,北京,100871)关键词重组病毒;梯度稀释;筛选;测活中图分类号Q3320引言昆虫杆状病毒表达系统是一高效表达外源基因的表达系统。用于基因工程表达外源基因的AcNPV(autog... 相似文献
55.
植物病毒增殖的超循环理论与抗病毒植物基因工程 总被引:1,自引:1,他引:0
纪丰民 《内蒙古大学学报(自然科学版)》1998,29(4):503-509
考虑了两个典型的植物病毒TMV和PVY,从病毒基因组的复制,翻译和组装各个环节的反应方程出发得到了病毒增殖的动力学方程。这组方程是Eigin超循环理论在病毒RNA增殖系统中的应用和发展。 相似文献
56.
植物病毒增殖的数值研究与转基因植株的抗病毒机理 总被引:1,自引:0,他引:1
纪丰民 《内蒙古大学学报(自然科学版)》1998,29(5):632-636
通过计算机模拟病毒增殖过程并结合对基因组RNA高级结构的预测,对烟草花叶病毒增殖中的负链特异终止现象给解释。 相似文献
57.
采用半巢式PCR法检测 80例新疆维吾尔族宫颈癌及 3 4例正常宫颈组织中HPV16DNA ,采用免疫组化法检测p5 3蛋白 ,分析其与宫颈癌发生的相关性 ,探讨HPV16感染和p5 3蛋白表达在新疆维吾尔族妇女宫颈癌发生中的作用。结果显示 :HPV16检出率在宫颈癌中为 80 .0 % ,与对照组 8.8%相比 ,存在显著性差异 ( χ2 =4 9.88,P <0 .0 0 5 ) ;宫颈癌组织中p5 3蛋白表达阳性率为 6 2 .5 % ,也明显高于对照组 ,P <0 .0 0 5 ;p5 3蛋白表达与HPV16感染在统计学上无相关 ( χ2 =0 .0 ,P >0 .0 5 )。表明 :HPV16感染与新疆维吾尔族妇女宫颈癌发生密切相关 ;HPV16感染的宫颈癌组织中p5 3蛋白表达有升高趋势 相似文献
58.
His-猪生长激素融合基因在Bm-N细胞和蚕体内的表达与纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
用构建的带有His—Tag pgh融合基因的重组杆状病毒Bm—BacPAK6—pgh研究了Bm—BacPAK6—pgh在家蚕细胞(Bm—N)和蚕体内的表达,并对蚕体表达产物进行了纯化.SDS—PAGE电泳分析显示,重组病毒Bin—BacPAK6—pgh在Bin—N细胞、蚕体中得到了融合表达,Western blot分析表明,Bm—N细胞、蚕体中表达的融合蛋白与大肠杆菌表达的猪生长激素具有相同的抗原性.Bm-BacPAK6-pgh在Bin—N细胞内的表达始于24h,而蚕体中的表达始于72h,二者的表达峰分别在96h和120h.经40%饱和度硫酸铵盐析和Ni—NTA Agarose亲和柱二步纯化可获得SDS—PA(正电泳纯的具有抗原性的重组猪生长激素融合蛋白。 相似文献
59.
斜带石斑鱼神经坏死病毒基因组RNA1和RNA2序列测定及分析 总被引:2,自引:0,他引:2
根据GenBank数据库公布的鱼类神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)同源序列设计了7对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增出目的片断,将PCR产物测序和分析.斜带石斑鱼Epinephelus coioides神经坏死病毒(orange-spotted NNV,OGNNV)基因组由两个片断(RNA1和RNA2)组成,RNA1由3 103个核苷酸组成,含有一个开放阅读框,编码982个氨基酸;RNA2由1 433个核苷酸组成,含有一个开放阅读框,编码338个氨基酸.OGNNV基因组与新加坡GGNNV(greasy grouper NNV)的基因组有高度的相似性.分析病毒的RNA2序列发现:OGNNV与DGNNV(dragon grouper NNV)、RGNNV(redspotted NNV)和GGNNV的亲缘关系很近,并且具有相同的中和位点;分析病毒的RNA1序列,发现在OGNNV的RNA1序列中同样可以找到依赖RNA的RNA聚合酶的6个模序(motif).根据同源性比较和系统进化分析,OGNNV属于RGNNV血清型的成员. 相似文献
60.
马铃薯病毒一步法RT-PCR诊断研究 总被引:7,自引:0,他引:7
运用一步法RT-PCR对马铃薯和烟草中的马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒和马铃薯卷叶病毒进行了检测,实验表明:对酚-SDS方法提取的病毒核酸进行扩增,一步法RT-PCR检测到的扩增产物的灵敏度较两步法RT-PCR的高100倍左右.两种提取方法对比,用一步法RT-PCR进行扩增,检测到的PEG法扩增产物的灵敏度较酚-SDS法扩增产物的灵敏度高3倍.建立了快速、简便、灵敏度高、特异性强的马铃薯病毒一步法RT-PCR检测技术. 相似文献