染色体标本制备在骨髓MSCs核型鉴定中的研究

选取对数生长期人骨髓间充质干细胞，用秋水仙素阻断细胞分裂中期，控制秋水仙素的终浓度和作用时间、低渗时间及胰酶消化显带时间，比较染色体标本制备效果。结果显示，秋水仙素的终浓度0．2μg／ml和作用时间6h，低渗时间35min及胰酶消化时间20s时可制备适合的染色体标本，经核型鉴定为正常二倍体细胞。从而探索出骨髓间充质干细胞染色体制备的适合条件，为骨髓间充质干细胞的进一步研究提供了理论依据和实验基础。     

^111InCl3注射液骨髓显像剂在动物体内的初步应用

用＾１１１ＩｎＣｌ３注射液制剂在动物体内进行了热原，无菌，安全试验和骨髓显像试验，取得满意的结果。     

大鼠骨髓基质细胞培养的实验研究

目的探讨体外培养大鼠骨髓基质细胞的可行性,为细胞移植治疗疾病奠定基础.方法采用淋巴细胞分离液(1.077 g/L)离心分离MSCs.加入碱性成纤维生长因子(bFGF)进行培养,并用流式细胞仪进行荧光三标检测鉴定.结果分离后的MSCs在生长因子的作用下出现增殖性生长,经流式细胞仪检测显示CD90,CD106阳性,CD45阴性.结论可在体外培养出较大密度大鼠骨髓基质细胞.     

白介素24对单个核细胞bcl-2表达的影响

为探讨白细胞介素24(IL-24)对成人急性白血病骨髓单个核细胞(BMMNC)体外生长的影响,并初步研究其作用机制。随机选取急性白血病住院患者15例,均经FAB分型或免疫学分型确诊,其中确诊未治的成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者5例,成人急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者10例。取患者骨髓,分离单个核细胞并培养,将不同浓度IL-24作用于BMMNC。应用四氮唑蓝(MTT)比色还原法、AnnexinV-FITC染色流式细胞术及逆转录-聚合酶联反应(RTPCR),分别检测IL-24对急性白血病BMMNC体外细胞增殖与凋亡及bcl-2表达的影响。结果显示,IL-24对体外培养的白血病BMMNC有明显的生长抑制作用,且呈时间、剂量依赖性,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。IL-24浓度50 ng/mL作用急性白血病BMMNC,48 h后凋亡率为39.21%±5.79%,高于对照组(P0.01)。不同浓度IL-24处理白血病BMMNC,能够降低bcl-2 mRNA的表达。IL-24体外培养的成人急性白血病BMMNC,有明显的生长抑制、诱导凋亡作用。由此可知,IL-24可以下调bcl-2 mRNA表达,可能是IL-24抑制急性白血病BMMNC生长作用的重要机制。     

自体骨髓经皮注射移植治疗胫骨骨不连的临床效果观察

探讨应用自体骨髓经皮注射的移植方法治疗胫骨骨不连的疗效。选择1998—2013年胫骨骨不连患者23例,无菌条件下行髂骨穿刺,抽吸自体骨髓,X线透视下经皮注射移植到患部,并配合外固定等治疗。每个部位注射2次,每3周注射一次。术后平均随访10个月。23例患者中治愈21例,失败2例,转行取出内固定,植骨内固定后治愈,无感染及并发症发生。对胫骨骨不连患者,自体骨髓经皮注射移植是一种效果显著、简便易行的治疗方法。     

JAK2基因单倍型46/1对中国人群骨髓增殖性肿瘤易感性的影响

从91例骨髓增殖性肿瘤(MPNs)患者及1 028例健康志愿者(均为中国人)外周血中提取基因组DNA,应用等位基因特异性PCR(ASP)技术,检测作为蛋白质酪氨酸激酶JAK2单倍型46/1标签的rs12343867和rs10974944位点的基因型,并结合临床资料,应用SNPstats软件进行统计学分析.实验结果表明:MPNs患者JAK2单倍型46/1出现的几率明显高于健康志愿者(P0.000 1);MPNs患者的JAK2单倍型46/1更易在JAK2V617F突变阳性MPNs患者(n=70)中出现(P0.000 1);具有JAK2单倍型46/1的中国人群患MPNs的风险增加显著,该结果与测试欧美人群的结果一致.     

四种药物诱发小鼠的骨髓及外周血红细胞微核的研究

用秋水仙素、氨基甲酸乙酯、丝裂霉素C和苯连续4或5天腹腔注射小鼠,观察骨髓多染红细胞微核出现率均值相应为5.625‰、4‰、8‰、7.2‰,与对照组1.5‰比较,有高度显著性差异(P<0.01)。外周血成熟红细胞微核出现率均值应为0.85‰、1.25‰、5.5‰、0.42‰,与对照组0.215‰比较,也有高度显著性差异(P<0.01)。结果表明:利用人、哺乳动物外周血成熟红细胞胞浆中所出现的微核作为对辐射损伤、药物及食品中毒、环境污染等研究中的一项生物学指标,具有一定的实践意义。     

大鼠骨髓间质干细胞的培养和生物学特征

为探索大鼠骨髓间充质干细胞的最佳培养条件及表型,用大鼠股骨抽取骨髓,密度梯度离心分离骨髓间充质干细胞。通过测定生长曲线和克隆形成能力,比较不同培养条件、不同融合度传代及不同生长基质对MsC的影响。免疫组化双标法检测增殖MSC的表型。结果Matrigel包被培养器皿,含10％胎牛血清、10ng／mLEGF的α-MEM培养基,50％融合时消化传代,是MSC保持低分化状态、体外大量扩增的较佳条件。绝大部分MSC表达CD44,部分MSC表达c-kit,MSC几乎不表达CD34。说明以上培养条件是MSC保持低分化状态又大量增殖的较好培养条件,为MSC用于细胞移植和组织工程打下了良好基础。     

环磷酰胺诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核阳性率分析

对环磷酰胺（４０ｍｇ／ｋｇＢＷ）诱导昆明小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率进行了统计分析,结果表明：微核率均值雌性为３１．６８,标准差为９．４１;雄性为２８．３２,标准差为７．６７,阴性对照组微核率均值雌性为１．７８,标准差为０．５５;雄性为１．６８,标准差为０．４５,环磷酰胺组（４０ｍｇ／ｋｇＢＷ）微核率与阴性对照同性别微核率相比,均有极显著性差异（Ｐ〈０．０１）,经Ｆ检验,环磷胺组和阴性对照组每组雌,     

多孔CPC材料复合转染VEGF的骨髓间充质干细胞修复大鼠颅骨缺损的实验研究

为研究转染血管内皮生长因子(VEGF)基因的骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合多孔CPC构建的组织工程化骨对骨缺损的修复作用,用脂质体介导质粒pIRES2-EGFP/VEGF165转染大鼠BMSCs,与多孔CPC复合体外构建组织工程化骨,植入大鼠颅骨缺损模型,未转染VEGF165的组织工程化骨作对照。分别在4周、12周取材,以组织学组织形态学分析骨缺损修复情况.比较两组的骨形成差异。结果转染VEGF组骨缺损的修复效果明显好于未转染组。组织形态计量学分析显示,4周时,转染组材料内新生骨面积为31.9%,未转染组为19.7%。12周时,转染组材料内新生骨面积为75.9%,未转染组仅为49.7%。差异具有统计学意义(P<0.000 1)。转染组的骨形成速率明显快于未转染组,两者分别为分别为6.18±1.62μm/d和3.56±0.93μm/d。说明VEGF转染细胞组较对照组血供加强,骨缺损修复加速。