组胺对小脑皮层颗粒细胞电活动的影响

脑内组胺(histamine)作为神经递质或调质的概念已经确立.新近的神经解剖学研究揭示了下丘脑-小脑组胺能通路,这些组胺能纤维由下丘脑结节乳头核到达小脑皮层和小脑深部核团,其中以蚓部和绒球的颗粒细胞层密度最高;在小脑皮层神经元上也发现了组胺受体.但是,组胺对小脑神经元的生理学作用至今还未得到证实.由于颗粒细胞(granulecell,GrC)是小脑皮层中唯一中转苔状纤维传入信息的细胞,在小脑的功能活动中起重要作用,故我们在离体大鼠小脑脑薄片上,观察了组胺对GrC单位放电活动的影响,以探讨组胺能传入通路在小脑皮层感觉运动整合中的可能作用.     

卵泡分化排卵和黄体发生的分子基础

本文综述了近二十年来在雌性生殖研究领域中五个方面的研究进展。（1）原始卵泡的启动生长和分化：原始卵泡生长启动可能受卵巢内在因子,像生长因子的调控,而不是人所想象的FSH;启动生长的卵泡受生长因子,FSH,激活素,孤儿受体和其他卵巢旁分泌因子调控,并发展成“优势卵泡”;（2）优势卵泡和闭锁卵泡：FSH,激活素／抑制素,卵泡抑素和雌激素调节卵泡分化的趋向,它们的相互作用和平衡决定“优热卵泡”和“闭锁卵泡”的形成,其中雌激素在此起关键性作用;它一方面促进FSH对LH受体的诱导作用,增加GC上的LH受体数目;另一方面可促进GC芳香水酶的产生,使此卵泡进入良性循环,发展为优势卵泡;（3）两种细胞两种促性尕激素学说：在FSH和LH作用下,GC产生的孕酮可被膜细胞利用转化为雄激素;因此GC和TC相互作用是卵巢雌激素产生的前提;（4）排卵:GC主要产生tPA,而TC主要表达tPA的抑制因子PAI－1,在激素作用下,GC的tPA和TC的PAI－1相互作用,形成一个局部蛋白水解窗口,它对卵泡破裂起决定性作用;（5）黄体形成和萎缩：uPA和MMP／TIMP系统对黄体发生起重要作用;而tPA对黄体萎缩起关键作用。     

小鼠ZP2 mRNA在卵泡颗粒细胞层的表达

目的:明确小鼠透明带ZP2蛋白的细胞来源。方法:采用组织原位杂交技术检测小鼠卵泡中的ZP2mRNA的表达,通过灰度测量比较小鼠ZP2mRNA在小鼠不同阶段卵泡颗粒层细胞的表达。结果:小鼠ZP2RNA探针与小鼠各级卵泡都有杂交信号,而在卵泡的颗粒细胞也有明显信号,颗粒细胞层的信号强度随卵泡发育而不同,初级卵泡的颗粒细胞层信号最弱,腔囊卵泡的颗粒细胞层信号最强。结论:小鼠ZP2mRNA在小鼠卵泡颗粒细胞层也表达,而非卵母细胞特异产生。     

c-fos和CYP17对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞雄激素分泌过多的影响及机制

 为研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞中c-fos 及CYP17 基因表达的变化,探讨c-fos 及CYP17 基因对PCOS 卵巢颗粒细胞雄激素分泌的影响及可能的作用机制,对拟行IVF/ICSI-ET 的PCOS 患者及非PCOS 患者分为对照组(非PCOS 患者)和PCOS 组(PCOS 患者),两组患者的卵巢颗粒细胞进行体外培养48 h,利用放射免疫法检测细胞上清液中的雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)的水平;利用2-NBDG 标记葡萄糖检测颗粒细胞的葡萄糖摄取能力;采用免疫蛋白印迹(WesternBlot)法分别评估颗粒细胞中c-fos 及CYP17 基因的表达变化。结果发现,PCOS 组患者与对照组患者相比,颗粒细胞培养上清液中睾酮水平升高(P<0.05)、孕酮水平降低(P<0.05)、雌二醇水平无明显变化(P>0.05),且颗粒细胞对2-NBDG 标记葡萄糖摄取明显降低(P<0.05),提示PCOS 患者卵巢颗粒细胞雄激素分泌异常增高,并存在糖代谢异常。与对照组患者相比,PCOS组患者颗粒细胞CYP17 基因表达升高(P<0.05),c-fos 基因表达降低(P<0.05),提示颗粒细胞c-fos 基因异常低表达,可能降低了对CYP17 基因的抑制作用,使CYP17 高表达,可能是卵巢颗粒细胞雄激素分泌增加的原因之一。     

中华鳖卵泡免疫组织化学研究

应用六种特异性抗血清(抗EGF、NGF、TGFβ1、HCG、AFP、P53)对中华鳖卵巢内卵泡细胞进行免疫组织化学定位。结果发现：NGF免疫反应出现在颗粒细胞及卵泡鞘。AFP、EGF、HCG阳性细胞均在胚床中发现，TGFβ1在卵泡鞘中被发现，P53阳性细胞在早期卵泡细胞中发现。由此探讨各种因子与卵泡发育的功能关系以及各因子见的相互作用及调控蛋白的时序性表达对其影响。     

红腹锦鸡小脑皮层的显微和亚显微结构观察

为探讨红腹锦鸡小脑皮层形态结构特征,用光镜和透射电镜观察了红腹锦鸡的小脑皮层显微和亚显微结构.结果表明,红腹锦鸡小脑皮层可分分子层、Purkinje细胞层、颗粒层3层.分子层含少量小细胞,细胞大小在4.5～8.3μm;Purkinje细胞层细胞体呈梨状,底宽在17.8～25.6μm之间,高约为18～30μm,细胞中含有丰富的粗面内质网、游离核糖体、线粒体、高尔基体、溶酶体等;颗粒层的颗粒细胞细胞核大,细胞质少.有髓鞘神经纤维中轴突直径多在0.66～1.62μm之间,轴突或树突中含有线粒体等细胞器,也含有丰富的微管,髓鞘厚约为0.13μm.血-脑屏障的内皮细胞的细胞核呈扁平形,细胞质中多含有线粒体和少量吞饮小泡.     

短蛸血细胞的形态结构、类型、细胞化学特性及其吞噬活性研究

血细胞作为免疫防御的第一道防线，在软体动物的非特异性免疫系统中具有重要作用.为了揭示头足类动物血细胞的形态结构、生物学性质及其免疫学功能，实验利用活体染色、细胞化学和电镜技术等对短蛸血细胞的形态结构、类型、细胞化学性质及其弧菌吞噬活性进行了研究.研究结果显示：短蛸血细胞具有大透明细胞、小透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞4种类型.大透明细胞约占血细胞总数22.6%，平均直径为11.64±0.82?μm，胞质中没有或仅含有很少量的颗粒，细胞表面光滑无伪足伸出；小透明细胞约占血细胞总数的1.7%，平均直径为8.88±0.88?μm，胞质中仅含有少量颗粒，细胞核对台盼蓝呈阳性反应，核质比较大；小颗粒细胞约占血细胞总数的50.7%，平均直径为12.82±1.54?μm，胞质中具有许多大小较为均一的嗜碱性小颗粒，有些细胞内还含有小空泡，不为中性红所着色，疑为颗粒脱内容物所致，细胞表面有较短伪足伸出；大颗粒细胞约占血细胞总数的25.20%，平均直径为13.66±1.50?μm，胞质中具有大小不匀的许多嗜碱性颗粒，有些细胞内也含有不为中性红所着色的较大空泡，细胞表面有许多长伪足伸出.颗粒细胞中所含有的大量嗜碱性颗粒可能与蛋白质等分泌物的活跃合成有关.大颗粒细胞还具有全质分泌的特性，小透明细胞极可能是大颗粒细胞全质分泌后的一时性残余胞体.弧菌吞噬实验结果表明，两类透明细胞均没有弧菌吞噬活性，两类颗粒细胞均具有弧菌吞噬活性，暗示这两种颗粒细胞很可能是短蛸发挥细胞免疫功能的关键性细胞，不仅与某些物质的活跃合成与分泌有关，而且可能还直接参与了外来病原的吞噬及清除.研究结果为揭示短蛸血细胞在非特异性免疫防御中的作用奠定了基础，对于丰富软体动物免疫学也具有重要的科学价值.     

ZP2蛋白在小鼠卵巢颗粒细胞中的表达

目的:在蛋白质水平确定小鼠卵巢的颗粒细胞内是否表达透明带蛋白.方法:制作小鼠卵巢组织的冰冻切片,免疫荧光实验用抗ZP2抗体检测小鼠卵巢颗粒细胞中是否存在ZP2蛋白,荧光显微镜下对卵巢切片的荧光信号拍照,通过灰度分析评估小鼠卵巢的颗粒细胞中的荧光信号,检测小鼠卵巢颗粒细胞内的ZP2蛋白.结果:实验组卵巢切片颗粒细胞区抗透明带ZP2抗体标记的荧光信号灰度值(1. 88±0. 57)明显比对照组(1. 20±0. 11)强.结论:小鼠卵巢颗粒细胞也表达透明带ZP2蛋白.     

颗粒细胞存活或凋亡因子对卵泡生长与闭锁的调控

颗粒细胞的生存或凋亡在决定卵泡的发育的命运方面发挥着重要作用,它既可以提供促进卵泡生长、发育维持的因子,也可以产生促使卵泡凋亡的因子。在这篇文章中,我们将重点讨论存在于颗粒细胞中调控卵泡生长和闭锁的因子,包括胰岛素样生长因子、细胞因子、凋亡配体-受体系统、BCL2家族成员。     

基因芯片研究小檗碱对胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞基因表达的影响

应用基因芯片技术研究小檗碱对胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞基因表达谱的影响。方法采用胰岛素信号转导通路调节糖代谢的关键分子——PI-3K的特异性阻断剂沃漫青霉素作用于猪卵巢颗粒细胞,人工诱导胰岛素抵抗(IR)的细胞模型;同时应用小檗碱作用在细胞模型上,作用48h后提取细胞总RNA,应用猪全基因组单通道芯片对样本基因进行筛查,得出差异表达基因数据并进行分析。结果显示,中药小檗碱作用模型细胞后差异表达基因42个。差异表达基因主要涉及的功能有:物质代谢、炎症与免疫反应、信号转导等。由此可得出结论:小檗碱可通过多种途径在基因水平上对胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞起作用。