脊椎动物胸腺巨噬细胞和肌样细胞的研究进展

从细胞的分布、显微形态和超微结构、细胞化学和免疫细胞化学、细胞的起源及生物功能等方面对脊椎动物胸腺巨噬细胞和肌样细胞的研究进行了综合评述。     

铁蛋白重链多肽对RAW264.7细胞中凋亡相关基因表达的影响

为了探讨铁蛋白重链多肽(ferritin heavy chain 1,FTH1)对RAW264.7细胞中凋亡相关基因表达的影响,采用RNA干扰和实时定量方法进行研究,首先提取RAW264.7细胞的总RNA,应用反转录PCR获得定量片段,制定标准曲线。将pSIREN-FTH1A/B转染到RAW264.7细胞,48 h后用绵羊种布鲁氏菌019株侵染4 h,实时定量PCR检测凋亡相关基因Mkl1、Birclb的表达,GAPDH作为内参基因,检测干扰前后凋亡相关基因mRNA的量。结果显示:转染pSIREN-FTH1的细胞被布鲁氏菌侵染后,Mkl1、Birclb基因mRNA的量较干扰前分别降低了76.3%、88.8%。FTH1可调节凋亡相关基因表达从而影响细胞凋亡的进程。     

转染重组Elafin对炎症状态下巨噬细胞表面受体CD14的保护作用

目的:研究转染重组Elafin对炎症状态下巨噬细胞表面受体CD14的保护作用.方法:重组质粒pEG-FP-C1-Elafin转染入离体培养巨噬细胞株,与多形核中性粒细胞(polymorphonuclear granulocyte,PMN)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)共作用4h后,倒置荧光显微镜观察重组Elafin胞内表达,流式细胞仪检测巨噬细胞表面受体CD14表达情况.同时,转染重组质粒的巨噬细胞与凋亡PMN共孵育1h后,观测结合凋亡PMN的巨噬细胞百分比.结果:pEGFP-C1-Elafin转染入巨噬细胞后被成功表达,其表面受体CD14数量明显升高,结合凋亡PMN的巨噬细胞的数量的增加.结论:通过转染重组人Elafin,可保护炎症状态下巨噬细胞表面凋亡相关受体CD14,促进PMN凋亡.     

巨噬细胞集落刺激因子受体的配基结合区的分析

从人胎盘中提取总ＲＮＡ〈利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增巨巨噬细胞集落刺激因子受体（Ｍ－ＣＳＦＲ）胞外区的Ｄ１－３，Ｄ２－３和Ｄ３功能区，并在大肠杆菌中成功夺表达了各相应的重组蛋白，酶联免疫吸附分析（ＥＩＡ）证明重组Ｄ１－３结合Ｍ－牟能力是重组Ｄ２－３的３倍，前者的Ｋｄ为１１ｎｍｏｌ／Ｌ后者的为３９ｎｍｏｌ／Ｌ，而重组的Ｄ３则完全没有结合能力，这些数据提示Ｄ２－３是与其配基结合的主体位点，Ｄ１为其配基     

温莪术油对脂多糖活化巨噬细胞释放一氧化氮的抑制作用

研究温莪术挥发油及其主要有效成分对活化巨噬细胞释放一氧化氮的抑制作用．方法：以脂多糖（LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264．7释放NO，通过Griess法测定培养上清中NO的释放量并计算抑制率，通过MTT法评价细胞毒性．结果：温莪术挥发油在1-10μg·mL^-1浓度范围内对活化的小鼠巨噬细胞释放NO具有明显的抑制作用，并呈现良好的剂量依赖关系．其主要有效成分呋喃二烯、莪术烯、吉马酮与莪术醇对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞释放NO表现出显著的抑制活性，IC50分别为6．5、5．8、9．4、9．9μmol·L^-1,结论：呋喃二烯、吉马酮、莪术烯、莪术醇对活化的小鼠巨噬细胞释放NO具有明显的抑制作用，以上结果可为温莪术油的临床应用提供一定的理论基础和科学依据．     

哮喘患者肺泡巨噬细胞中IL－6mRNA表达的研究

应用逆转录酶链反应及索氏转移杂交技术分析过敏性支气管哮喘患者（激素治疗组９例，非激素治疗组１２例）及正常对照组（１０例）肺泡巨噬细胞（ａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，ＡＭ）中白细胞介素一６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）的ｍＲＮＡ表达。ＩＬ－６／β－ａｃｔｉｎ比值表示。结果发现未用激素治疗的哮喘患者ＡＭ的ＩＬ－６／μ－ａｃｔｉｎ为０．６６±０．３２，显著高于正常对照者（０．３４±０．１３，Ｐ＜０．０１）及激素治疗组（０．４１±０．１５，Ｐ＜０．０５）。提示表达ＩＬ－６的ＡＭ在哮喘的发病机理中可能具有重要的作用，而皮质激素治疗哮喘的机制之一可能与其抑制ＡＭ表达及产生ＩＬ－６的能力有关。     

5‘端序列对hGM—CSF在大肠杆菌中表达水平的影响

设计交购构建了三种起始密码子ＡＴＧ上下游不同序列的人ＧＭ－ＣＳＦ原核表达质粒，对其核苷酸序列进行了分析验证后、使它们分别在大肠杆菌中表达了人ＧＭ－ＣＳＦ。结果表明，：ｐＬＧＭ３对ＧＭ－ＣＳＦ的表达量比ｐＬＧＭ１高的６倍，比ｐＬＧＭ伉约３倍。     

姜黄素对小鼠巨噬细胞LDL受体的影响

目的研究姜黄素对培养小鼠巨噬细胞LDL受体的影响。方法用不同浓度的姜黄素与巨噬细胞共孵育,观察各组巨噬细胞膜上LDL受体的数量。结果高中低三个剂量的姜黄素均能使巨噬细胞膜上LDL受体数量增加,随姜黄素浓度增加,LDL受体数量也明显增加。结论姜黄素可能通过调节LDL受体数量和活性起到降胆固醇的作用。     

前脑啡肽原和热休克蛋白参与宿主对结核分枝杆菌感染的应答

利用双向电泳比较了由临床分离的结核分枝杆菌感染离体巨噬细胞U937前后的全细胞蛋白组表达差异，肽指纹鉴定和生物信息学分析2个表达明显上调的斑点．确定它们分别为热休克蛋白HSP105β和前脑啡肽原．比较蛋白质组学和转录组学研究发现，热休克蛋白表达提高可能源于转录增加．提出了从神经免疫学角度研究结核分枝杆菌致病和宿主免疫机理的新思路，为解释吸毒人群中结核病高发病率提供了基础。     

芫花根的酚类成分及其免疫调节活性

采用硅胶和Sephadex LH-20柱层析技术和多种波谱分析方法．从芫花根中分离鉴定出7种酚类化合物．它们分别为伞形花内酯(1)、瑞香苷(2)、西瑞香素(3)、芫花素(4)、芫根苷(5)、毛瑞香素B(6)和毛瑞香素G(7)，其中-4和7为首次从芫花根中分离得到．上述化合物的免疫调节活性通过其对小鼠巨噬细胞分泌白介素-1β(IL-1β)，小鼠T淋巴细胞增殖及分泌白介素-2(IL-2)等进行检测．结果表明．20～30mg／L的化合物3～7对巨噬细胞分泌IL-1β，T淋巴细胞增殖及分泌IL-2有显的提升作用．