Secretive expression of Aspergillus fumigatus phytase in tobacco improves phosphorus nutrition in plant

To generate transgenic plants capable of utilizing exogenous phytate,an Aspersgillus fumigatus phytase gene(fphyA) was constitutively expressed in tobacco and recombinant enzyme was secreted from plant roots into the rhizosphere using the signal sequence from tobacco calretieulin.After 40 days of plant growth in hydroponic media,phytase activities in leaves,stems,roots and growth media of transgenic plants were 8.6-fold,7.4-fold,12.6-fold and 14.3-fold higher than those of wild-type plants.Signifi-cant improvements in plant growth and phosphoms(P)utilization were observed in the transgenic plants.When phytate was supplied as the sole P source.45-day-old transgenic tobaccos accumulated 1.0-fold and 0.5-fold more shoot and root biomass than wild-type tobaccos.with a concomitant of 1.7-fold increase in total P concentration.These results indicate that secretive expression of the A.fumigatus phytase improves acquisition and use of P from phytate in plants.     

超声波对红曲霉液体发酵代谢产物的影响研究

本文利用超声波的辅助手段对红曲霉代谢产物—红曲色素的代谢规律加以研究,力图寻求一种新的发酵方法,在兼顾液态发酵的优势的同时,解决其固有的缺陷。     

产果胶酶菌株的筛选鉴定及其产酶条件的研究

为筛选果胶高效降解菌株,结合HC比值(透明圈H与菌落直径C的比值)和果胶酶活力测定,从桔子园土壤和腐烂的水果等处筛选得到1株产果胶酶活力较强的菌株M3,结合菌株形态特征观察和ITS rDNA基因序列分析,确定该菌株为聚多曲霉(Aspergillus sydowii).经发酵产酶试验可知,该菌株的最适发酵产酶条件为培养温度30℃,初始pH4.5,接种量(体积分数)7%,培养时间4 d.在该条件下发酵,果胶酶活力可达42.01 U.mL-1.     

米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性

米曲霉碱性蛋白酶对植物蛋白具有高效的水解能力和较好的脱苦作用.为了便于大量获得该酶以利于工业上的应用,文中通过RT-PCR克隆获得米曲霉碱性蛋白酶基因,将之转化到毕赤酵母KM71菌株中并成功表达,之后用该酶进行牛胰岛素氧化链B链及大豆和花生蛋白的水解试验.结果显示:在10L发酵罐中诱导表达时,发酵液中重组碱性蛋白酶的酶活达4100U/mL;该蛋白酶最适反应pH值和温度分别为8.5 ～9.5和50℃,在pH值为6.0 ～10.0和温度低于40℃时具有较好的稳定性;该酶具有广泛的肽键选择性;该酶对大豆和花生蛋白显示出了强于部分商品化蛋白酶的水解能力.以上结果表明:该重组蛋白酶具有较大的开发利用潜力.     

红曲多糖的过氧化氢法脱色工艺研究

为了优化红曲多糖的过氧化氢法脱色工艺,在单因素实验的基础上,选择过氧化氢加入量、脱色时间和脱色温度为自变量、多糖脱色率为响应值,应用DesignExpert软件,采用响应曲面法,研究了各自变量及其交互作用对多糖脱色率的影响．利用响应面分析方法拟合得到了二次多项式回归方程的预测模型,并确定了红曲多糖过氧化氢法脱色的最佳条件：4mL多糖（8mg／mL）溶液中3％过氧化氢溶液的加入量为3．9mL,脱色时间为127min,脱色温度为65．6℃．该条件下红曲多糖脱色率为86．24％．     

染料脱色真菌的分离鉴定及其某些特性的研究

从土壤中分离到１株染料脱色真菌，经鉴定为温特曲霉ＨＤ１。该菌具有较宽的温度和ｐＨ值生长范围，最适生长温度和ｐＨ值分别为３０℃和４．０．ＨＤ１具有利用多种碳源和氮源进行生长以及较强脱色５种不同的结构染料的能力。     

Aspergillus usamii B_1-12果胶酶合成降解物阻遏的初步研究

Asp·usanlii B_1—12果胶酶的合成为多种碳源所阻遏。加大阻遏物浓度,阻遏效应随之增强。在酶大量合成开始以后加入阻遏物,仍能观察到阻遏现象,对果胶酶不同组分多聚半乳糖醛酸酶(PG)和多聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)具有相同的阻遏效果。外源 cAMP 可以消除这种阻遏效应。阻遏动力学分析和利用各种抑制剂所进行的研究表明。阻遏发生在转录水平上。     

氨基酰化酶产生菌GR1—11菌株的选育和产酶条件的研究

采用物理因子诱变剂处理出发菌株米曲霉3．951(Aspergillus 3.951)，获得氨基酰化酶（EC3．5．1．4）高产菌株GR1－11，这株经紫外线和γ射线诱变获得的变异株的产酶能力较出发菌株提高了91％，在最佳培养条件下，每克曲含氨基酰化酶达122．4单位，40％至60％饱和度硫酸铵沉淀所得粗酶比活力达210U／mg。     

米曲霉(Aspergillus oryzae)植酸酶的分离纯化及性质研究

从5株霉菌中筛选出1株产胞外植酸酶最高的菌株(Aspcrgillusoryxae;简称霉菌3号)。经发酵,硫酸铵分级沉淀,Sephadex G—100凝胶过滤、SE—Sephadex G—50层析和电泳分离,获得2种植酸同工酶.此两种酶的分子量为40000d,等电点分别为4.5和4.8,最适pH为2.7和5.6,最适温度为50℃,K_m值为50μmol/L。SDS、Fe_~(2+)对酶活力无影响;Mn~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)有激活作用;Cu~(2+)有抑制作用。