以壳聚糖为载体的药物新剂型

在以壳聚糖作为载体的药物新剂型中,壳聚糖在减少给药次数、降低药物毒副作用、提高药物疗效等方面具有重要作用,综述了以壳聚糖为药物栽体的新型制荆的各种类型和特性,主要包括缓控释制剂、结肠靶向制剂、纳米制剂等,并对其发展趋势进行了展望.     

基于J2EE构架的药物与靶点综合数据库及其查询系统（DTDB）的设计与实现

本文扼要介绍了作者收集、整理目前已发现的所有药物及其作用靶点的相关信息,并整合现代分子生物、药物、化学等的最新进展,采用业界领先的Java的j2ee框架,建立一个综合的数据库系统的过程。同时在该综合数据库系统的基础上,嵌入药物分子和靶点的对接技术,使得我们的系统除用于一般的药物分子和靶点查询之外,还能实现基于分子反向对接的虚拟筛选和通过药物分子寻找其作用的潜在蛋白靶点。本数据库暂时只能本机访问,对外访问地址尚在建设中。     

苏云金芽孢杆菌aiiA基因载体构建及石斛兰转化

细菌性软腐病是石斛兰及其它兰花栽培和生产中的一大危害.苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)中含有aiiA基因,该基因转入一些植物可赋予植物表现出软腐病抗性.从Bt菌中克隆出aiiA基因,并装载入植物表达载体pCAMBIA1301,构建出可用于转入石斛兰的pSAN载体;首次利用根癌农杆菌EHA105将pSAN载体转入石斛兰,并获得潮霉素抗性苗.这些抗性苗经GUS组织化学染色和PCR检测证实为转基因苗, 这将为获得具有软腐病抗性的石斛兰品种打下基础.     

采用反向PCR技术优化适合毕赤酵母表达的截短型HPV58型L1基因

目的:探讨利用反向聚合酶链反应(反向PCR)技术根据毕赤酵母偏爱密码子优化截短型人乳头瘤病毒58型(HPV58)L1基因的研究.方法:设计PCR引物扩增截短型HPV58L1目的基因,将其克隆入毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC;测序并对目的基因进行序列分析;根据毕赤酵母偏爱密码子利用反向PCR技术设计引物对目的基因进行扩增.结果:扩增了截短型HPV58L1基因并将其克隆入毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC中;根据毕赤酵母偏爱密码子优化了截短型HPV58L1基因.结论:成功构建经密码子优化截短型HPV58L1基因的毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC-HPV58L1.     

人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体的构建与鉴定

目的:构建人NOD8基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体.方法:用特定的限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因启动子不同长度2段序列,并进行酶切以切除启动子的pEGFP-C2作框架结构,插入表达载体pEGFP-C2中,构建含有人NOD8基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp),用Vsp Ⅰ和Nhe Ⅰ双酶切和PCR鉴定重组质粒,再将重组质粒进行DNA序列分析.构建的重组质粒经脂质体(lipofectamine)TM2000介导转染HEK293、K562和HeLa细胞,转染48 h后在倒置荧光显微镜下观察.结果:pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp)分别经酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,构建的2段重组质粒转染HEK293、K562及HeLa细胞均能表达绿色荧光,其中构建的pEGFP-C2-NOD8(760 bp)重组质粒绿色荧光表达强于pEGFP-C2-NOD8(520 bp).结论:成功构建2段不同长度的人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体.     

环孢素A药物质量浓度监测对患者早期移植肾功能的影响

目的:通过监测环孢素A的血药质量浓度,来判断和调整肾移植术后服用环孢素A(CsA)的有效剂量,为临床减少并发症提供参考.方法:采用免疫荧光偏振TDX法,测定286例肾移植术后受者全血CsA质量浓度,其中164例监测CsA谷值质量浓度(Co组),122例监测CsA峰值质量浓度(C2组).计算各自的药代动力学参数,分析两组CsA质量浓度测定值与肾移植功能状况及相关临床资料的关系.结果:两组出现急性排斥反应的发生率,Co组明显高于C2组,两组存在显著差异(P＞0.05),但两组在药物性肝、肾中毒及肺感染的发生率方面比较均未见显著差异(P＜0.05).结论:对CsA峰值质量浓度进行药代动力学的监测,可以较准确反映肾移植受者的药物剂量,尤其在监控急性排斥反应方面意义较大,同时也可减少CsA肾中毒的危险.     

根癌农杆菌介导的GFP在洋葱表皮细胞定位研究

采用根癌农杆菌介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP基因在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新基因的亚细胞定位和瞬时表达奠定了基础.     

Protégé文本标注工具在药物知识表示中的应用及其比较

通过对药物基本信息的特征分析,使用Protégé软件构建药物本体,分别使用基于Protégé-Frames和Protégé-OWL的文本标注工具Knowtator和iAnnotate对临床药物指南文档进行标注,以达到药物基本信息的结构化,同时比较分析了两个标注工具在生物医学信息学应用中的差异.     

转杂色鲍抗冻肽-Ⅲ基因表达载体pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP的构建

现代转基因技术是一种快速改良品种特性的有效方法.采用转基因技术提高我国南方重要贝类经济养殖品种--杂色鲍的耐低温特性是扩大其养殖范围的重要手段.以pIRES2-EGFP为基本载体,以合成并经过功能鉴定的抗冻肽(AFP)和杂色鲍肌动蛋白启动子(HdiActinP)为插入元件,首先用限制性内切酶BamHⅠ和 EcoRⅠ对基本载体pIRES2-EGFP和AFP-Ⅲ进行双酶切,目的酶切产物被回收后再连接得到载体pIRES2-EGFP-AFP.随后利用限制性内切酶SacⅠ和 EcoRⅠ对载体pIRES2-EGFP-AFP和HdiActinP进行双酶切,目的酶切产物被回收后再连接最终得到杂色鲍转AFP-Ⅲ的表达载体pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP,经过聚合酶链式反应和测序验证证明载体构建成功.     

Compound-fluidic electrospray: An efficient method for the fabrication of microcapsules with multicompartment structure

Microcapsules with multiple compartments are of significant importance in many applications such as smart drug delivery, microreactor, complicated sensor, and so on. Here we report a novel compound-fluidic electrospray method that could fabricate multicompartment microcapsules in a single step. The as-prepared microcapsules have multiple compartments inside. The compartments are separated from each other by inner walls made from shell materials, and different content can be independently loaded in each of them without any contact. We assemble a hierarchical compound nozzle by inserting certain numbers of metallic inner capillaries separately into a blunt metal needle. The particular configuration of the compound nozzle induces a completely and independently envelope of core fluids by shell fluid, as a result of which mulicomponent microcapsules with multicompartment structure can be obtained. And also, the number of inner compartments and the corresponding encapsulated components can be controlled by rationally designing the configuration of the compound nozzle. This general method can be readily extended to many other functional materials, especially for the effective encapsulation of active ingredients, such as sensitive and reactive materials.