紫外线诱变原生质体己酸高产菌株的选育(Ⅱ)--原生质体的制备、诱变及选育己酸高产菌株

以ＴＱ－４２９ 菌株作为出发菌株，经紫外线处理原生质体，再生菌通过初筛复筛，选育出己酸高产菌株ＴＱ－５２０，其产酸量达到１２．１７ ｍ ｇ／ｍ Ｌ。     

氢化可的松HPLC测定方法的研究

利用ＨＰＬＣ对发酵液中氢化可的松的测定方法进行了研究。确定了当采用色谱柱ＯＤＳ时的色谱条件检测波长２４２ ｎｍ ，流动相体积比为甲醇∶水＝ ６５∶３５、流速０．７ ｍ Ｌ／ｍ ｉｎ 等。通过重现性及回收率试验，表明本方法快速有效、结果准确     

浓醪酒精发酵酵母菌的选育

以本研究室保藏酵母菌Y316作为出发菌株,经紫外线诱变处理原生质体,再生菌通过初筛,复筛,选育出酒精高产菌株Y316-23,在料水比1∶1.8,发酵60h的条件下,成熟醪酒精的体积分数可达13.5%以上.     

山楂干酒的降酸研究

山楂果汁中的有机酸含量达到(15～18)g/L，影响着微生物的生长和果酒的风味。采用D-X树脂降酸，分别在果汁发酵前和原酒后酵期进行。结果表明：D-X树脂能反复使用且对果酒中黄酮等有效成分的吸附量减少，保证了山楂果酒的营养价值和药用价值。山楂干酒的还原糖为(4．0～8．0)g/L，酒精体积分数为(10～11)％，总酸(以柠檬酸计)为(6．5～8．0)g/L。     

pgpA和tdcG基因的敲除对大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成的影响

磷脂酰丝氨酸具有改善大脑的认知和记忆的功能,是医药和食品行业重要的原料.为进一步提高大肠杆菌(Escherichia coli)中磷脂酰丝氨酸含量,利用Red重组系统,以可积累磷脂酰丝氨酸的E.coli K12(△sda A△sda B△pgp B)为出发菌株,敲除pgp A和tdc G基因,切断与磷脂酰丝氨酸合成相关的L-丝氨酸和磷脂酰甘油磷酸的分解代谢途径.摇瓶发酵后的检测结果表明,重组菌株E.coli K12(△sda A△sda B△pgp A△pgp B△tdc G)中磷脂酰丝氨酸占菌体总磷脂的比例为2.5%,较出发菌株(1%)提高了1.5倍.     

基于蛋白质交联的氧化酶特性与应用

蛋白质交联属于蛋白质改性修饰的一部分,是重组食品与新型食品制造的重要内容。与化学交联、物理交联相比,酶法交联因其反应条件温和、不产生副产物、交联效果好等特点,成为最为容易接受的一种蛋白质交联方式。除谷氨酰胺转胺酶外,一些氧化酶也被证明能够在蛋白质分子间形成共价键而形成交联。介绍了目前应用较多的酚氧化酶(酪氨酸酶、漆酶)、过氧化物酶以及赖氨酰氧化酶的酶学性质、交联机制等,并对其在食品蛋白质交联中研究现状以及潜在应用进行总结与展望。     

培养条件对甲醇毕赤酵母异源表达木质素过氧化物酶的影响

对含有黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(LipH8)的甲醇毕赤酵母培养基和发酵方法进行了研究．摇瓶培养条件研究结果表明:用11°Bx麦芽汁培养工程菌,然后用高温浸提液置换诱导产酶较好．5 L发酵罐产酶放大实验结果表明,木质素过氧化物酶较稳定,在72 h木质素过氧化物酶酶活达到最高7 568 U/L．     

蛋白质在分离纯化中保持稳定的方法及应用

从正常生物基质中提取各种蛋白质需要有特定的条件 ,如果不能满足这些条件 ,蛋白质将很快的失去其生物学活性。本论文从两个方面讨论了在分离纯化中保持蛋白质的稳定的方法 :即通过添加稳定剂 (例如 :共溶剂 ,金属离子 ,蛋白酶抑制剂等 )及操作条件的优化 (例如 :低温、适宜 p H等 )。经实验证明均可获得满意的结果。     

利用酶法生产肌醇初步研究

植酸酶能将植酸及其二价盐类菲丁水解生成磷脂酰肌醇,在磷酸酯酶的继续作用下,磷脂酰肌醇被分解为肌醇。无花果曲霉能同时分泌植酸酶和磷酸酯酶。通过对无花果曲霉（Ａ．ｆｉｃｕｕｍＡ．ｓ３．３２４）产生植酸酶和磷酸酯酶条件的研究,在确定的最佳条件下,植酸酶和磷酸酯酶活力分别达到５．７ｕ／ｍＬ、０．５３３ｕ／ｍＬ。用所得发酵液水解菲丁制备肌醇,使肌醇的转化率达１０．３％。     

不同β-葡萄糖苷酶性能分析及对罗汉果苷的转化

以Pichia pastoris GS115为宿主,对来源于特异腐质霉Humicolainsolens、棘孢曲霉Aspergillus aculeatus和黑曲霉Aspergillus niger的β-葡萄糖苷酶基因bglHi、bglAa和bglAn进行异源表达。以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物,分析了3种酶的酶学性质,其中BglAn的酶活力最高,为90.83U/mg。3种酶的最适反应温度和最适pH值范围分别为55~65℃和5.0~6.0。在pH值为6.0、温度50℃、酶量2U的条件下,利用3种酶水解不同浓度的罗汉果苷Ⅴ。结果表明:不同来源的酶水解底物的特异性差别较大,其中BglHi和BglAa水解罗汉果苷Ⅴ生成罗汉果苷ⅢE的转化率较低,仅为5%~7%;而BglAn在底物质量浓度1mg/mL,反应20min时转化率为96.5%;提高底物质量浓度到5mg/mL,反应1h时转化率也可达97.9%,基本实现完全转化。通过酶法转化罗汉果苷Ⅴ,获得了较高纯度的产物罗汉果苷ⅢE,为后期开发不同结构、不同功能罗汉果苷类甜剂提供了新的途径。