单纯及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠海马TNF—α表达的影响

目的探讨单纯电休克及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠电休克治疗效果及海马内TNF-α表达的影响。方法50只成年Wistar大鼠随机分为5组（n=10）：正常对照组（C组）、抑郁组（D组）、单纯丙泊酚组（DP组）、单纯电休克组（E组）、丙泊酚联合电休克组（M组）。C组正常饲养，其余采用经典的慢性不可预见性应激法建立抑郁模型。建模成功后，E组直接行电休克治疗，M组腹腔注射丙泊酚90mg／kg，麻醉产生效应后行电休克治疗，每日进行以上处理1次，连续7日。以Open—field法和糖水消耗实验进行行为学评分。实验完成后处死大鼠，用免疫组化染色法检测TNF—α受体蛋白的表达；ELISA法海马TNF-α的含量，RT-PCR法测海马TNF—α mRNA表达。结果E组和M组大鼠的行为学评分高于D组和DP组，且M组高于E组（P〈0．05）；D组和DP组海马内TNF-α含量以及mRNA的表达高于其它各组（P〈0．05），M组海马内TNF—α含量以及mRNA的表达低于E组（P〈0．05），与C组差异无统计学意义（P〉0．05）；D组和DP组海马区TNF-α受体表达量低于C组（P〈0．05），M组的表达量接近于C组，但高于E组（P〈0．05）。结论慢性应激使大鼠海马内TNF—α含量升高及其受体表达下调，从而产生抑郁症。丙泊酚可以改善电休克抑郁症状可能与进一步下调抑郁大鼠海马内TNF—α的含量和上调其受体表达有关。     

胎儿宫内发育迟缓疾病标志物的初步研究

目的筛选胎儿宫内发育迟缓大鼠血清中差异表达的蛋白质，寻找与胎儿宫内发育迟缓相关的疾病标志物。方法收集大鼠疾病正常组、IUGR组血浆各3例；TCA法沉淀血清蛋白，建立疾病组和正常组蛋白质的双向凝胶电泳图谱；ImageMaster分析软件分析差异蛋白质；飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）获得差异蛋白肽指纹图谱，MASCOT引擎搜索蛋白质种类。结果鉴定出个差异蛋白点3个，分别为：IGF—I、IGF-Ⅱ、IGFBP-3。结论IGF—I、IGF-II、IGFBP-3，可能是胎儿宫内发育迟缓疾病诊断的生物标志物。     

基于质谱技术的计算蛋白质组学研究

蛋白质组是继人类基因组计划完成之后又一新兴的生命科学研究对象，蛋白质组学研究细胞或组织内所有表达的蛋白质．生物质谱技术已为蛋白质组学研究产生了大规模的质谱数据；而如何从这些数据中提取和发现有关蛋白质组的重要生物学知识为计算蛋白质组学的研究提出了重大需求，如蛋白质鉴定、翻译后修饰、定量分析，以及疾病模式的发现等．本文研究了如何应用计算技术来解决蛋白质组学研究中质谱信息处理的这几个关键问题．     

诺迪康对AD模型大鼠学习记忆及海马AchE、ChAT活性的影响

目的研究诺迪康对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆及海马胆碱能系统的影响.方法将32只SD大鼠随机分成4组:模型组,安理中组,诺迪康组和正常组.采用双侧海马内注射Aβ-40制作大鼠AD模型,采用Morris水迷宫检测诺迪康对AD大鼠认知功能的影响;通过HE染色观察对AD大鼠的海马神经元形态的影响;采用免疫组化法观察对...     

胰岛素信号通路PI3K／Akt对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA水平的影晌

目的通过胰岛素和磷脂酰肌醇-3激酶（P13K）抑制剂渥曼青霉素（wortmannin）对P13K／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（P13K／Akt）信号通路的激活和抑制作用，观察P13K／Akt信号通路对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACEl）mRNA水平表达的影响。方法20只sD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、胰岛素组和渥曼青霉素组，海马立体定向注射胰岛素和P13K抑制剂渥曼青霉素。逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测P13K／Akt信号传导下游蛋白Akt以及BACEImRNA水平。结果注射胰岛素的海马P13K信号通路下游信号分子：AktmRNA表达上调（分别较空白和阴性对照组P=0．047，P=0．002），而BACElmRNA表达下调（分别较空白和阴性对照组P=0．004，P=0．01）。渥曼青霉素组的P13K下游信号分子AktmRNA表达明显被抑制（分别较空白和阴性对照组P=0．002，P=0．039），同时BACEImRNA的表达较对照组上调（分别较空白和阴性对照组P=0．039，P=0．018）。结论胰岛素信号通路P13K／AM可以调节BACEl的转录水平参与阿尔茨海默病的发病机制。     

MPTP慢性帕金森病小鼠海马内氧化应激与细胞凋亡蛋白的表达

目的 观察 MPTP慢性帕金森病小鼠海马氧化应激指标及细胞凋亡相关蛋白的表达.方法 应用MPTP制备慢性帕金森病模型,观察行为学改变,Morris水迷宫实验,检测模型组和对照组小鼠海马内超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）及丙二醛（MDA）舍量变化,以及免疫组织化学方法、RT-PCR方法、Western blot方法检测海马Bax和Bel-2蛋白表达.结果 慢性帕金森病模型小鼠行为学特点为震颤、活动减少;水迷宫实验结果提示认知功能降低;与对照组海马比较：模型组海马SOD、GSH含量均下降,而MDA含量升高（P〈0.05）;模型组海马Bax蛋白表达增高,而Bel-2蛋白表达下降（P〈0.05）.结论 氧化应激在慢性帕全森病认知功能障碍发病机制中起重要作用,而Bax和Bcl-2蛋白参与了氧化应激诱导海马神经元凋亡的调控过程.     

内源性硫化氢与皮质发育障碍模型大鼠认知功能损害的相关性研究。

目的探讨皮质发育障碍DCDs（disorders of cortical development）模型鼠的认知功能与H2s的变化关系。方法用1射线照射孕15d Wistar大鼠，制作DCDs模型。采用Morris水迷宫法测试P30（出生后30天）、P60、P90F1代DCDs模型鼠和对照组大鼠的学习能力和空间记忆能力。用敏感硫电极法检测大鼠血液及海马组织中H2s浓度。用亚甲基蓝法测定大鼠海马神经元细胞胱硫醚，B-合酶CBS（cystathionine。beta-synthase）酶活性。结果水迷宫实验：P60、P90模型组大鼠较正常对照组潜伏期明显延长（P〈0．05），且随月龄增加潜伏期越长。P60、P90模型纽大鼠较对照组血液也s浓度分别降低6．5、11．5μmol,／L、海马组织H2s含量分别减少3．2、5．6μLmol／L．mg，海马组织神经元细胞CBS酶活性降低24．94、34．46μmol／L．g．min。P30模型组与对照组的各项变化不明显。结论DCDs模型鼠脑内H，S含量及海马组织神经元细胞CBS酶活性降低，内源性H2s降低与DCDs认知功能损害可能具有相关性，并为治疗皮质发育障碍的认知功能损害可能提供治疗途径。     

姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8／VCR的双向凝胶电泳技术的建立及优化

目的建立并优化姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8／VCR蛋白质纽的双向电泳技术。方法姜黄素作用于人结肠癌细胞HCT-8／VCR，提取蛋白质。对双向凝胶电泳中蛋白质样品的处理，蛋白上样量，IPG胶条的选择，以及聚焦条件等进行调整和每化。结果采用瓶内刮取的方法裂解细胞，pH3-10NL的胶条，上样量200ug，延长除盐时间，聚焦60000伏小时，可以得到分辨率较高、重复性较好的双向电泳图谱。结论初步建立了分辨率较高且重复性较好的姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8／VCR蛋白质双向凝胶电泳图谱。     

急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型的建立

目的探讨建立适合实验研究需要的急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型。方法64只雄性sD大鼠，随机分成空气对照组（AC组）和模型组（CO组），每纽32只。采用静态吸入式染毒，选取染毒后3、7、14、28d为时相点，应用Morris水迷宫实验检测平均潜伏期等学习记忆能力，Tunel法检测海马回神经元凋亡。结果CO组大鼠较AC组平均潜伏期延长（F=35．93，P〈0．01），海马回神经元凋亡指数增高（P〈0．01）。结论本实验成功建立了可行性较高的急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型，为进一步研究其发病机制和防治方法提供比较好的基础。     

解聚复肾宁对糖尿病肾病大鼠TNF—OL、MCP-1的影响

目的观察解聚复肾宁（Jiejufushenning，JJFSN）对糖尿病（Diabetes mellitus，DM）大鼠肾组织肿瘤坏死因子-α（Tumorneerosisfactor-alpha，TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（Monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）和血清TNF-α的影响，探讨其肾保护作用机制。方法腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）建立SD大鼠DM模型，将成模DM大鼠随机分为3组：DM模型组（B组）、JJFSN组（C组）、厄贝沙坦（Irbesartan）组（D组），另设正常对照组（A组）。采用相应干预措施处理12周。常规方法测定12周末各组大鼠空腹血糖（FBG）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、肾重／体重（KW／BW）、24h尿蛋白（24huFro）；放免法测血清TNF-α含量：免疫组织化学方法测肾组织TNF—Ot、MCP-1的表达；PAS染色评估细胞外基质；电镜观察肾组织超微结构改变。结果与A组相比．B组大鼠FBG、BUN、Scr、KW／BW、24huPro及血清TNF-α升高（P〈0．05），肾组织TNF—Ot、MCP-1表达明显增高（P〈0．05）；肾组织超微结构明显异常；C组和D组上述指标显著改善（P〈0．05），肾组织超微结构异常改善。结论竹FSN能延缓DM大鼠肾损害进程，其机制可能与抑制TNF-α、MCP-1上调有关。     

两种新生大鼠皮质发育障碍模型的差异基因表达谱研究

目的研究两种不同的方法构建皮质发育障碍(DCDs)动物模型中的共同差异表达基因,为进一步研究DCDs形成机制提供基因水平筛选的研究平台。方法用两种方法制备DCDs模型:①射线损伤模型(射线组):采用剂量为1.45 Gy的γ射线照射妊娠15 d的SD大鼠制作子代大鼠DCDs模型;②卡莫司汀(BCNU)药物损伤模型(药物组):妊娠15 d的SD大鼠,腹腔注射BCNU制作子代大鼠DCDs模型。同时设正常对照组。对两种DCDs模型的子代新生鼠(P0)全脑做基因芯片扫描,结果与正常对照组比较,获得两种模型共有的差异基因。结果射线组大鼠与正常比较得到170个差异基因,其中25个上调,145个下调;药物组大鼠与正常比较得到259个差异基因,其中67个上调,192个下调。两组重合的基因共54个,其中3个上调,51个下调。结论皮质发育障碍是一个复杂的病理过程,本实验运用基因芯片技术,对两种不同方法构建的DCDs模型进行了研究,获得两种DCDs模型共有的基因差异表达谱,为进一步研究DCDs形成机制提供了分子生物学平台。     

早期营养不良对SD大鼠海马AchE和ChAT表达的影响

目的探讨生命早期营养不良对21天雄性sD大鼠中枢AchE和ChAT的影响。方法从妊娠晚期到哺乳期末给予母鼠半量饲料，造成子鼠营养不良，取哺乳期末雄性子鼠脑海马组织进行测量。结果免疫组化结果示：实验组海马CA3区ChAT光密度低于对照组（P〈0．05），在CA!区无差异（P〉0．05）；而两纽间CAl和CA3区AchE光密度均无差异（P〉0．05）；RT—PCR示：实验组海马ChAT、AchEmRNA少于对照组（P〈0．05）。结论早期营养不良能导致子鼠海马及中枢胆碱能系统发育障碍，可能会影响成年后大鼠学习记忆能力。     

外源性细胞色素C对脓毒症小鼠心肌TGF-β1和Smad1/5/8影响的实验研究

目的 探讨外源性细胞色素c (Cytc)对脓毒症小鼠心肌TGF-β1和Smad1/5/8的作用及影响.方法 雄性昆明小鼠78只,随机分为假手术组( Sham)、脓毒症组(CLP)、细胞色素C处理组(T).CLP组和T组用盲肠结扎穿孔法造模,Sham组仅开腹翻动盲肠.24 h造模成功后,T组经尾静脉注射外源性Cyt c(20 mg/kg)、Sham组和CLP组分别经尾静脉注射150(1生理盐水.30 min后以0、6h、12 h点取材,每个时间点5只小鼠,测左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左室内压力变化最大上升和下降速率(LV±dp/dt-max);取心肌组织分别做组织学检查、RT-PCR和Western-Blot检测TGF-β1和Smad1/5/8蛋白的表达;24h点留取电镜标本,余下的小鼠观察生存率.结果 与CLP组比较,T组一般情况好转,生存率提高,病理学改善;LVSP、LVEDP和LV±dp/dt-max提高(P＜0.05);各组TGF-β1和Smad1/5/8蛋白均有表达,CLP组表达明显增加,经外源性Cytc干预后蛋白表达减少,CLP组与其它组比较差别有统计学意义(P＜0.05).结论 外源性Cytc逆转脓毒症小鼠心肌线粒体功能抑制和心肌抑制,改善心功能.     

Mir—92a在癫痫中的表达及意义

目的检测癫痫中 mir 92a表达水平,以探索 mir 92a表达与癫痫发生发展之间的关系.方法应用原位杂交技术检测氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型发作后6h、72h、14d和60d脑组织中 mir 92a的表达水平;应用荧光定量 PCR技术在氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型各时间点和在难治性癫痫患者脑组织中检测 mir 92a的表达情况.结果在氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型的6h、72h(P<0.05)中 mir 92a表达水平相比正常对照下降,而在14d和60d(P<0.05)中 mir 92a表达升高;在难治性癫痫患者脑组织中 mir 92a的表达比非癫痫病人升高(P<0.05).结论 mir 92a在癫痫模型和难治性癫痫患者脑组织中存在异常的表达,可能通过调节钾离子-氯离子联合转运体2表达进而参与了癫痫的发生发展过程     

P-cofilin在癫痫中的表达及意义

目的了解磷酸化 cofilin(P cofilin)在癫痫脑组织中的表达情况,以探讨 cofilin磷酸化形式在癫痫发生、发展中的作用.方法应用蛋白免疫印迹和免疫组化技术检测氯化锂 匹罗卡品大鼠癫痫模型癫痫大发作后各时间点脑组织中 P cofilin的表达水平;并在难治性癫痫患者脑组织中检测 P cofilin的表达情况.结果在氯化锂 匹罗卡品大鼠癫痫模型的24小时、7天和14天 P cofilin表达水平相比正常对照明显下降(P<0.05),而在72小时和60天中 P cofilin表达水平明显升高(P<0.05);而在难治性癫痫患者脑组织中 P cofilin表达水平比非癫痫患者高(P<0.05).结论 P cofilin在氯化锂 匹罗卡品大鼠癫痫模型和难治性癫痫患者脑组织中有明显异常的表达,可能通过易化、稳定异常兴奋性环路而参与癫痫或难治性癫痫的发生、发展     

早期母子隔离应激对大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨早期母子隔离应激对幼鼠学习记忆能力的影响。方法30只SD新生大鼠用于实验，实验随机分成3组，正常对照纽、母子隔离15分钟纽、母子隔离3小时纽。在生后40天，三组大鼠进行Morris水迷宫及记录海马脑片长时程增强电位（LTP）实验。结果Morris水迷宫测试，与正常组比较母子隔离3h组大鼠寻找平台需要的潜伏期延长（P〈0．05），而母子隔离15分钟组大鼠寻找平台需要的潜伏期与正常组比较则无明显变化（P〉0．05）；海马脑片长时程增强电位提示：正常对照组条件刺激（CS）前后fEPSP斜率变化率为：64．7±22．9％；母子隔离3h组为：35．3±14．2％，低于正常组（P〈0．01）；母子隔离15min组为：66．3±29．7％，与正常组比较无显著性意义（P〉0．05）。结论幼鼠生后早期过度的应激导致大鼠的学习记忆能力减弱。     

皮质发育障碍模型鼠与正常鼠致痫的性别特点

目的 探讨X射线诱导的皮质发育障碍(DCDs)模型鼠与正常对照鼠致痫的性别特点.方法 将8只SD孕鼠完全随机分为正常对照组和实验组,实验组于X线直线加速器照射制作皮质发育障碍模型,正常对照组不做任何处理,仔鼠成年后按性别分成4组.分别给正常对照组雄雌性及实验组雄雌性仔鼠腹腔注射氯化锂-匹洛卡品,观察产生癫痫的潜伏期、注射总剂量、癫痫发生率.结果 腹腔注射氯化锂-匹洛卡品后DCDs雄鼠较雌鼠发生癫痫潜伏期明显缩短(P＜0.01),注射总剂量显著减少(P＜0.01),癫痫发生率高(P＜0.05).正常组雄鼠较雌鼠发生癫痫潜伏期缩短(P＜0.05)、注射总剂量减少(P＜0.05),癫痫发生率未见明显差异.结论 DCDs及正常鼠中雄性鼠较雌性鼠易感性高,更适于造模.