红球菌菌株腈水合酶提取方法优化

研究了红球菌(Rhodoccus sp.Tccc28001)腈水合酶初步提取实验.对腈水合酶提取的菌体培养时间、细胞的超声破碎方法和硫酸铵分级分离方法进行了优化.结果表明,提取的最佳条件为:培养96 h收获菌体;在4℃下溶菌酶处理菌悬液40 h后进行超声波处理,400 W超声破碎60min,分2次进行,每次30 min(60个循环,15 s超声,15 s间歇);然后使用40 mmol/L磷酸缓冲液,经20%~70%饱和度硫酸铵沉淀,能获得最高产率的腈水合酶.此研究为腈水合酶的层析纯化奠定了基础.     

赤豆β-半乳糖苷酶固定化及其性质研究

用阳离子修饰的Sephadex G-100,经BrCN活化,将部分纯化的赤豆β－半乳糖苷酶通过吸附和共价交联法固定法。固定化载体表现出较高的蛋白载量和酶活性收率。固定化酶活性收率达65％。动力学性质研究表明,固定化酶酸碱稳定性、热稳定性、存储稳定性和使用稳定性都比游离酶好。     

烟草节杆菌02181肌酸酶的纯化及理化特性

采用DEAE-纤维素和羟基磷灰石层析联合使用的纯化程序,从烟草节杆菌02181株提取纯化了肌酸酶.比活性由0.92 U/mg上升至124.44 U/mg,酶被提纯了135.26倍,在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈单一区带,最终收率达52.95%.特性研究显示此酶的相对分子量为84500,等电点为4.80,在磷酸盐缓冲体系中,最适pH为6.50,pH7.00环境下耐受性最好,最适温度为35℃,米氏常数(Km)为46.50 mmol/L,最大反应速度(Vmax)为8.20 μmol/min.Cu2 、SDS可使酶完全失活,Hg2 、Cd2 、Zn2 和Fe3 明显抑制酶活性,Mg2 、Mn2 、Brij 35、Triton X-100和邻菲饶啉对酶活性有一定的抑制作用,EDTA对酶活性无明显影响,而Ca2 和NaN3对酶有一定的激活作用.络合剂邻菲饶啉和EDTA对酶活性的抑制试验表明此酶属于金属酶类.     

核糖核酸酶抑制因子的制备及急性毒性实验

对新鲜人胎盘进行硫酸铵分级沉淀，透析，ＤＥＡＥ－纤维素－２３离子交换层析，制取初步纯化的核糖核酸酶抑制因子。小鼠急性毒性实验结果表明，ＲＩ对小鼠没有急性毒性。     

酶促半合成人胰岛素的副反应及纯化

研究酶促半合成人胰岛素的副反应，采用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５阴离子交换层析纯化合成人胰岛素中间体生物。     

黑藻抗氧化肽制备及其活性表征

采用胰蛋白酶酶解黑藻蛋白制备抗氧化肽,以酶解物清除2,2'' 联氮 双 3 乙基苯并噻唑啉 6 磺酸 (ABTS) 自由基的百分率为响应值,考察酶底比（酶与底物的比例,以质量百分比表示）、酶解pH和酶解时间对酶解物清除自由基的影响响应面法优化黑藻蛋白的最佳酶解条件为：酶底比86%、时间59 h、酶解pH值 73所得黑藻蛋白酶解物 (1 000 μg/mL) 对ABTS、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别为679%、401%、501%、253%酶解物经截留分子量3 kDa和10 kDa的滤膜超滤和Sephadex G 25凝胶柱层析分离纯化后,所得黑藻抗氧化肽P 1和P 1 A (1 000 μg/mL) 对ABTS、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别显著提升到806%、431%、521%、314%和882%、482%、544%、355%研究结果为黑藻抗氧化肽应用于功能性食品或天然抗氧化剂提供理论依据     

黑龙江省常见葡萄种和品种的过氧化物酶同工酶分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对黑龙江省常见的葡萄种和栽培品种进行过氧化物酶同工酶分析揭示:不同葡萄种中的九个品种,在三个生育期叶片中共显示23条酶谱带,按其电泳相对迁移率的集中程度由快至慢可分为A、B、C、D四区。不同生育时期酶谱有较大变化,不同种的葡萄品种酶谱差异显著,B区和C区酶谱带的数目和表达先后与不同种有明显的相关性。杂交种反映双亲所在种的酶谱带的特点,并有新酶带产生。     

330弱碱性树脂固定化漆酶的酶学性质研究

为进一步拓展漆酶在污染物处理领域中的应用,通过330弱碱性树脂作为固定化载体,用戊二醛交联固定化漆酶,并对树脂固定化漆酶的酶学性质进行研究,研究结果表明:固定化漆酶在60℃体现了最佳活性,对温度的承受能力有所提高;固定化漆酶的最适pH在pH=3处,更耐酸碱性;固定化漆酶在放置30 d后,相对于初始酶活仍然保持了50%左右的酶活,循环使用10次后,相对酶活仍能保持初始酶活的45%左右。     

肌酐测定工具酶产生菌-烟草节杆菌02181的筛选及其产酶条件

肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶是肌酐测定酶学方法的主要工具酶，我们从兰州市郊土壤中筛选到一株能同时高产这3种酶的菌株02181，经中国科学院微生物研究所鉴定为烟草节杆菌，正式定名为烟草节杆菌02181(Arthrobacter nicotianae 02181)．该菌适宜的培养温度为28℃；增加氧溶量有利于细菌细胞生长和产酶；肌酐的存在对产酶至关重要，推测为酶基因开放的诱导剂；蛋白胨是该菌生长和产酶的良好氮、碳源；在有肌酐和蛋白胨存在时，添加葡萄糖能促进细菌细胞生长，但产酶量降低；镁盐、钾盐和磷酸盐为细菌生长和产酶所必需．优化产酶条件后，肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶的最高产酶量分别达145．00U／g湿菌、75．77U／g湿菌和21．30U／g湿菌．该菌不仅具有用于发酵生产的潜力，也为我们进行肌酐测定3种主要工具酶的基因克隆奠定了基础。     

丙氨酸氨基转移酶的制备及检测实验的设计与实践

为培养学生创新能力和实践能力,中国药科大学生物制药实验教学中心结合课程专业特点设计了涵盖丙氨酸氨基转移酶的制备、柱层析纯化、SDS-PAGE电泳分离鉴定、酶活力测定等生物制药专业的基本操作实验.结果表明,该实验结果符合预期,学生兴趣浓厚,对其系统地学习酶的提取、纯化和鉴定起到了积极的作用.     

龙眼壳总黄酮分离纯化工艺的研究

比较了AB-8、HPD-300、HPD-600、HPD-722四种大孔吸附树脂对龙眼壳中总黄酮的吸附及解吸性能。筛选出效果最好的树脂来分离纯化龙眼壳总黄酮,确定其最优吸附及解吸等工艺参数．结果表明：HPD-300树脂适用于龙眼壳总黄酮的纯化,吸附条件为上柱液pH为5．0、总黄酮浓度为6mg／mL、上柱液流速为1BV／h,经1BV／h流速的70％乙醇洗脱．龙眼壳总黄酮的含量可达到75．4％．     

假酸浆总黄酮的提取及纯化研究

以假酸浆为原料,采用浸渍提取方法,通过单因素与正交试验确定了假酸浆总黄酮提取的最佳条件,并筛选了不同树脂对总黄酮的吸附和解吸附特性.实验结果表明：提取最佳条件为：温度60℃,提取时间2.0 h,乙醇体积分数50%,固液比1∶15（g∶mL,下同）;总黄酮得率3.585%.影响得率的因素为：乙醇体积分数〉提取时间〉提取温...     

过滤式厨房油烟净化器过滤材料的研究

通过对几种滤料进行厨房油烟净化试验,发现了过滤式材料净化厨房油烟的规律,利用电子显微镜对过滤材质上油烟颗粒进行了观察,对过滤式油烟净化器净化机理进行了研究。     

苦瓜多糖对人食管癌EC-109细胞形态结构的影响

以人食管癌EC-109细胞为研究对象,探讨苦瓜多糖组分MCP2对人食管癌EC-109细胞生长的抑制,以及对其形态、结构的影响.采用台盼蓝拒染法测定人食管癌EC-109细胞生长抑制曲线,通过倒置显微镜观察不同质量分数的苦瓜多糖组分MCP2作用于人食管癌EC-109细胞导致的形态变化.结果表明,苦瓜多糖组分MCP2能抑制人食管癌EC-109细胞增殖,诱导人食管癌EC-109细胞凋亡,在一定范围内呈时间、剂量依赖性,作用48 h的IC50为(285.45±36.64)μg/m L.经苦瓜多糖组分MCP2诱导后,人食管癌EC-109细胞形态结构出现典型的凋亡特征.     

仙人掌多糖对人肺癌A549细胞形态结构的影响

以人肺癌A549细胞为研究对象,探讨仙人掌多糖组分OP1对人肺癌A549细胞生长抑制,以及对其形态、结构的影响.采用台盼蓝拒染法测定人肺癌A549细胞生长抑制曲线,通过倒置显微镜观察不同质量浓度的仙人掌多糖组分OP1作用于人肺癌A549细胞引发的形态变化.结果表明,仙人掌多糖组分OP1能抑制人肺癌A549细胞增殖,诱导人肺癌A549细胞凋亡,在一定范围内,呈时间、剂量依赖性,作用48h的IC50为(597.55±28.97)μg/mL.经仙人掌多糖组分OP1诱导后,人肺癌A549细胞形态结构出现典型的凋亡特征.     

高氯酸盐生产工艺研究(III)——生产过程中的pH值控制

本文介绍了从盐水精制到三废治理的整个高氯酸钾生产过程中pH值控制的重要意义,作者根据自己的研究和实践,总结、计算提出各工艺的最佳pH值,并阐述了合理pH值的控制办法。     

抗凝血药物水蛭素的纯化与鉴定

以湖南产日本医蛭嗉囊消化液作为原料，经三氯醋酸沉淀后用ＤＥＡＥ－纤维素柱层析一步纯化，反相ＨＰＬＣ脱盐后即可获得批量的水蛭素。对纯化的水蛭素进行了ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳，质谱，Ｎ端顺序分析及抗凝血酶活性分析。     

牛初乳中IGF和TGF的分离与纯化

采用葡聚糖凝胶G - 75层析色谱、SPSepharoseFF离子交换色谱和制备型疏水作用色谱Oc tylSepharoseFF研究了IGF -Ⅰ ,IGF -Ⅱ和TGF - β的分离纯化 ,并且用高效液相色谱法对IGF -Ⅰ ,IGF -Ⅱ和TGF - β的含量进行了测定 .     

甜菜M14品系Cystatin基因植物蛋白纯化表达载体的构建及转化烟草

植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂是一类具有提高植物对各种生物及非生物胁迫抗逆性的重要蛋白质。利用前期获得的甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的编码区序列构建了带有His标签的甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的植物蛋白纯化表达载体,并将其转化烟草,获得T0代阳性转基因植株,为下一步利用融合蛋白的His标签从转基因烟草中大量纯化甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂奠定了基础。     

花生中菊酯类农药残留量的气相色谱法测定

研究了花生中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的提取、净化及气相色谱测定方法.农药残留采 用乙腈提取、固相萃取柱(SFCFlorisil-1g)净化、氮吹仪浓缩以及电子捕获/气相色谱法检测.方法 回收率可达84.1%～90.8%,检出限达0.01mg/kg.