核酸外切酶Ⅲ辅助的荧光适体传感器免标记检测卡那霉素

随着抗生素的广泛使用,一些负面影响也随之出现.食品和生态环境中残留的抗生素极大威胁着人类的身心健康与生存环境.因此,发展快速、便捷的抗生素检测方法对进一步控制抗生素污染有着非常重要的意义.该文利用核酸外切酶Ⅲ能特异性催化dsDNA的特性,构建了核酸外切酶Ⅲ辅助信号放大的荧光适体传感器用于卡那霉素(Kana)检测.当目标物不存在时,双链DNA被核酸外切酶Ⅲ切成短的寡核苷片段,不能嵌入核酸染料从而表现出低的荧光.当卡那霉素存在时,它与相应的核酸适体链结合,从而将双链转变成单链DNA.游离的单链DNA不能被核酸外切酶Ⅲ切割,嵌入核酸染料后表现出很高的荧光信号.在最佳实验条件下,该方法对卡那霉素浓度在0.01～50 ng/mL范围内呈线性相关,最低检测限为8.12×10~(-3) ng/mL.废水样品中的加标回收率为96.05%～105.04%,表明该策略可用于实际环境中卡那霉素的检测.     

血液筛查中核酸检测与ELISA联合应用的研究

通过对血浆标本的核酸和血清学检测结果进行比较分析,探讨核酸检测（NAT）与酶联免疫吸附试验（ELISA）联合应用在血液筛查中的意义.研究从血浆样本中同时提取HBV、HIV和HCV核酸,采用荧光实时聚合酶链反应（PCR）进行检测,同步进行ELISA检测HBV、HIV和HCV抗原或抗体.在5 184份血浆标本中检测出HBV“窗口期”标本12份,检出率为0.23％;检测出HCV“窗口期”标本3份,检出率为0.058％;未检测出HIV“窗口期”标本.从而得出结论,核酸检测可以有效检测出血浆中的HBV、HIV和HCV的“窗口期”标本.     

磁性适配体纳米荧光生物传感器信号增强检测腺苷(英文)

研制了一种简单的磁性适配体纳米荧光生物传感器用于信号增强检测腺苷.同另一条荧光标记的DNA (FAM-sDNA)部分互补的腺苷适配体首先被固定在金包磁纳米颗粒上,当加入腺苷时,由于腺苷与其适配体的亲和力大于双链互补力,FAM-sDNA从传感器上解离,磁性分离之后,再将增敏剂乙醇加入溶液中,当腺苷浓度在8.7×10-5～3.4×10-3 mol·L-1范围内,荧光信号与腺苷浓度呈较好的线性关系,检测限达到7.0×10-6mol·L-1.该方法简单、快速、灵敏、且具有良好的选择性,在小分子检测和疾病诊断中具有应用潜力.     

基于适配体的荧光生物传感器对Hg2+的检测技术研究

工业迅速发展所带来的重金属污染，是目前威胁人类健康的重要环境问题之一。Hg²⁺是一种毒性强且污染较为普遍的重金属离子，较低浓度Hg²⁺就会对人体造成很大危害。基于核酸适配体错配结合Hg²⁺的原理，以特异性双链核酸染料SYBR GreenⅠ为荧光指示探针，构建了新型的无标记核酸适配体荧光生物传感器，建立了一种高灵敏度、快速检测Hg²⁺的方法，实现了Hg²⁺高效检测。在优化条件下，传感器对Hg²⁺的检测线性范围为10 nmol/L～1μmol/L,相关系数(r²)为0.99,检出限为1 nmol/L。5种干扰离子(Ca²⁺、Fe²⁺、Cu²⁺、Ni²⁺、Ag⁺)的存在不影响Hg²⁺检测，表明该方法对Hg²⁺检测具有较好的特异性。在自来水样的Hg²⁺加标检测实验中，平...     

基于石墨烯纳米复合材料的有机磷生物传感器

采用还原氧化石墨烯(RGO)/纳米金(AuNPs)/壳聚糖(CS)纳米复合材料固定化乙酰胆碱酯酶(AChE),制备了高灵敏度的电化学生物传感器用于有机磷农药——毒死蜱的检测.CS/SiO2复合溶胶—凝胶网格状的结构为酶的固定化提供了良好的载体,石墨烯纳米复合材料不仅为AChE提供了良好的生物相容环境,且有效提高了传感器的灵敏度.传感器在最佳条件下对毒死蜱检测的线性范围为0.1~10.0ng/mL,检出限为0.05ng/mL(S/N=3).     

适配体与氧化石墨烯相互作用的原理及应用

适配体是一段由25～80个碱基构成的单链寡核苷酸片段,能够作为分子识别物质与蛋白、抗原、氨基酸等目标分子高亲和力和高特异性结合,具有很好的选择性,已广泛应用在生物传感领域。氧化石墨烯具有独特的光学、表面特性,因此在生物分析等领域具有较好的应用前景。在研究中成功发现氧化石墨烯能够猝灭荧光素的荧光,而加入DNA适配使得猝灭后的荧光强度得以部分恢复。基于此种现象,研究氧化石墨烯、DNA适配体、荧光素三者之间的相互作用,优化实验的条件,建立基于氧化石墨烯的免标记荧光定量检测DNA适配体的手段,有着比较好的效果。本论文为更深层次研究荧光适配体传感器提供了快捷简单的DNA适配体检测方法。     

水中SaV GⅣ的提取及荧光定量PCR检出方法研究

札幌病毒(Sapovirus/SaV)是引起急性腹泻的常见病毒,水体是SaV传播的主要途径之一。由于设备和检测水平的限制,水体中病毒的检出费时费力。本文利用分子诊断学中灵敏度高的水中病毒富集技术结合荧光定量PCR方法,对水中SaV GⅣ基因型快速检测方法进行了研究。获得了一套水中病毒富集、核酸提取及分子诊断学检出方法。对比了TaqMan探针法与SYBRGreen染料法在检测中的效果。初步建立了利用水中病毒分离装置富集SaV GⅣ病毒,应用TaqMan探针法与SYBRGreen染料法两种荧光定量PCR方法快速检出SaV GⅣ的分子诊断学方法。     

PCR扩增HBV x基因特征序列检测乙肝病毒DNA

提出了通过扩增特征序列检测乙肝病毒DNA的新方法．根据乙肝病毒DNA保守区的特点,利用Primer Premier 5.0设计出乙肝病毒x基因的特异性引物,并在以血清DNA为模板的聚合酶链反应体系中进行扩增,由此检测待测血清中是否存在乙肝病毒DNA．实验结果表明,该方法较传统的酶联免疫法灵敏,可以检测出酶联免疫法所检测不到的乙肝病毒,具有与免疫印迹一样的准确度;通过与以乙肝病毒s基因为靶序列的PCR反应体系比较,发现乙肝病毒x基因比s基因在序列上更为保守,更适合做乙肝病毒DNA检测的特征序列．     

利用实时荧光定量PCR技术检测转基因烟草

本实验通过荧光染料掺入dsDNA实时监控扩增产物的积累,根据质粒标准品的ct值制成标准曲线,结合标准曲线方程可知未知样品的起始含量,该方法灵敏度高、快捷,可用于基因突变和转基因植株的检测、病毒的检测、遗传疾病和肿瘤疾病的诊断。     

大肠杆菌cDNA文库的构建与质量分析

采用Stratagene公司的cDNA文库构建试剂盒构建大肠杆菌的cDNA文库,从中筛选出与RNaseⅢ有相互作用的蛋白,为研究RNaseⅢ蛋白在原核生物中的作用奠定基础.用Trizol试剂提取大肠杆菌的总RNA,在E.coli poly(A)Polymerase作用下给mRNA特异性地加上poly(A)尾,分离纯化mRNA,利用mRNA作为模板反转录合成双链DNA.经pfx酶补平双链末端,在两端加上EcoRⅠ接头,XhoⅠ酶切消化产生粘性末端.用CHROMA SPIN-400column分级分离纯化cDNA片段,与p TRG XR载体连接后,电击转入XL1-BLUE MRF'菌电转感受态中.得到原始文库,经计算文库的容量达到3×10~6个克隆.用PCR方法测得文库的重组率为100%,插入片段的平均长度基本位于300 bp以上,测定放大文库的滴度为:3.15×1010pfu/m L.说明构建的大肠杆菌cDNA文库质量比较高,适合用于筛选目的基因克隆.     

一种测定微量铜的高灵敏度动力学方法

根据铜对磷钼酸氧化碘化钾反应的催化效应,提出了有效测定痕量铜的动力学方法.并建立了测定条件,铜的浓度在0～0.64μg/mL范围内标准曲线是直线,检测限量为1ng/mL.该方法用于La_2O_3中铜的测定,重现率为95.6％.Rs_o为2.2％.     

SDS、CTAB和PVP法提取香蕉基因组 DNA的比较研究

文章报道了采用SDS法、CTAB法和PVP法提取的香蕉基因组DNA片段大小比较一致,都可直接用于RAPD分析,SDs法提取的DNA纯度较高,吸芽基因组DNA提取率略高于嫩叶,对相同done不同单株间基因组DNA的RAPD分析结果并不表现出明显的多态性.     

碳量子点在重金属离子检测中的应用专利技术综述

碳量子点具有荧光强度高、荧光发射可调、稳定性和水溶性好等特点,在重金属离子检测中表现出了很大的潜力,本文主要对碳量子点在重金属离子检测的应用的专利情况进行综述。     

一种明文嵌入到椭圆曲线上的混合算法

椭圆曲线密码体制(ECC)之所以引起人们的广泛关注,是因为在已知的公钥密码体制中,它具有每bit最高强度的安全性,最快的处理速度和最低的开销,椭圆曲线密码体制中一个重要的问题是明文嵌入,在目前已知的嵌入算法等的基础上,设计了一种快速,高效的算法,表现为在现实上完全可嵌入并且比目前已知的算法都快,从而完整地解决了嵌入明文到椭圆曲线上的问题,为椭圆曲线密码体制用于信息加密做了有益的工作。     

加CdS薄层的白色有机电致发光器件色度的优化

文章讨论了利用蓝色磷光小分子铱配合物[iridium(III)bis-(4',6'-difluorophenylpyridinato)tetrakis(1-pyrazolyl)borate(Fir6)]与黄色荧光染料Rubrene复合发光产生白光的设想.通过引入CdS薄层而增加电子注入,利用结构为ITO/2-TNATA/NPB/Rubrene/CBP/CBP:Fir6/CBP/Bphen/CdS/LiF/Al的器件,通过增加激子阻挡层CBP,获得了色度较好的白色有机电致发光器件.当两层激子阻挡层CBP厚度均为3 nm时,电压从启亮电压3.4 V开始至9 V为止,器件的色坐标从(0.36,0.36)变化到(0.32,0.31),使器件的色度获得了很好的改善.     

实时荧光定量PCR技术在人类细小病毒B19检测中的应用

人类微小病毒B19(Human parvovirus B19,HPV B19)是儿科常见的出疹性疾病——传染性红斑(又称第五病,Erythema infection,EI)的病因.除了这一轻型自限性感染外;B19病毒还可使慢性溶血病病人发生再障危象及急性多关节病.在免疫缺损病人中可造成持续性感染.由于细小病毒B19致病的广泛性和复杂性,目前国际上对该病毒的研究比较活跃.B19可通过呼吸道传播,也可通过输血和使用血液制品传播,从而引起多种疾病.B19病毒的近期感染主要通过IgM抗体的检测,常用捕获法或放射免疫测定,IgG抗体对诊断急性感染无意义,其存在仅表明曾感染过,主要用于血清流行病学调查.目前实验室和临床检测中,最敏感检测病毒的方法是PCR法,通过对B19进行实时荧光定量PCR检测,能突破窗口期的局限性,更利于B19病毒的早期诊断和治疗.本文,笔者根据荧光定量PCR的原理建立了人类细小病毒B19的实时荧光定量PCR检测方法,经过对临床样本的检测,显示建立的方法敏感性高,特异性好,适合B19病毒的筛查和核酸定量检测.     

应用TeX控制功能和图像检测的文本密写

提出一种利用排版工具TeX在文本文件中实现密写的方法。该方法属于“文本-图像”方式,在TeX源文件中修改TeX命令,对一部分单词间空格进行微小的改变,从而将数据嵌入。经编译和转换,生成含隐蔽信息的pdf文件在互联网上传输。隐蔽信息的提取在图像域中进行,根据水平和垂直投影分别检测文字的行和单词之间的空格,恢复出原嵌入数据。密写的安全性取决于从图像中准确检测空格微小差异的能力、文本文件相对于嵌入数据量的大小、采用的加密和编码技术等因素。     

催化动力学荧光法测定痕量甲醛

在硫酸介质存在下,甲醛对溴酸钾氧化偶氮胂Ⅲ反应有催化作用,建立了测定甲醛的动力学荧光分析法.反应在100±1℃的电子恒温水浴锅中加热保持8 m in后迅速取出,用流水冷却至室温5 m in,方法的线形范围在35~570μg/mL,检出限为0.24μg/mL,该法用于检测食品、地下水、饮料、装修材料中痕量甲醛的测定,结果满意.     

催化光度法测定痕量铜的研究——Cu(Ⅱ)—H_2O_2—碱性品红—硫脲体系

本文研究了在氨水介质中,以硫脲为活化剂,Cu(Ⅱ)对H_2O_2。氧化碱性品红褪色反应的催化作用及其动力学条件,从而建立了痕量铜的催化光度分析新方法,方法的检测限为1.2ng/ml,测定范围为0～0.6μg/10ml,用于测定饮用水中痕量铜得到了满意的结果。     

金属膜盒焊缝在线检测图像处理方法研究

<正>无损检测是保证产品质量的关键,也是现代制造业的基础技术之一。随着社会的不断进步,许多传统的检测技术已不能满足现代制造业不断发展的需要,其表现为传统检测技术不能适应现代制造产品种类丰富、实时、在线、非接触、速度快、精度合适和现场抗干扰能力强等特点,不能满足现代制造业的发展需求,在实际中的应用前景越来越窄,在此基础上一门新兴检测技术——视觉检测技术便应运而生。视觉检测技术建立在计算机视觉研究基础上的,可用于工业生产领域的许多方面,如尺寸