化学合成虎纹捕鸟蛛毒珠—Ⅱ基因的克隆

报道了全化学合成虎纹捕鸟蛛毒素－Ⅱ基因,在克隆载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中的克隆。但ＨＷＴＸ－Ⅱ基因在表达载体ｐＧＥＸ－ＫＴ中几乎无表达,根据以前成功地表达全化学合成虎纹捕鸟蛛毒素－Ⅰ基因的实验结果,对在同一表达系统所构建的ＨＷＴＸ－Ⅰ与ＨＷＴＸ－Ⅱ基因的表达产物进行比较,认为ＨＷＴＸ－Ⅰ与ＨＷＴＸ－Ⅱ在原核表达系统的表达行为上的差异有助于我们进一步探讨ＨＷＴＸ－Ⅱ的活性。     

Co（tppho）2Cl2,Co（ctpho）2Cl2的空间结构与磁性质的研究

在Ｍａｒｃｅｌｌａ Ｍａｓｓａｃｅｓｉ等人研究的基础上，利用Ｋｏｉｎｇ－Ｋｒａｍｍｅｒ能级图，比较实验测定的电子吸收光谱，确定了配合物Ｃｏ（ｔｏｐｈｏ）２Ｃｌ２和Ｃｏ（ｃｔｐｈｏ）２Ｃｌ２的空间构型为Ｃ２ｖ，计算的磁矩分别为Ｃｏ（ｔｏｐｈｏ）２Ｃｈ２的μｅｆｆ（理）＝４．４１。Ｃｏ９ｃｔｐｈｏ）２Ｃｌ２的μｅｆｆ（理）－４．３９。     

氨酰心安的极谱行为研究

本文用单扫描示波极谱法建立了测定氨酰心安的新方法．在０．３ｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ２ＨＰＯ４－ＮａＯＨ缓冲溶液中（ｐＨ为１１．７），氨酰心安出现—还原峰，ＥｐＣ为—１．５４Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ），ｉｐｃ在１．０×１０－６～１．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ范围内与氨酰心安的浓度成正比．采用线性扫描和循环伏安法研究其电化学行为，该体系为准可逆吸附波．     

ER、PR、AR受体和C-erbB-2、p16、p53基因蛋白在乳腺癌中的表达

为了评价雌激素受体（ＥｓｔｒｏｇｅｎＲｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＲ）、孕激素受体（ＰｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅＲｅｃｅｐｔｏｒＰＲ）、雄激素受体（ＡｎｄｒｏｇｅｎＲｅｃｅｐｔｏｒ,ＡＲ）和癌基因（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ）Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｏｎｃｏｐｒｏｔｅｉｎ（Ｃ－ｅｒｂＢ－２）,抑癌基因（ＴｕｍｏｒＳｕｐｐｒｅｓｓｏｒＧｅｎｅｓ）ｐ５３蛋白（Ｐ５３）和Ｐ１６蛋白在乳腺癌发生发展中的作用,以及上述蛋白检测对诊断与治疗     

高效液相色谱meso－四（4－三甲铰基苯基）－卟啉柱前衍生法分离测定铜（Ⅱ）和锌（Ⅱ）

以ｍｅｓｏ－四（４－三甲铵基苯基）－卟啉（Ｈ２ＴＡＰＰ）为柱前衍生试剂，建立了一种简便、快速分离和测定Ｃｕ（Ⅱ）和Ｚｎ（Ⅱ）的高效液相色谱法。３分钟内，以甲醇／水＝４０／６０（Ｖ／Ｖ）为洗脱液，在Ｓｈｉｍ—ｐａｃｋＷＣＸ—１（５μｍ，５０×４．０ｍｍｉ．ｄ．）柱上成功地分离并测定Ｃｕ（Ⅱ）和Ｚｎ（Ⅱ），检测极限可达５．０×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ。以含４０％甲醇的乙二胺缓冲液为洗脱剂，Ｈ２ＴＡＰＰ及其金属配合物在ＳｐｅｒｉｓｏｒｂＳＣＸ柱（１０μｍ，２５０×４．０ｍｍｉ．ｄ．）和Ｓｈｉｍ—ＰａｃｋＷＣＸ－１柱上的离子交换色谱行为也被考察。该方法具有灵敏度高，操作简便的特点，可用于样品中痕量钢、锌的分析。     

虎纹捕鸟蛛（Selenocosimia huwena）粗毒对蟾蜍神经肌肉接头传递的影响

１０－５～１０－４ｇ／ｍｌ虎纹捕鸟蛛粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本有阻遏作用，１×１０－４ｇ／ｍｌ粗毒发生阻断的时间为３８ｍｉｎ，但不改变神经干动作电位，不影响肌肉对直接刺激的反应。阻断后肌肉对间接强直刺激仍可发生强直收缩；粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本的阻断作用表现为：初期４～５０秒的收缩增强继而转向抑制；粗毒可对抗箭毒的阻断作用；蟾蜍在体坐骨神经肌肉标本可被粗毒阻断，但阻断后可以恢复；粗毒不改变蛙腹直肌对Ａｃｈ的敏感性，粗毒中含有拟胆碱成份。箭毒可以阻止粗毒对蛙腹直肌的拟胆碱效应；该粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本的阻遏作用发生在神经肌肉接头，粗毒中含有拟胆碱组份，此组份可能通过后膜去极化阻断神经肌肉接头。     

钼－棓酸配位吸附波的研究

在ｐＨ４．５的ＮａＡｃ－Ｈ２ＳＯ４缓冲溶液中，用单扫描示波极谱法可得到钼－棓酸配位化合物吸附波，峰电位为－０．８０Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ），二次导数波高与钼浓度在４．０×１０－８～８．０×１０－６ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系，最低检出限达１．０×１０－８ｍｏｌ／Ｌ．方法已应用于水样、金属样和食用植物中微量钼的测定，结果满意．利用线性扫描伏安法等对配位化物的伏安行为进行了较系统研究．     

锗（Ⅳ）－3，4－二羟基苯甲酸－VOSO_4－EDTA体系极谱吸附催化波的研究

在ｐＨ３．０的０．１ｍｏｌ／Ｌ氯乙酸盐缓冲溶液中，Ｇｅ（Ⅳ）－３，４－二羟基苯甲酸－ＶＯＳＯ４－ＥＤＴＡ体系产生一灵敏的吸附平行催化波，峰电位在－０．７０Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ）二次导数波高与锗浓度在１．４×１０－１０～４．３×１０－７ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系，检测限为８×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ．详细研究了电极反应机理，用拟定的方法测定了矿泉水中的痕量锗，结果满意．     

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ天然突变体的分离纯化与鉴定

通过离子交换及反相HPLC，从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离得到一种虎纹毒素-Ⅰ天然突变体，MALDI-TOF质谱仪分析表明该多肽天然突变体分子量为3636 Da．Edman测序结合串联质谱和氨基酸组成分析鉴定出该天然突变体的序列为H2N-ACKGV FDACT PGKNE CCPNR VCSDK HKWCK WQ-COOH，其中6个Cys形成3对二硫键，小鼠脑室注射实验表明，该天然突变体能使小鼠致死，但不能阻断小鼠膈神经-膈肌标本的神经肌肉接头传递，本研究结果表明，K32残基对于HWTX-Ⅰ的生物学活性有关键性作用。     

锡(Ⅳ)邻苯三酚红硒(Ⅳ)体系极谱吸附催化波的研究

在含有０．０３ｍｏｌ／ＬＫＣｌ、４．０×１０－５ｍｏｌ／ＬＳｅ（Ⅳ）的０．０１６ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４溶液（ｐＨ１．８）中,锡（Ⅳ）邻苯三酚红配合物产生一灵敏的二次导数极谱波,峰电位为－０．４３Ｖ（ｖｓ·ＳＣＥ）,波高与锡浓度在１．７×１０－９～６．７×１０－７ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系,检测限可达８×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ．研究了极谱波的性质和电极反应机理．方法已成功地应用于奶茶中微量锡的测定,结果满意．     

大豆花瓣蛋白双向电泳分析技术体系的优化

双向电泳技术体系的优化是蛋白质组学研究的前提和基础.本文针对大豆花瓣含有大量色素和酚等干扰物质的现象,比较6种蛋白提取方法和2种蛋白裂解液配方,优化胶条范围和等电聚焦程序.结果表明:pH为4～7 IPG胶条适于大豆全花蛋白分离;TCA/丙酮+2D Clean Up试剂盒法去除杂质充分,提取的蛋白含量高、纯度好、分离效果佳、耗时短;蛋白裂解液采用5 mol/L尿素,2 M硫脲,2%CHAPS,2%SB3-10,5 mmol/L TCEP,20 mmol/L DTT,0.5%IPG Buffer为好;增加离心转速、时间和丙酮清洗次数能促进蛋白溶解,增加蛋白纯度,初步建立了一套适合大豆全花蛋白双向电泳分析的技术体系.     

磷酸缓冲液浸种对番茄幼苗抗冷性的影响

用 ７．５ ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ５．８的磷酸缓冲液浸番茄种子 ５ ｈ，能促进种子萌发和幼苗生长．当幼苗在低温胁迫（５℃± １℃， ４８ ｈ）时，磷酸缓冲液能有效地降低相对电导车、减缓ＭＤＡ的积累，维持较高的ＴＴＣ还原力和促进脯氨酸积累．表明磷酸缓冲液浸种能提高番茄幼苗对冷害的抗性．     

铜(Ⅱ)-叶酸的配位化学研究

研究了铜(Ⅱ)-叶酸配合物的形成条件,在磷酸盐缓冲溶液中(pH5.00),Cu(Ⅱ)可以与叶酸形成稳定配合物,配比分别为1∶1和1∶2,条件稳定常数分别为β′1=1.25×103,β′2=2.50×106.     

阴离子间接紫外光度单柱离子色谱快速分离方法研究

本工作对阴离子间接紫外光度单柱离子色谱快速分离方法进行了研究。考察了柱长和洗脱液组成对阴离子分离的影响，并对井水、坝水、自来水和雪水中无机阴离子进行了快速分离。     

磷酸缓冲液对大豆种子萌发期抗冷性的影响

用0.01mol/L的pH5.8磷酸缓冲液浸种9h,可在大豆种子萌发期低温胁迫((3±1）℃,24h)条件下,能有效地降低相对电导率,水溶性蛋白含量和稀碱提取蛋白含量明显增加,脯氨酸含量也显著增加.表明磷酸缓冲液浸种对大豆种子萌发期在低温胁迫时,具有防护作用.     

文多灵与DNA相互作用的光谱研究

在pH为7．4的Tris—HCl缓冲溶液中，应用紫外光谱法和荧光光谱法对文多灵与鲱鱼精DNA分子间的相互作用进行了研究．研究结果表明，DNA与文多灵存在较强的相互作用，计算了25℃和40℃两个不同温度下文多灵与DNA的结合常数和结合位点数分别为5．26×10^3L／mol、1．0411和7．77×10^3L／mol、1．056．紫外光谱实验结果表明，DNA的加入可使文多灵252nm处的紫外吸收峰发生显著升高和蓝移；荧光探针实验表明文多灵不能使小檗碱-DNA体系的荧光发生猝灭，证明文多灵是以沟槽结合的方式与DNA结合．     

一个新颖的类光芬顿体系光催化降解DMP

一个以Keggin型铁取代杂多阴离子PW11O39Fe（Ⅲ）（H2O）^4-[PW11Fe（Ⅲ）（H2O）]为光催化剂的新颖类光芬顿体系被用于邻苯二甲酸二甲酯（DMP）的光催化降解。实验结果表明,在pH6.86的含有0.1mmol·L^-1 DMP＋1.0mmol·L^-1PW11Fe（Ⅲ）（H2O）＋3.0mmol·L^-1H2O2。磷酸盐缓冲溶液中,反应80minDMP的降解率达到100％,总有机碳去除率为43％,并详细考察了溶液pH、初始过氧化氢浓度和PW11Fe（Ⅲ）（H2O）浓度对降解效率的影响。提出了过氧化氢存在和缺失条件下的光催化机制,这个新颖的类光芬顿体系为实际的水处理提供了潜在的应用。     

细胞转染条件的优化

通过对3种细胞转染方法(电穿孔法，磷酸钙法，阳离子性的脂质体法)的比较及优化，获得了理想的转染率，以进一步从细胞水平研究基因表达调控及小鼠ES细胞打靶．电压在350～450V，电穿孔法转染率与电压呈线性关系；用HEPES缓冲液能显著提高磷酸钙法转染率；低质量的DNA与细胞过长时间接触降低阳离子性脂质体法的转染效率．根据各种方法的特点选择和优化合适的细胞转染方法，可以提高哺乳动物细胞的转染率．     

微乳液毛细管电动色谱法测定雷公藤炮制品中雷公藤甲素的含量

利用微乳液毛细管电动色谱法测定不同雷公藤炮制品中雷公藤甲素的含量．在含1％（w／v）十二烷基硫酸钠（SDS）,30／;（v／v）正丁醇,1％（v／v）乙酸乙酯和96％（v／v）5mmol／L硼砂-10mmol／L磷酸二氢钠溶液（pH8．5）的微乳体系下,雷公藤炮制品中的雷公藤甲素在10min内得到良好的分离与检测．不同雷公藤炮制品中雷公藤甲素含量的测定结果：其中生品中的含量最高,为2．0085g／g,其余炮制品雷公藤甲素的含量分别为清炒品1．7166g／g,酒炙品1．5412g／g,水煮品1．7584g／g．     

血红蛋白在室温离子液．壳聚糖．碳纳米管复合材料修饰玻碳电极上的直接电化学行为

制备了1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐离子液（[BMIM]PR）,壳聚糖（CS）-多壁碳纳米管（MWNT）复合材料修饰的玻碳电极（[BMIM]PF6,／CS-MWNT／GCE）,并用于血红蛋白（Hb）的固定及直接电化学研究．电化学实验表明,[BMIM]PF6／CS-MWNT复合膜能大大提高电极的有效表面积及电子传导性能．在pH7．0的磷酸盐缓冲液（PBS）中,Hb在修饰电极表面呈现一对可逆的氧化还原峰,对应于血红蛋白辅基血红素中Fe（Ⅲ）／Fe（Ⅱ）的氧化还原电对,式量电位（Eθ）为．0．451V,传递系数（n）和直接电子转移的速率常数（k）分别为0．427和0．065s^-1．在pH5．0-pH9．0的范围内,式量电位和pH值有良好的线性关系,其斜率为-40．6mV／pH,这表明Hb一个电子的传递伴随着一个质子的转移．同时,该修饰电极对H202表现出良好的电催化性能,构造了一种具有良好稳定性和重现性的新型第三代生物传感器．