变性剂和巯基修饰对黄精凝集素Ⅱ构象和活性的影响

采用圆二色谱、荧光光谱，研究了黄精凝集素Ⅱ（Polygonatum cyrtonema Hua.LectinⅡ,PCLⅡ）在4mol/L和6mol/L盐酸胍中，以及巯基修饰后，其活性和分子构象的变化关系，研究结果表明：PCL Ⅱ是一种稳定的蛋白质，巯基剂虽不影响其活性，但可使其分子构象发生变化，去除修饰剂后其结构部分能够恢复。在4mol/L盐酸胍中，PCL Ⅱ活性及构象可发生很大变化，去除盐酸胍后其活性恢复；6mol/L盐酸胍中，呈现典型的无规卷曲构象，活性完全丧失，去除盐酸胍后活性仍不能恢复，表明活性中心已遭到不可逆的破坏。     

白芸豆凝集素的分子稳定性和光谱性质研究

经缓冲液抽提、CM-Sepharose、DEAE-Sepharose离子交换及Sephacryl S-200分子筛层析,从白芸豆种子纯化得到白芸豆凝集素(Phaseolus coccineus lectin,PCL)。SDS-PAGE和Sephacryl S-200凝胶过滤分析表明白芸豆凝集素是由两个30 kDa的单体组成的分子量约为56 kDa的同源二聚体蛋白。凝血活性结果表明白芸豆凝集素能凝集的兔血细胞和人ABO血型细胞,无血型专一性。其凝血活性在80 ℃以下和pH 3.0-10.0时保持稳定。脲、盐酸胍对PCL凝血活性的影响表明,随着变性剂浓度的升高,凝血活性逐渐丧失。不同温度、pH和不同浓度变性剂条件下PCL的荧光光谱分析表明PCL变性过程的阶段性。     

一支箭凝集素构象与生物学活性的关系研究

采用荧光光谱研究了一支箭凝集素(OPA)在不同温度,pH值以及不同淬灭剂作用时,其活性和分子构象变化的关系,结果表明:OPA具有较强的温度和酸碱度的耐受性,分子构象也无较大变化,但在pH 12时,其分子构象发生较大变化,活性也基本丧失.荧光淬灭剂丙烯酰胺和琥珀酰亚胺对OPA中Trp淬灭程度达100%,KI淬灭约62.5%的Trp荧光.表明OPA发射荧光的氨基酸残基大部分位于分子表面,少部分位于分子内部疏水环境中,且发荧光氨基酸所处微环境带电荷.     

患病草鱼主要消化酶活性变化的研究

分析了健康鱼和患肠炎病草鱼的淀粉酶和蛋白酶活性。其淀粉酶最适pH值均为7.2，蛋白酶最适pH值分别为7．0和6．0；其淀粉酶最适温度分别为30℃和35℃，蛋白酶最适温度均为40℃，且患肠炎病草鱼蛋白酶和淀粉酶活性较健康鱼低，但pH值在5．7以下时，患病鱼的蛋白酶活性较健康鱼高；温度在28℃以下时，患病鱼的淀粉酶活性比健康鱼高。     

温度和pH值对厌氧氨氧化微生物活性的影响分析

研究了温度和pH值对厌氧氨氧化微生物活性的影响,测定了不同温度和pH值时,厌氧氨氧化微生物的活性.结果表明,该微生物的最佳反应温度和pH值分别为30℃和7.80.     

温度对神仙鱼主要消化酶活力的影响

在不同的反应温度和不同的饲养水温条件下,研究神仙鱼3种主要消化酶的活性.结果表明,在pH7.5、反应时间10min时,蛋白酶活性的最适反应温度为45℃;在pH6.9、反应时间5min时,淀粉酶的最适反应温度为40℃;在pH7.5、反应时间60min时,脂肪酶的最适反应温度为30℃.在16～25℃养殖水温条件下,3种酶的活性随水温的降低而降低.蛋白酶和脂肪酶的最适水温均为25℃,但均与22℃时的差异不显著(P>0.05);淀粉酶活性的最适水温为22℃,但与25℃时的差异不显著(P>0.05).     

一株聚己内酯降解真菌的筛选、鉴定及降解特性研究

通过唯一碳源法从活性污泥中分离了一株降解聚己内酯(PCL)的真菌DSYD05,并从形态学和分子生物学两方面鉴定该菌株为Penicillium oxalicum,同时对菌株产PCL降解酶的发酵条件进行了优化。实验结果显示,在温度为28℃、PCL含量为0.2%、培养基初始pH值为7.0、装液量为50mL、发酵5d时,Penicillium oxalicum DSYD05所产的PCL解聚酶活力最高。     

以铁氰化钾为受体的高释氧活性的光合系统Ⅱ(PSⅡ)颗粒的研究

光合释氧是光合作用研究的难点之一.自八十年代以来,由于高释氧活性的PSⅡ颗粒的成功分离,使这方面工作有了很大进展.我们以菠菜为材料,国产去垢剂乳化剂OP为处理试剂,并对前制备方法作了改进,得到了以铁氰化钾为电子受体、释氧活性一般在400～800μmol O_2/mg chl.h的PSⅡ颗粒,比国外类似报道的结果高3～6倍. 该颗粒在pH6.5、温度低于30℃时较稳定,在低于零下30℃时保存三个月活性几乎不变.但在pH6.5、温度高于35℃和pH低于4.5或高于7.8、温度在15～30℃时,活性下降较快.电镜观察到该颗粒是直径均约为0.2μ的球形囊体,与国外报道的双层膜片层颗粒有明显的差异.该颗粒的P700信号很弱,Mehler反应活性很低(约为20μmolO_2/mg chl.h),光合系统Ⅱ与光合系统Ⅰ的活性之比大于25,表明了PSⅡ颗粒是比较纯的.     

大熊猫肌酸激酶热变性中活性与构象变化的比较

比较了大熊猫肌酸激酶在各种不同温度下热变性时，活性变化与构象变化的速度常数。结果表明在较低温度下，酶的失活速度与构象变化速度相当．而在较高温度下变性时酶的失活速度快于构象变化速度。这表明酶分子的活性部位的微区构象比整个分子的构象具有更大的易变性或柔性。     

温度、酸碱度和变性剂对黄花石蒜凝集素活性和构象的影响

采用荧光光谱研究了不同温度、pH和变性剂对黄花石蒜凝集素（Lycoris aurea agglutinin,简称LAA）凝血活性和分子构象的变化关系,结果表明：LAA具有较强的温度和酸碱度的耐受性,经过3种变性剂的处理都能使LAA分子构象发生不同程度的变化并导致活性的丧失,浓度为6 mol/L的盐酸胍和脲,20 mmol/L的SDS可以使LAA完全丧失凝血活性,荧光光谱的变化表明了这种变性过程具有阶段性.     

几种环境条件对唾液淀粉酶活性的影响

讨论了不同条件下唾液淀粉酶活性的差异。实验结果表明，影响唾液淀粉酶活性的因素很多，必须在各种条件适宜的情况下，才能发挥其最佳的催化作用；淀粉酶具有高度专一性，其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素影响；每个人产生唾液淀粉酶的量不同，活性强弱也有差异。     

不同温度和pH值对瘤背石磺(Onchidium verruculatum Cuvier)消化酶活性的影响

研究了温度和pH值对瘤背石磺(Onchidium verruculatum Cuvier)肠淀粉酶、肝胰腺淀粉酶和胃淀粉酶以及相应的纤维素酶活性的影响.不同温度和pH值对瘤背石磺消化酶活性的影响显著(P<0.05).当温度在5-75℃时,肠淀粉酶和纤维素酶分别在35℃和30℃时活性较高;肝胰腺淀粉酶和纤维素酶分别在35-45℃和50℃时活性较高;胃淀粉酶活性在25-45℃维持较高水平,随后随温度的升高而下降,纤维素酶活性在50℃时较高.在pH为3.0-8.0范围内,肠淀粉酶和纤维素酶的最适pH值均为6.0;肝胰腺淀粉酶和纤维素酶的最适pH值分别为6.9和5.4;胃淀粉酶和纤维素酶的最适pH值分别为6.5和6.0.在适宜温度和pH条件下,肠淀粉酶、肝胰腺淀粉酶和胃淀粉酶活性均远大于肠纤维素酶、肝胰腺纤维素酶和胃纤维素酶.     

超氧化物歧化酶模拟物--铜(Ⅱ)氨基酸配合物的初步研究

为了获得具有较高超氧化物歧化酶(SOD)活性的物质,合成了铜(Ⅱ)甘氨酸配合物[Cu(gly)2]和铜(Ⅱ)谷氨酸配合物[Cuglu·H2O];对模拟物进行了红外光谱检测和元素分析,初步确定了它的分子组成;用改进的核黄素光还原氯化硝基四氮唑蓝(NBT)法测定了同一温度下不同浓度以及相同浓度不同温度下模拟物的活性,并与天然SOD的活性进行了比较.实验结果表明:合成的配合物在水溶液中具有显著的SOD样活性.     

枯草杆菌SBS6中一种纤溶酶的纯化及部分特性

从枯草杆菌SBS6菌株发酵上清液中分离得到电泳纯的纤溶酶，经SDS—PAGE和凝胶过滤测得其分子质量为31ku，最适pH8．9，最适温度为50oC，酶在60℃下pH5～12范围内相当稳定，Ca^2 ，Mg^2 ，Zn^2 ，Mn^2 等离子对酶的溶解血纤维活性无明显影响，Fe^2 和Fe^3 分别抑制酶活性的17％和20%。     

鱼腥草中酮类活性成分与牛血清蛋白相互作用特征

运用荧光光谱和紫外光谱,分别在血清蛋白的等电点以下(pH3.78)和以上(pH7.40),研究了鱼腥草的活性成分甲基正壬酮(2UC)和十二酮(2DC)与牛血清蛋白(BSA)的相互作用.结果显示在等电点前后,(2UC)和(2DC)与BSA的结合呈现可饱和模式,但对荧光的猝灭模式不同,而且结合的饱和浓度也不同.285 K和pH7.40下,二者在浓度较低时呈现明显的正协同作用,而在301 K时没有这种现象.计算了不同温度下结合的热力学参数△H0,△G0,△S0,结果显示疏水作用是主要的作用力.猝灭常数显示出酸度、温度和烃链长度的依赖性.考察了常见金属离子和中药活性成分对结合的影响.结果显示当共存锌离子、ANS和甘草次酸时,两种成分的加入会引起最大荧光发射波长的强烈兰移.试验表明脂肪酸2结合位(fatty site 2)是它们的一个结合位点,而药物结合位点Ⅱ(siteⅡ)可能是它们的另一结合位点.     

磁场对纤维素酶的性及构象的影响

以羧甲基纤维素钠（CMC）为底物评价纤维素酶的活性,研究了不同条件下静磁场对酶的活性及构象的影响。9℃,pH4.0条件下磁化,其活性及荧光光谱均不同明显变化;但若改变反应时的pH,可使活性增加达16.4%;并发现磁处理后的酶有滞后效应及可逆性,较高温度下,磁化处理酶液,其活性及构橡均发生不同程度的变化,且对其抑制动力学 混合型抑制模式;其构象变化也基本上随失活的增加荧光强度增大。     

盐度、温度和pH对2株海南地衣芽孢杆菌相对蛋白酶活性的影响

采用脱脂牛奶平板法,测定了不同盐度、温度和pH对2株分离白海南热带海水养殖系统的地衣芽孢杆菌（Bacillus lichen@rmis）Pb．WC09001和Pb—WC09002的相对蛋白酶活性的影响．结果表明：随着盐度的增加,2个菌株的相对蛋白酶活性都趋于减弱,当盐度增加到50时,仅Pb-WC09001还存在一定的酶活性,其相对蛋白酶活性为1．56U·mL-1,说明Pb—WC09001对高盐度环境的适应性更强．此外,还测定了在18～38℃（以4℃为梯度差）范围内菌株的相对蛋白酶活性,当在与菌体培养相同的温度下测定培养液的酶活时,Pb-WC09001与Pb—WC09002酶活性最高的温度均为34℃;当在30℃测定2个菌株在不同温度下的培养液酶活时,酶活性最高的培养液所对应的培养温度分别为22℃和30℃,说明这2个菌株在相同温度下可产生不同的蛋白酶,同时,Pb-WC09001在低温环境下的相对酶活性强于Pb-WC09002．在30℃、盐度30、菌体终浓度为2×10^3／mL时,Pb-WC09001在pH8．0、Pb—WC09002在pH7．5时的酶活性最高,相对酶活均为2．74U·mL-1,因此,Pb-WC09001对海水环境（pH8．0—8．4）的适应性更强．     

温度和pH值对螺旋藻AMY活性的影响

采用3,5-二硝基水杨酸（DNS）法对内蒙古毛乌素沙地碱湖的钝顶螺旋藻S1与国外引进的钝顶螺旋藻S2和极大螺旋藻S3的淀粉酶（AMY）活性，及温度和pH值对其影响进行了初步的比较研究。结果表明：S1、S2和S3的AMY活性在25℃、pH5．6时分别为71．7U／g FW、44．1U／g FW和54．6U／gFW；最适温度均为40℃；最适值均为pH5．6。我国特有的S1AMY对温度和pH适应范围宽，且在低温、高温、强酸和强碱下的活性比引进种的高。     

金属离子和变性剂对黄精凝集素Ⅱ构象与功能的影响

黄精凝集素II（Polygonatum cyrtonema Hua.Lectin II,PCLII)具有323nm的荧光发射峰和281．6nm的激发峰,其远紫外圆二色谱（CD谱）显示224nm负峰,分子中含有17．3％的α螺旋和45．8％的β折叠,在10mmol/L的SDS中,PCL II完全丧失兔红细胞凝集能力及促T－淋巴细胞有丝分裂活性,CD谱呈现双负峰的a螺旋构象,去除SDS后,则呈无规卷曲构象,此时,荧光发射峰红移而激发峰蓝移,PCL II仍完全失活,在EDTANa2溶液中,PCL II凝集红细胞能力及促淋巴细胞有丝分裂活性完全丧失,去除EDTA后,红细胞凝集活性完全恢复,但仍失去促淋巴细胞有丝分裂能力,PCL II二级结构变化不大,荧光光谱的变化表明微环境受到影响。     

白芸豆凝集素的分子稳定性和光谱性质研究

经缓冲液抽提、CM-Sepharose、DEAE-Sepharose离子交换及Sephacryl S-200分子筛层析,从白芸豆种子纯化得到白芸豆凝集素(Phaseolus coccineus lectin,PCL).SDS-PAGE和Sephacryl S-200凝胶过滤分析表明白芸豆凝集素是由两个30 kD的单体组成的分子量约为56 kD的同源二聚体蛋白.凝血活性结果表明白芸豆凝集素能凝集的兔血细胞和人ABO血型细胞,无血型专一性.其凝血活性在80 ℃以下和pH 3.0~10.0时保持稳定.脲、盐