可降解蓖麻饼粕的蛋白酶产生菌筛选及产酶条件优化

利用酪素平板透明圈法初筛和测蛋白酶活力复筛,从分离自蓖麻饼粕和实验室保存的菌株中筛选出1株高产蛋白酶菌株P3-2,对其产酶条件进行了研究。结果表明,最适碳源为麦芽糖,最适氮源为蓖麻饼粕,Na+对产酶具有促进作用,培养基初始p H值为7.5时出现产酶高峰,最适接种量为4%,培养到36 h和84 h时有两个产酶高峰。经正交试验优化,得到较佳产酶培养基组成:2.0%麦芽糖、1.0%蓖麻饼粕及1.0%Na Cl。     

光合细菌3号菌株产类胡萝卜素培养基优化

探讨了光合细菌3号菌株产类胡萝卜素培养基的优化以及类胡萝卜素的提取.首先对3号菌株的60%蔗糖悬液进行全波长扫描,确定了3号菌株在457nm波长下出现最大吸收峰,因此用457nm波长下的OD值作为类胡萝卜素相对含量高低的指标.通过改变培养基碳源、氮源和盐度确定最佳的碳源、氮源和盐度,得出最优碳源为蔗糖,最优氮源为硝酸铵,最适盐度为0.1‰.利用最佳培养基培养3号菌株,用皂化法分离纯化类胡萝卜素,得类胡萝卜素纯品,提取率为30.06mg.g-1.     

一株珙桐耐铅、镉内生真菌的分离鉴定及生物学特性分析

从珙桐2年生健康实生苗的茎段中分离到一株耐铅、镉内生真菌。经形态学观察,该菌初步鉴定为链格孢属真菌。该菌的最佳培养基为PDA培养基。温度、p H、碳源和氮源对其生长有一定影响。在温度为15~35℃时均能生长,最适温度为25~30℃。该菌能适应较宽的p H值范围,在p H值5~9的条件下生长旺盛。多种碳源和氮源均能促进该菌生长,最佳的碳源为葡萄糖、可溶性淀粉、甘露糖和蔗糖,最佳的氮源为硝酸钠。该菌能在含1 000 mg/L Pb(NO2)2或100 mg/L Cd Cl2.2.5H2O培养基上生长,表明该菌在铅、镉胁迫下仍有较强的生长能力。     

酿酒酵母呼吸突变株的高糖胁迫反应研究

【目的】研究野生型甘蔗糖蜜发酵高产乙醇菌株MF1002及其糖分利用能力显著提高的呼吸突变菌株MF15c在高糖胁迫下的生理特性变化。【方法】测定在高糖胁迫下菌株的生长速率、出芽率、乙醇产量和超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化氢酶活力、过氧化物酶活力以及细胞质和线粒体的ATP酶活力。【结果】在葡萄糖浓度分别为25%、30%和40%的高糖培养基中,MF15c菌株生长和乙醇发酵受抑制的程度均明显低于MF1002。当葡萄糖浓度为30%和40%时,MF15c的最大菌体数目、最高出芽率和乙醇发酵浓度等均显著高于MF1002。当葡萄糖浓度为30%时,两菌株胞内的SOD活力、过氧化氢酶活力、过氧化物酶活力以及细胞质和线粒体的ATP酶活力均显著上升。其中,MF15c的胞内SOD活力、胞内过氧化物酶活力、细胞质ATP酶活力和线粒体ATP酶活力在高糖胁迫下的上升幅度显著高于MF1002。【结论】MF15c较MF1002具有更强的高糖耐受能力。SOD活力、过氧化氢酶活力、过氧化物酶活力以及细胞质和线粒体的ATP酶均参与了两菌株的高糖胁迫反应,胞内SOD活力、胞内过氧化物酶活力、细胞质ATP酶活力和线粒体ATP酶活力可能与MF15c菌株的高糖耐受能力有关,可作为进一步改造该菌株的指导指标。     

高效苯酚降解菌的筛选及其降解特性分析

以苯酚为唯一碳源利用梯度富集培养,从湖北省孝昌县污水处理厂曝气池的活性污泥中分离筛选出一株高效苯酚降解菌株,经16S r DNA序列分析,初步鉴定菌株为Rhodococcus biphenylivorans,命名为Rhodococcus biphenylivorans sp.B403(嗜联苯红球菌B403).该菌株在含苯酚500 mg/L的无机盐培养基处理30 h后,其OD600达到最高0. 974,苯酚降解率达到98%.比较不同培养基的菌株生长曲线和降解曲线发现,在苯酚-LB-无机盐混合培养基中菌株稳定期生物量比LB培养基高出30%～40%,15 h降解苯酚效率达到99%以上,18 h内实现苯酚完全降解,苯酚降解效率最佳,显著高于目前已报道菌株.说明在其他有机碳源存在的条件下,更有利于嗜联苯红球菌B403生长.该菌株可用于含酚类污染物的有机废水处理及有机质丰富的酚类污染土壤修复.     

一株烃降解菌的分离鉴定及耐盐机制

随着科学技术与工业经济的发展,石油的开采量也在逐年提升,在其开采以及加工处理过程中会产生大量含有较高盐分的含油废水难以处理,因此对高耐盐度烃类降解菌的筛选极为重要。从新疆油田石油污染土壤中分离得到一株以柴油为唯一碳源的耐盐菌株HX-2,通过生理生化特征、菌体形态观察及16S rRNA基因序列分析,鉴定菌株HX-2属于红球菌属(Rhodococcus),该菌株可耐受的最高盐度(Na Cl)和柴油浓度分别为10%和8 000 mg/L。菌株生长及降解的最适p H和温度分别为7. 0和25℃,在盐度为5%以内、p H为7. 0、温度为25℃、菌种投加量为2%的条件下,初始浓度为4 000 mg/L的柴油经4 d降解后,去除率均超过50%以上,且盐度为10%仍有10. 3%的降解率。对其耐盐机制进行分析表明细胞内相容性物质(甜菜碱)的含量随着盐浓度的增加而增大,说明甜菜碱的积累是菌株抵抗高盐浓度的主要机制。通过外源添加甜菜碱可以改善菌株在高盐条件下的生长情况并提高柴油降解率。因此,菌株HX-2是一株在盐渍化烃类污染修复方面极具应用潜力的烃降解菌。     

一株高温解烃菌的筛选及性能评价

从油田产出水中筛选出一株能在高温条件下以原油为碳源的烃类降解菌D-1,通过形态、生理生化特征分析,确定该菌株为芽孢杆菌属.测定了pH、温度和盐度对降解能力的影响,确定了最佳生长条件,并用该菌株进行了物模驱油实验.实验结果表明:该菌最佳pH和温度分别为6.0和60℃;其中盐度为0.2%时,降解率达到64.3%,对盐离子具有较好的耐受性;在物理模拟驱油实验中培养10 d后可提高原油采收率5.6%.菌株D-1在微生物采油中具有很好的应用前景.     

一株野生双孢蘑菇生物学特性研究

本实验室分离到一株野生蘑菇,通过形态观察结合ITS方法初步鉴定为双孢蘑菇,命名为G1菌株。主要利用固体平板培养研究了该菌株对碳源和氮源的营养需求、麦粒培养基上的生长情况以及在不同含水量培养料条件下的菌丝生长情况,结果表明:(1)在供试的碳源和氮源中,G1菌株菌丝生长的最适碳源为麦芽糖,最适氮源为蛋白胨和黄豆粉,最适碳氮比为30∶1。(2)G1菌株在麦粒培养基上生长正常,生长速度为(3.980±0.552)mm/d。(3)G1菌株菌丝在含水量为55%~75%培养料上均能生长,最适含水量为65%。     

黄河三角洲湿地木霉分离与耐盐活性鉴定

木霉菌可以提高植物的抗逆性。为了获得耐盐活性好的木霉菌株,本研究从盐渍化严重的山东东营黄河三角洲湿地中采集土样和水样,分离并筛选了耐盐的木霉菌株,鉴定木霉菌株的耐盐活性。结果表明:黄河三角洲湿地48个样品共分离获得64株木霉,木霉数量与土壤深度呈负相关,与盐度没有明显相关性;通过不同浓度Na Cl胁迫下木霉菌株在固体培养基(PDA)和液体培养基(PDW)中的生长和产孢情况观察,从64株木霉中鉴定出6株具有高耐盐活性的木霉菌株;其中3株木霉(TW-304、TW-327和TW-353)在1 000 mmol/L Na Cl胁迫下,菌丝生长与对照相比,耐盐活性达到50%以上,具有极高的耐盐性;通过形态学和分子学鉴定显示TW-304、TW-327和TW-353三株木霉分别为哈茨木霉、深绿木霉、哈茨木霉。该研究筛选获得的耐盐木霉菌株为耐盐微生物菌剂的开发利用提供新的种质资源。     

海洋细菌NTa发酵产琼胶酶条件的初步优化

利用选择性培养基从厦门红树林泥土样品中分离得到一株具有较高琼胶酶活力的海洋细菌NTa,通过16S rRNA分析,将该菌株归属为Stenotrophomonas sp.NTa.对该菌株发酵产琼胶酶的条件进行初步优化,结果表明:菌株NTa产琼胶酶的最佳碳源是琼脂,氮源是酵母浸膏,NaCl的质量分数为5%,在28 ℃发酵培养40 h,发酵液的酶活力达到1.98 U/mL,比优化前提高了37.35%.     

一株溴氰菊酯降解菌的筛选及其降解特性研究

从农药厂废水排放口附近的污泥中分离到一株能以溴氰菊酯为唯一碳源生长的细菌DE29.其在溴氰菊酯浓度为100 mg/L的培养基中摇床7 d后的降解率达到96.32%,具有较高的研究及应用价值.通过对其生理生化试验和16SrDNA序列比对分析,鉴定该菌株为假单胞菌属(P seudomonas sp.).进一步分析了pH值、温度、盐度、接菌量几个因素对菌株降解溴氰菊酯能力的影响.结果表明,DE29菌株在温度为30℃,pH值为7.0,接菌量为10%,盐度为0的条件下具有较高的降解率.     

石油降解菌的筛选及其降解特性

为研究石油降解菌对海上溢油污染的降解能力,从大连石化隔油池污水中分离、纯化出一株以柴油为唯一碳源的石油降解菌DW-1.生理生化试验和16S rDNA序列分析结果表明,该菌株为假单胞菌Pseudomonassp.正交试验结果表明,该菌株最适宜生长条件为pH=8.5、盐度为30、氮磷比为10∶1.油培养基质量浓度为3 g/L时,将菌龄为48 h的细菌进行接种,平均除油率在70%左右,最高可达80.32%.海水培养基中絮状物特征表明,该菌株具有应用于海洋石油污染治理的潜质.     

莲瓣兰内生真菌利用碳源的生理学特性研究

对分离自莲瓣兰根内的5株内生真菌利用碳源的生理学特性进行研究，方法是三点种植实验，培养5d，测量碳源培养基上内生真菌菌落直径，同时，进行液体培养5d，将菌丝过滤，烘干至恒重，计算菌丝干重。结果：这5株内生真菌利用碳源能力各不同；其中，属于木霉属的LP161菌株对各种碳源均有很好的利用能力，尤其在纤维素培养基上生长最快；并且，LP161菌株在葡萄糖液体培养基内生长最快，培养5d后菌丝干重达到1．18g/100ml。     

利用ATC产半胱氨酸菌的筛选及产酶条件的测定

从土样中分离筛选出一株性能较好的能利用 2 -氨基 - Δ2 -噻唑啉 - 4羟酸 (2 - Amino- Δ2 -thiazoline- 4 - carboxylic acid ATC)合成半胱氨酸的菌株 SB- 6。该菌的较适产酶培养基 :葡萄糖2 % ;(NH4 ) 2 SO4 0 .3% ;无机盐溶液 ;较适产酶条件 :培养基起始 p H值为 7.5;33℃振荡培养。加大通气量 ,以甘油为碳源有益于产酶。菌体的生长条件与产酶条件略有不同     

台湾海峡海洋耐（嗜）盐真菌及其抗菌活性的初步研究

从福建厦门、晋江及诏安沿海等4种生境采集到的样品中分离得到390株耐(嗜)盐真菌,对其进行耐盐程度测定和抗菌活性检测,结果表明分离所得的菌株普遍能耐受较高盐浓度,超过85%的菌株可在含15%NaCl的培养基上生长;同时有63.3%的菌株表现出了对一种或多种指示菌具有拮抗作用,尤其是对白色假丝酵母有56.7%的供测菌株表现出拮抗活性.通过形态鉴定表明这些活性菌株主要分布于9个属,其中以青霉和曲霉为主.     

一株耐盐菌GL的分离鉴定及促生特性分析

利用海底的淤泥进行分离挑选得到一株耐盐性较强的菌株，该菌为细长的棒状且菌体较长，菌落发白，用接种针易刮起，发出微臭气息.经过16S rRNA序列比对，该菌株与嗜热脂肪土芽孢杆菌菌株GL(KX254601.1)之间关系可信度达到100%,故将其定名为嗜热脂肪土芽孢杆菌(GL).经过对该菌株在1%～10%盐浓度下生长曲线分析，3%～6%的NaCl浓度内菌株最高OD₆₀₀能达到1.5,但是当盐浓度达到10%时菌株生长受到严重影响.菌株GL在1%～9%盐浓度下长势良好，其最佳生长盐浓度为2%.对该菌种的固氮、产铁载体以及促进种子萌发能力进行分析，可以看到在0～2.5%盐浓度下，Ashby无氮培养基上菌落周围均有透明圈，说明该菌株在0～2.50%的盐浓度下具有较好的固氮能力.菌株在0～150 mmol/L的盐浓度下可以产生铁载体，能够促进小白菜种子在盐胁迫条件下萌发和生长，说明该菌株在盐胁迫条件下具有较好的促生特性.     

纤溶酶高产菌株筛选及其液体发酵条件研究

研究实验室自主分离的2株纤溶酶高产菌株发酵条件,采用4因素、3水平的正交试验设计方法对液体发酵培养基的碳源、氮源、无机盐进行了优化,并对培养基初始pH、发酵时间、发酵温度对产酶量的影响进行了测定.结果表明:菌株1液体发酵合适的产酶培养基配方为大豆粉的质量分数为6%,葡萄糖2%,CaCl2 0.06%,MgSO4 0.07%;菌株2液体发酵合适的产酶培养基配方为大豆粉的质量分数为6%,玉米淀粉2%,CaCl2 0.06%,MgSO4 0.07%.培养基初始pH均为6.5时酶活性最高;发酵温度均以38℃最好;而菌株1和菌株2的适宜发酵时间分别为48～84 h和60～84 h.在优化条件下,菌株1、菌株2液体发酵最高酶活分别为306.46 IU/mL和319.76 IU/mL。     

苯酚降解菌株GXY-1分离鉴定、降解及其粗酶特性研究

从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株GXY-1.通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株GXY-1属于布鲁氏杆菌属(Brucella sp.).实验结果表明,菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感,其降解苯酚的最佳条件为温度30℃,pH7.0.在最佳条件下,GXY-1对600mg/L苯酚的降解率在60h时达99%以上.同时GXY-1还可以利用苯胺、萘、氯苯等芳香化合物为唯一碳源生长.测定了降解途径中相关酶的活性,表明菌株GXY-1是通过邻苯二酚1,2双加氧酶催化开环来降解苯酚.该菌株粗酶的最适反应pH为7.8,最适反应温度为40℃.     

海洋弧菌NTi产琼胶酶的发酵条件优化

以琼胶酶活力为主要指标,采用单因素与响应面相结合的方法,对降解琼胶的海洋弧菌NTi(Vibrio natriegens NTi)发酵产琼胶酶的摇瓶发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,α-乳糖对菌株产酶具有较强的抑制作用,NH+4不利于菌株生长和产酶。培养基分别以3. 3 g/L琼脂、6. 33 g/L酵母膏为唯一碳源及氮源,添加20 g/L的Na Cl,发酵海洋弧菌V. natriegens NTi产琼胶酶的效果最佳。发酵过程中的p H值、接种量、装液量、温度、发酵时间最优值分别为6. 5、2%、32 m L、27℃和24 h。优化后,该菌产琼胶酶活力达到2. 81 U/m L,比优化前增加了230%。     

烟台海域一株中度嗜盐芽孢杆菌YTM-5的鉴定及其耐盐机制研究

从山东烟台近海盐场泥样中分离得到菌株YTM-5,该菌株能在1%～15%NaCl的培养基中生长,最适宜生长条件为：3%NaCl,温度为37℃,pH值为8。经过形态学观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列测定,鉴定该菌株为芽孢杆菌Bacillus。高压液相色谱分析表明YTM-5菌体内含有相容性溶质四氢嘧啶,其含量随培养基内NaCl含量的增加而增加,当NaCl含量达到7%以上时,一直维持较高的水平,以稳定此逆境下的渗透平衡。该菌株的发现为开发烟台海域海洋微生物资源及相关抗盐基因的利用奠定了基础。