澳大利亚进口禽用隔离器空气净化系统检漏实验

澳大利亚进口禽用隔离器空气净化系统检漏实验邢松年中国核工业第二研究设计院比尼洁净技术公司隔离器是培育饲养高标准高质量——无菌和悉生动物以及禽类的重要设备，也是临床医学、实验医学以及工业科学等领域科学研究中不可缺少的设备之一。隔离器的无菌隔离性能的维持...     

SPF隔离器的使用和保养

SPF设施是进行实验动物饲育、维持、保种、生产、实验研究的设施,本文从净化的角度阐述了SPF设施(正/负压隔离器)的使用和保养,以满足隔离系统对无菌动物和悉生动物的饲育.     

澳大利亚进口禽用隔离器空气净化系统检漏实验

<正> 隔离器是培育饲养高标准高质量——无菌和悉生动物以及禽类的重要设备,也是临床医学、实验医学以及工业科学等领域科学研究中不可缺少的设备之一。而隔离器的无菌隔离性能的维持,其中最重要的部分是空气过滤系统。而过滤净化微生物的效果又与很多因素有关,其中最重要的是过滤系统是否存在漏孔,因此必须对空气过滤系统进行严格的检漏实验,才能发挥隔离器的主要功能。为此,1989年3月经北京实验动物中心介绍,我们对中澳合作项目——天津禽病诊断研究中心从澳方进口的养鸡专用隔离器     

实验动物细菌鉴别用血清的制备及标化

目的制备并标化16种实验动物相关病原菌鉴别诊断血清。方法将16种标准菌株灭活,制成适宜浓度的免疫用细菌菌液,分别经耳缘静脉和背部皮下多点注射32只SPF家兔,获得相应抗血清,经吸收去除非特异性凝集,制成特异性诊断血清。结果以玻片法和定量凝集法进行敏感性及特异性试验,结果显示抗血清只与相应的免疫用细菌形成特异性的凝集颗粒,抗血清凝集效价≥1∶1 280。结论所制备的抗血清特异性强、效价高,为实验动物细菌学检测提供了有效的血清学鉴别诊断试剂。     

线性可调、拆装更换快捷安全的隔离器空气净化装置

隔离器是SPF级啮齿类动物保种的首选环境。隔离器的空气净化装置对于其软包内空气的流通、有害气体的排出以及动物的微生物控制十分重要,所以隔离器的空气净化装置是其最重要和最核心的装置之一。因此,结合实验动物生产实际,研发一种新型的线性可调、拆装更换快捷安全的隔离器空气净化装置,避免了隔离软包被污染的风险。     

江苏省地方标准(DB32/T1216-2008):实验动物笼器具 隔离器

为保证实验动物质量和动物实验结果的准确性,规范实验动物笼器具隔离器质量,制定本标准。     

表皮生长因子受体Ⅲ型变异体(EGFRvⅢ) 多克隆抗体的制备及特异性

为了制备针对EGFRvⅢ的特异性多克隆抗体,在实验中利用耦联了血蓝蛋白的EGFRvⅢ特异性的PEP3合成短肽进行动物免疫,制备抗血清;构建了pET30a/E33XI原核表达载体,表达和纯化了融合蛋白His-E33(EGFRvⅢ的部分胞外区);以此融合蛋白作为抗原制备了抗体纯化柱,通过柱上纯化的方法从抗血清中提取针对EGFRvⅢ的特异性抗体.利用U87、U251、HeLa和HEK-293细胞进行免疫组化实验来检验抗体的特异性.     

采用隔离器、洁净饲育柜批量繁育清洁动物的尝试

１９８６年,在国内尚无批量生产科研用无特定病原体动物（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｆｒｅｅ ａｎｉｍａｌｓ）简称（ＳＰＦ）和清洁动物（Ｃｌｅａｎ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ａｎｉｍａｌ）简称（ＣＣＶ）的简称（ＣＣＶ）的情况下,为尽快繁育出国际同类实验动物而开始了此项研究工作。采取的主要方法是：土洋结合,土法上马,改造原有的开放饲养动物设施,采用隔离器和洁净饲育柜,批量繁育上述实验动物。取得     

单克隆抗体及其应用

免疫学实验一向是以用特定抗原免疫动物所制得的抗血清作抗体用或从其中提取抗体,由于天然抗原大都是复杂物质,其表面可有多个相同的或不同的抗原决定簇,用其免疫动物所制得抗血清多是针对多种不同抗原决定簇的抗体的混合物,可与其它抗原发生交叉反应,使得免疫学实验不可能成为一种高度特异的实验;此外,由于受免疫动物的种属和个体差异的影响,所制备的抗血清的亲和力也不稳定,给结果的解释带来一定困难。因此,寻求一种高度特异性、高度均一性的抗体,是免疫学家们梦寐以求的目     

无菌隔离器与超净工作台、洁净层流柜的直连改造尝试

为了解决无菌隔离器在开放环境下进行清洁级、SPF级动物实验的问题,将隔离器与超净工作台、层流柜分别进行了直连对接改造,经过改造的屏障设施成本低,操作简便、安全,能提高工作效率,实验效果良好。     

液相芯片技术检测马立克氏病病毒方法的建立

目的 建立检测马立克氏病病毒的双抗夹心液相芯片技术方法。方法 将捕获抗体偶联到19号微球,分别确定捕获抗体的偶联量、检测抗体和SA-PE抗体的工作浓度,用建立的液相芯片方法进行特异性、灵敏度、重复性及临床样品的分析。结果 1×106个荧光编码微球的抗体偶联量为2 μg,最佳的检测抗体与SA-PE的工作浓度分别为2 μg/mL和4 μg/mL。该方法特异性强,只检出马立克氏病病毒,其他病毒未检出;灵敏度为125 pfu/mL;批内批间的变异系数分别为0.85%和2.4%;对58份临床样品检出率为31%。与PCR方法比较,符合率为94.8%。结论 建立的马立克氏病病毒液相芯片检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点。该方法可用于马立克氏病的监测,也可用于SPF鸡的筛选。     

以新换旧--用独立通风笼盒(IVC)取代弹性薄膜隔离器

独立通风笼盒是应生物密封标准不断提高的需要而发明的。这些笼盒为动物提供了一个密封的环境 ,并且对空气携带的污染物的阻断也有很大的帮助。由于转基因动物增多 ,独立通风笼盒应用越来越广泛。它能有效地预防交叉污染 ,并且能可不同来源的动物住在一块 ,而不需要考虑它们的健康状况。本篇将对独立通风笼盒和弹性薄膜隔离器做一个比较。传统的弹性薄膜隔离器被用来把健康状况已经明确的动物放在一起 ,如 ,悉生动物和无菌动物。隔离器是二战时期特雷克斯勒和雷尼尔为研究恙虫病时发明的。如今 ,用隔离器来给动物提供住处经常会遇到这样的问…     

应用PCR技术对家禽病毒性肿瘤病进行鉴别诊断的研究进展

概述聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术应用于家禽马立克氏病、禽白血病和网状内皮增生症鉴别诊断的研究进展,主要内容包括病毒的基因组结构特征,各病毒的特异性基因或序列及其ＰＣＲ引物的位置和序列,以及ＰＣＲ技术对肿瘤病特异鉴别诊断的应用。将ＰＣＲ技术与其它传统的技术进行比较,ＰＣＲ技术具有敏感性高、特异性好、快速、简便的特点,是目前鉴别诊断家禽病毒性肿瘤病最有效的、最快捷的方法之一。     

基因治疗中病毒载体的研究进展

目的:在基因治疗作为一种全新的疾病治疗手段得到了迅速发展的同时,探讨病毒载体在基因治疗中的应用。方法:通过对各种病毒载体的改造和完善,扩大其载体容量,提高基因的转染效率和克服体内的免疫反应等手段,可使病毒载体的应用更加符合临床的需要。结果:改造过的病毒载体大大提高了载体靶向的特异性和应用范围。结论:病毒以其独特的生物学特性作为基因治疗载体有着独特优势,在临床上得到了广泛应用。     

基于Revit平台的隔震支座快速建模模块开发与应用

随着隔震技术的推广应用以及建筑业信息化水平的持续提升,在隔震工程中对隔震层建筑信息模型(building information modeling, BIM)建模的需求逐渐增长,然而针对性的研究工作相对较少。为此,围绕隔震支座BIM模型的高效建模方法和应用模块开展了研究。首先,综合隔震支座应用情况和力学特性,可将其分为橡胶隔震支座、滑移摩擦隔震支座和其他类型隔震支座,据此提出了隔震支座BIM快速建模模块基本架构;随后,基于Revit和Visual Studio平台开发了三类隔震支座BIM模型的快速建模功能,并实现了连接节点参数化建模和支座批量/手动布置的操作功能;最后,开展了某化工公司的库房隔震加固项目的隔震层BIM模型建模实践,结果表明：利用快速建模模块可将隔震层BIM建模操作从7个步骤降低至2个步骤,且使用过程中对隔震支座构造细节的认知要求相对较低。同时,建成后的BIM模型与实际工程在建筑信息的多个方面具有较好的一致性。相关研究可为建筑和桥梁隔震工程的BIM建模提供参考和借鉴。     

隔振器最佳选择方案

针对工程中隔振器的选择问题,在满足隔振系统总刚度和总阻尼不变的条件下,运用有限元方法分析了隔振器三种选择方案中结构的动力响应.结果表明:隔振器选择不同会在很大程度上影响初设隔振系统的性能.当选择隔振器刚度大、个数少,隔振器与结构接触面少时,隔振系统能够起到更好的隔振作用.     

实验动物雪貂阿留申病病毒核酸检测方法的建立

目的 建立阿留申病病毒PCR检测方法,以用于实验动物雪貂阿留申病病毒的检测。方法 参考Genebank中阿留申病病毒核酸VP2基因序列设计一对引物,建立PCR检测方法,进行特异性、敏感性测试,并对实验雪貂粪便样品进行筛查。结果 测序结果显示,使用设计的引物可特异性地扩增获得阿留申病病毒的VP2中531 bp基因片段;在常见实验动物DNA病毒,小鼠多瘤病毒、小鼠细小病毒、犬细小病毒、疱疹病毒、鼠痘病毒、仙台病毒、小鼠腺病毒中均未扩增出目的条带;以目的片段核酸为模板测试该方法敏感性,检测下限达到90. 6 copy/μL。应用该方法对39份雪貂粪便样品进行检测,未检测出阿留申病病毒核酸阳性。结论 本研究建立的方法具备一定的特异性和敏感性,可作为实验动物雪貂中阿留申病病毒感染病原筛查的方法。     

猴免疫缺陷病毒(SIV)双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

目的研制灵敏、特异的检测血清中猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus,SIV)的双抗原夹心ELISA(dsELISA)诊断试剂盒并进行初步应用。方法采用原核表达系统表达并纯化的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)包膜蛋白(gp41)作为包被用抗原,建立dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,研制ELISA诊断试剂盒,经敏感性、特异性和重复性试验考核试剂盒的质量,并与美国BIORELIANCE公司试剂盒进行比较,将结果经美国VRL验证,判断本试剂盒与美国BIORELIANCE公司试剂盒两者之间的符合率。结果该试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。4℃条件下能保存8个月,与其他血清无交叉反应,与美国BIORELIANCE公司试剂盒检测结果的符合率为96%。结论研制成功的实验猴SIV ELISA检测试剂盒可用于临床检测。     

禽源沙门氏菌快速检测方法研究进展

摘要:沙门氏菌病是一种重要的人畜共患病,一直威胁着畜禽健康和食品安全。 当前正值我国大力推进沙门氏菌、淋巴白血病的种禽净化政策,但传统检测方法存在检测时间长、血清型和致病力无法区分的技术瓶颈,严重制约了沙门氏菌净化效率和净化进程,也限制了食品安全检测的准确性。 针对沙门氏菌临床快速检测存在的技术壁垒,本文对细菌分离、血清学诊断、PCR 诊断技术、基因芯片诊断等技术进展进行文献综述,旨在为禽源沙门氏菌新型检测技术的建立与应用提供借鉴。     

Identification of nuclear proteins encoded by viral and cellular myc oncogenes

The myelocytomatosis viruses are a family of replication-defective avian retroviruses that cause a variety of tumours in chickens and transform both fibroblasts and macrophages in culture through the activity of their oncogene v-myc. A closely related gene (c-myc) is found in vertebrate animals and is thought to be the progenitor of v-myc. Changes in the expression and perhaps the structure of c-myc have been implicated in the genesis of avian, murine and human tumours (for a review, see ref. 15). Elucidation of the mechanisms by which v-myc and c-myc might elicit tumorigenesis requires identification of the proteins encoded by these genes. To this end, we have expressed a portion of v-myc in a bacterial host and used the resulting protein to raise antisera that react with myc proteins. We report here that v-myc and c-myc encode closely related proteins with molecular weights (MWs) of approximately 58,000. Integration of retroviral DNA near or within c-myc in avian lymphomas apparently enhances expression of the gene. Here we have used cells from one such tumour to identify the protein encoded by c-myc and find that the coding domain for the gene is probably intact.