咪唑类物质KK-42对日本沼虾头胸甲中MnCP-3表达的影响

为了分析咪唑类物质KK-42对日本沼虾表皮蛋白(Macrobrachium nipponense cuticle proteins,MnCPs)基因表达的影响,首次在头胸甲中克隆得到一条基因,通过生物信息学分析确定其属于CPs基因,并将其命名为MnCP-3.采用Real-Time PCR(RT-PCR)测定了MnCP-3基因在头胸甲中蜕皮间期(C)、蜕皮前早期(D0-2)、蜕皮前晚期(D3-4)和蜕皮后期(A)4个不同蜕皮时期中的表达水平以及KK-42处理后表达水平的变化.结果显示,MnCP-3在D3-4期和A期表达较高.KK-42处理后,C期MnCP-3的表达水平在处理后3～48h相对于对照组显著升高,在D0-2期MnCP-3的表达水平在3、6、24和48h显著升高.结果提示,MnCP-3可能参与新的外表皮和内表皮形成,KK-42处理可显著诱导C期和D0-2期MnCP-3的表达,提前启动蜕皮过程的进行,加快新表皮的形成.     

日本沼虾表皮几丁质结合蛋白基因的克隆以及KK-42对其表达的影响

为探讨KK-42缩短日本沼虾蜕皮周期的可能机制,首次从日本沼虾步足表皮组织克隆了编码几丁质结合蛋白的一个新基因——MnCBP-1部分cDNA序列,对其序列进行生物信息学分析,qRT-PCR技术检测MnCBP-1基因的表达水平以及KK-42的影响.结果表明,MnCBP-1基因部分cDNA序列为1396bp,含有特征性的几丁质结合结构域(chitin-bind-4),经BLAST比对,MnCBP-1与蚤状溞相似性为44%.qRT-PCR结果显示,步足表皮组织内MnCBP-1基因表达量随着蜕皮前期(D0-2)的开始逐渐增多.KK-42处理后,蜕皮间期(C)幼虾内MnCBP-1基因表达水平分别在6、12、24和48h比对照组显著升高,而在D0-2期和D3-4期MnCBP-1基因转录物仅在个别时间点有所增多.研究表明,MnCBP-1基因表达与蜕皮周期有关,KK-42处理可显著诱导MnCBP-1基因表达,且表达的高峰提前至C期,这可能是KK-42缩短蜕皮周期的机制之一.     

KK-42对日本沼虾蜕皮前期外骨骼结构及NAGase活力的影响

近期研究发现,适宜浓度的KK-42处理能显著缩短日本沼虾幼虾蜕皮周期.新旧表皮的更替是蜕皮的重要事件,蜕皮前期是表皮外骨骼结构变化最剧烈的时期.据此,从组织学水平观察了幼虾头胸甲外骨骼结构以及KK-42的影响,定量分析了肝胰腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)在KK-42处理后不同时间的活力.将处于蜕皮前期(D1-4)、体长(3.3±0.5)cm的日本沼虾随机分为两组,分别用1.95×10-4 mol·L-1的KK-42溶液(实验组)或不含KK-42的溶液(对照组)浸泡处理1min,处理后不同时间,组织学方法观察头胸甲外骨骼结构,分光光度法测定肝胰腺NAGase活力.结果显示,KK-42处理后第3d,D3期和D4期幼虾头胸甲表皮厚度与对照组相比分别提高29.76%和35.23%(P0.01);KK-42处理后12h,D3期和D4期肝胰腺NAGase活力显著高于对照组.结果表明,KK-42处理可显著增加蜕皮前期日本沼虾头胸甲表皮外骨骼的厚度,并对肝胰腺NAGase活力具有诱导作用.     

日本沼虾表皮Serpin基因克隆及免疫功能的初步研究

丝氨酸蛋白酶级联反应介导的黑化是甲壳动物重要的免疫反应,丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine proteinase inhibitor, Serpin)是黑化反应的重要调节因子,而甲壳动物表皮Serpin的有关研究较少.为了探索表皮Serpin在日本沼虾(Macrobrachium nipponense)免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,利用PCR、RACE和生物信息学从日本沼虾表皮克隆并鉴定了1个新的Serpin基因,命名为MnSerpin,利用RT-qPCR和RNAi等方法,研究了该基因时空表达模式、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒后表皮MnSerpin的转录水平以及日本沼虾死亡率的变化.结果显示,MnSerpin cDNA全长2 181 bp,编码419个氨基酸,具有Serpin结构域.MnSerpin在腹背部表皮、鳃、血细胞、胃、心、肝胰腺等多种组织均有表达;表皮MnSerpin的表达与蜕皮周期有关,与蜕皮间期(C期)相比,在蜕皮后早期(A期)最高,增加6.06倍(P<0.01).嗜水气单胞菌攻毒后,表皮MnSerpin的相对表达量在6 h达到...     

咪唑类物质KK-42对日本沼虾表皮矿化的影响

甲壳动物为了生长必须周期性地褪去旧表皮，新表皮的形成及矿化与蜕皮周期密切相关.前期研究发现，KK-42能够缩短日本沼虾蜕皮周期、加速表皮的形成.为了进一步探究KK-42对表皮矿化的影响，以矿化相对稳定的蜕皮间期(C期)头胸甲表皮为参照，选择蜕皮后3,6,12 h的头胸甲，采用扫描电镜/能谱仪法(SEM/EDX),在超微水平初步研究了表皮的矿化进程及KK-42处理对表皮矿化的影响.结果显示，对照组头胸甲表皮中钙、镁、磷信号在蜕皮后3 h开始出现，6 h钙、磷信号在上/外表皮的边缘处密集分布，此后逐渐向表皮内侧延伸.镁信号一直呈弥散状分布.半定量数据分析显示，与蜕皮后3 h相比，6,12 h及C期表皮中，钙原子比例分别提高了67.86%(P<0.01),402.78%(P<0.01),2 191.67%(P<0.01);镁原子比例分别提高了95.92%(P<0.05),122.45%(P<0.05),165.31(P<0.05);磷原子比例分别提高了82.46%(P<0.05),205.26%(P<0.01),591.23(P<0.01...     

谈虾

庞杂的虾类家族虾的种类繁多,我国已发现的有400余种,其中绝大多数为海产.如对虾(明虾)、新对虾、仿对虾、赤虾、鹰爪虾、管鞭虾、毛虾(干制品为虾皮)、长臂虾、长额虾、鼓虾、藻虾、褐虾、龙虾、扇虾、海磷虾等;淡水产的有青虾(沼虾)、米虾(草虾)等;还有些是半咸水产的,如白虾等.它们形态不一,栖息环境和生活习性也各异.虾属甲壳动物,有5对步足,所以称它为十足类(目).由于虾的腹部发达,又把虾称为长尾类.后来认为这样分类也不太科学,因为虾类中有游泳生活的和爬行生活的,所以就把游泳虾类归于     

池养脊尾白虾形态性状对体重的影响效应

随机选取3月龄同生群池养脊尾白虾90尾,分别逐尾测量其体重(BW)、体长(BL)、头胸甲长(CL)、头胸甲宽(CW)、头胸甲高(CH)、腹部高(AH)、腹部宽(AW)、腹部长(AL)、额剑长(RL)和尾扇长(TL)等10项生物学指标,并采用多元统计学方法分析了形态性状对体重的影响效应。结果表明:(1)除RL与AL间相关系数未达显著水平(P0.05)外,其余均达极显著水平(P0.01);(2)CL、CW、TL和AH是影响该虾体重的主要形态性状,通径分析和决定程度分析均指示CL为决定该虾体重的关键变量;(3)所建多元回归方程BW=1.847 CL+1.657 CW+1.110 TL+0.954 AH-3.825(R2=0.931,P0.01)可用于准确估算池养脊尾白虾的体重。     

黑斑口虾蛄的形态参数关系的分析

对506尾黑斑口虾蛄(Oratosquillakempi)的体长、头胸甲长、尾扇长、体重、肉壳重和肉壳干重、性腺重等进行了测定分析．研究表明黑斑口虾蛄的体长与体重呈幂函数关系．体长与头胸甲长、尾扇长,体重与肉重、壳重、性腺重都呈线性相关．这些形态参数在雌雄间有一定差异,雄性在12月份,肥满度最大,雌性从3月份开始肥满度不断上升,5月份达到最大．据推测,黑斑口虾蛄的繁殖期在4～8月．     

3种沼虾的16S rRNA基因序列分析

为从分子角度理解3种沼虾,即罗氏沼虾、日本沼虾和祁连沼虾的遗传差异,为沼虾资源的管理、保护和合理开发利用提供理论基础,采集了每种沼虾各2尾样本,采用PCR的方法扩增了其线粒体16S rRNA基因片断并测序。比对后共获得了3种沼虾的297 bp的16S rRNA片断序列,共检测到47个变异位点,总变异率为15.8%。3种沼虾的平均碱基含量分别为T(37.7%)、C(10.9%)、A(29.8%)和G(21.6%)。罗氏沼虾种内个体间序列差异为3%。祁连沼虾和日本沼虾种内个体间差异均为0.7%,且两者种间差异很小,为0～0.7%。罗氏沼虾与祁连沼虾、日本沼虾之间的序列差异在13.1%～14.8%之间,种间差异明显。系统进化树显示罗氏沼虾自成一枝,而日本沼虾和祁连沼虾共同构成另一枝,日本沼虾和祁连沼虾的遗传距离小于5%,结果提示日本沼虾和祁连沼虾有很近的亲缘关系,两者也许是亚种关系。     

1,25-(OH)_2D_3对阿霉素肾病大鼠足细胞的保护作用

目的研究维生素D3[1,25-(OH)_2D_3]对阿霉素(adriamyicin,ADR)肾病大鼠足细胞损伤的影响。方法将60只ADR诱导的雄性SD大鼠随机分为阿霉素模型组(ADR)和维生素D3治疗组(ADR+1,25-(OH2)D3),另取30只大鼠作为空白对照组(control)。给予活性维生素D3进行干预,实验期间,每天观察和记录大鼠的行为和外观,并每周记录体重。于注射ADR后第2、4、6、8、10周采集大鼠24 h尿样,检测大鼠24 h尿蛋白定量(urine total protein,UTP)。腹主动脉采血,测定血清总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,Alb)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、肌酐(creatinine,Cre)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),取肾并称肾重。透射电镜观察肾脏足细胞和基底膜的变化,肾组织nephrin蛋白表达的检测通过免疫组化技术实现。结果生化结果显示,同时期内,模型组大鼠UTP、Cre、BUN、TC水平比对照组明显升高(P0.05),TP、Alb显著降低(P0.05);与模型组相比,治疗组大鼠各项指标有明显的改善趋势(P0.05)。透射电镜结果显示,模型组大鼠肾小球内上皮细胞足突融合、脱落严重,胞体内出现异常颗粒;治疗组足细胞损伤有所修复。免疫组化结果显示,nephrin蛋白于肾小球足细胞胞膜处表达,对照组大鼠可见强阳性表达,模型组大鼠表达明显降低,活性维生素D3治疗后有所逆转。结论 1,25-(OH)_2D_3对阿霉素肾病大鼠足细胞损伤有修复作用:能够上调nephrin蛋白的表达,减少蛋白尿以及足细胞足突融合脱落,从而起到保护肾脏的作用。     

携带并殖吸虫囊蚴的华溪蟹新亚种报告(十足目:短尾派)

本文报道了充当并殖吸虫第二中间宿主,分布于福建省霞浦、福安、寿宁、福鼎、拓荣县(市)的淡水华溪蟹,经鉴别,均非福建华溪蟹(Sinopotamon fukienense),而是浙江华溪蟹新亚种Sinopotamon chekiangensemindongense subsp,nov.,澄清了蟹种分类。     

日本沼虾胚胎发育时期消化酶活力和氨基酸含量

采用生物化学方法测定了日本沼虾胚胎发育过程中四种消化酶的比活力和氨基酸的含量.结果显示：卵内可溶性蛋白的含量随着胚胎的发育逐渐下降，但在原肠期的可溶性蛋白含量略高于囊胚期.四种消化酶中类胰蛋白酶、胃蛋白酶和淀粉酶活力在胚胎发育早期和后期较高，中期较低.纤维素酶活力较低且在胚胎发育过程中变化规律不明显.总氨基酸含量在胚胎发育早期下降较快，胚胎发育至后无节幼体期氨基酸含量下降幅度变缓.必需氨基酸中亮氨酸的含量高,非必需氨基酸中谷氨酸的含量最高.单个必需氨基酸含量与必需氨基酸总量的比值（A/E）在整个胚胎发育过程中的变化基本趋于一致.     

莠去津对雌性日本沼虾的毒性作用

研究莠去津对雌性日本沼虾的生殖毒性,为其养殖水体水质管理提供依据.以概率作图法计算日本沼虾24,48,72和96 h的半致死质量浓度,并观察各暴露组卵巢组织结构的变化.通过胁迫实验,研究莠去津对暴露4 d和8 d的日本沼虾卵巢乳酸脱氢酶(LDH)比活力的影响.结果表明:22℃时,莠去津对雌性日本沼虾24,48,72和96 h的半致死质量浓度分别为134.23,90.24,52.57和46.36 mg/L,安全质量浓度为4.64 mg/L;卵巢急性毒性实验切片显示,随莠去津质量浓度的增大,卵母细胞间隙增大,胞体膨大、变形.胁迫实验表明,低质量浓度莠去津在短时间内对卵巢LDH活力有诱导作用,当质量浓度高于0.46 mg/L时,LDH活力明显受到抑制.本研究提示,莠去津对雌性日本沼虾具有生殖毒性作用.     

饥饿补偿对日本沼虾生长及生化组成的影响

在(25.0±1) ℃范围条件下,对日本沼虾进行了不同时间的饥饿处理后再投饵的恢复生长实验.饥饿过程中,虾体水分、灰分含量略有上升,蛋白质和脂肪含量以及RNA/DNA值有不同程度下降.分别给饥饿处理0(对照),2,4,8 d的日本沼虾投饵,在恢复生长结束后,各饥饿处理组的虾体生化组成均接近并恢复到对照组水平.饥饿处理组在恢复生长中的特殊生长率、摄食率和食物转化率显著高于对照组,实验结果表明,日本沼虾继饥饿后再恢复喂食不仅食欲增加,而且摄食水平和食物转化率均有所提高,出现完全或部分补偿生长效应.     

亚油酸对培养日本沼虾肝胰腺细胞的影响

对日本沼虾肝胰腺细胞进行培养,采用M199 (GIBCO BRL) 细胞培养基加质量分数为10%的胎牛血清,添加的补充成分有:NaCl,NaHCO3,MgCl2,CaCl2,葡萄糖,青霉素和链霉素.同时对pH和渗透压两因子进行了研究,结果表明pH 7.0～7.2、渗透压为600 μmol/g时,细胞长势最好.以此作为培养条件,在培养基中加入促细胞生长因子的亚油酸,发现其促生长作用明显,其中亚油酸浓度为16×10-5 mol/L时,促进作用最好.日本沼虾肝胰腺细胞共继代2次,存活时间约45 d.     

关于联立Pell方程组x2-4D1y2=1和y2-D2z2=1

设D1是正整数。本文证明了如果4D1=r^2-1,其中r是正整数,则至多有1个奇D2数D2可使联立Pell方程组x^2-4D1y^2=1和y^2-D^2z^2=1有正整数解。